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そのままオルガネラ観察に使用できる細胞 蛍光標識オルガネラタンパク質定常発現細胞

掲載日情報：2021/11/09 現在Webページ番号：70039

エクスプレスセルズ /
ExpressCells, Inc.
[メーカー略称：EPS]

蛍光タンパク質をノックインすることで染色を不要にしたオルガネラ観察用細胞をご紹介します。
ExpressCells社は、CRISPR/Cas9と独自技術Fast-HDR法の組み合せによる短時間での遺伝子編集で作製した、タンパク質安定発現細胞株を提供しています。
また、この技術を用いてのカスタムセルラインの受託作製も承っています。

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

蛍光標識オルガネラタンパク質定常発現細胞

多重タグ遺伝子ノックイン細胞株 (HeLa)（#EXP-008）
赤色：オートファゴソーム、緑色：細胞骨格、青色：核

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特長

  • 細胞を培養するだけで、オルガネラの顕微鏡観察が可能です。
  • 内因性タンパク質発現遺伝子の下流に蛍光タンパク質などを挿入しているため、マーカータンパク質本来の発現量を維持し、過剰発現によるアーティファクトを低減できます。
  • ノックインしたマーカータンパク質を発現させているため、トランスフェクション、化合物染色、抗体染色などの操作が不要です。
  • Crispr/Cas9による選択的な遺伝子編集のため、他の遺伝子のサイレンシングを低減しています。

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製品ラインナップ

蛍光タンパク質のノックインにより、核、ミトコンドリア、細胞膜、オートファゴソームの観察が可能な細胞をラインナップしています。

※ 商品コードをクリックすると、各製品の価格表をご覧いただけます。

細胞種 標的タンパク質 局在部位 蛍光タンパク質
タグ		 波長（nm） 抗生物質抵抗性 接合型 商品
コード
HeLa Ezrin Plasma membrane mRuby3 558 / 592 ZeocinTM ホモ EXP-001
HeLa TOM20 Mitochondria mRuby3 558 / 592 ZeocinTM ヘテロ EXP-003
HeLa β-tubulin Cytoskeleton mClover3 506 / 518 Puromycin ヘテロ EXP-004
HEK293T Histone H3.3 Nucleus mRuby3 558 / 592 ZeocinTM ヘテロ EXP-005
HEK293T β-tubulin Cytoskeleton mClover3 506 / 518 Puromycin ヘテロ EXP-006
HEK293T PARP1 Nucleus mClover3 506 / 518 Puromycin ホモ EXP-007
HeLa Sequestome-1/p62 Autophagy receptor mRuby3 558 / 592 ZeocinTM ヘテロ EXP-008
β-tubulin Cytoskeleton mClover3 506 / 518 Puromycin
Histone H1.2 Nucleus mtagBFP2 399 / 454 Blasticidin
HEK293T Histone H3.3 Nucleus mRuby3 558 / 592 ZeocinTM ヘテロ EXP-009
β-tubulin Cytoskeleton mClover3 506 / 518 Puromycin
ATP Synthase subunit beta Mitochondria mtagBFP2 399 / 454 Blasticidin
U2 OS Sequestome-1/p62 Autophagy receptor mRuby3 558 / 592 ZeocinTM ホモ EXP-019
U2 OS MAP1/LC3B Autophagy receptor mClover3 506 / 518 Puromycin ホモ EXP-020
U2 OS Sequestome-1/p62 Autophagy receptor mRuby3 558 / 592 ZeocinTM ホモ EXP-021
MAP1/LC3B mClover3 506 / 518 Puromycin

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アプリケーション

  • オルガネラ膜の動態解析
  • 化合物ライブラリーがオルガネラに与える影響のスクリーニング
  • タンパク質－オルガネラ膜の相互作用解析
  • 細胞内輸送解析
  • 次世代毒性試験
  • ハイコンテントスクリーニング

など、様々なオルガネライメージング研究に有用です。


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ExpressCells社 技術情報

※ 画像をクリックするとPDF版をダウンロードいただけます。

Flyer 2

左：オルガネラ観察用細胞フライヤー
（2ページ）

Flyer 1

中央：カスタムセルライン受託作製
フライヤー（2ページ）

Deck

右：オルガネラ観察用細胞の技術方法（13ページ）


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参考文献

Perez-Leal, O., et al., The CRISPR Journal, 4(6): 854～871 (2021). [PMID: 34847745]



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受託作製：カスタムセルライン

受託作製：カスタムセルライン (クリックで開閉します)

ゲノム編集技術Crispr/Cas9とExpressCells社の独自技術FAST-HDR法を用いることで、作業期間が最短14日でカスタム細胞株の提供が可能です。

受託作製：カスタムセルライン FAST-HDR Plasmid Vector System

遺伝子編集

  • 目的タンパク質のC末端にタグを付加
  • 目的遺伝子をノックアウト

特長

  • 独自技術Fast-HDR法を用いることで、作業期間が最短14日で作製できます。
  • 最大でトリプルノックインが可能です。
  • 定常発現／過剰発現が可能です。
  • 導入可能なタグの種類＊：Luciferase, mClover3, mRuby3, mTagBFP2

＊ その他のタグの付加をご希望の場合は、当社受託・特注品担当までお問い合わせ下さい（e-mail : jutaku@funakoshi.co.jp）。

実施例

■新規の抗がん剤候補物質がマイトーシスを抑制しているか評価したい。
→マイトーシス（有糸分裂）の時のみ発現するタンパク質を青色のタグで可視化

実施例（ケーススタディ）1

■薬剤候補のオルガネラへの影響を評価したい。
→細胞骨格、核、ミトコンドリアを明確に識別する3つの遺伝子を挿入

実施例（ケーススタディ）2

※ 詳細は当社受託・特注品担当までお問い合わせ下さい（e-mail : jutaku@funakoshi.co.jp）。



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価格

[在庫・価格 ：2024年04月17日 00時00分現在]

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Red Plasma Membrane (HeLa - Ezrin - mRuby3)

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（テクニカルサポート 試薬担当）

reagent@funakoshi.co.jp

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