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メーカー：	Horizon社Dharmacon製品 OriGene Technologies TransOMIC Technologies
	Horizon社Dharmacon製品(メーカー略称：DHA)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら OriGene Technologies社(メーカー略称：ORI)のTrueClone / TrueORF / TrueORF Gold cDNAクローンなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら TransOMIC Technologies社(メーカー略称：TOT)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら
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HOME> 試薬> 免疫化学> フローサイトメトリー> フローサイトメトリー用検出キット> MutaFlow In Vitro 150 Kit

マウス由来培養細胞のPig-a遺伝子変異細胞の割合を迅速に測定！ MutaFlow In Vitro 150 Kit

掲載日情報：2022/10/06 現在Webページ番号：69795

ライトロンラボラトリーズ /
Litron Laboratories LTD
[メーカー略称：LIT]

マウス胸腺リンパ腫由来の培養細胞（L5178Y TK+/-3.7.2c）のPig-a遺伝子変異細胞の割合を測定するキットです。
フローサイトメーターを用いて、迅速かつ高い再現性で測定することができます。

※ 血液中に存在するPig-a遺伝子変異細胞の割合を測定するキットは、In Vivo MutaFlow Plus Kitをご覧下さい。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

Pig-aと本キットの測定原理について
特長
細胞調製方法の概略
キット内容
価格

Pig-aと本キットの測定原理について

リンパ芽球系細胞の細胞表面には、GPI（グリコシルホスファチジルイノシトール）アンカーを介してCD90.2をはじめとした多くのタンパク質が付着しています。Pig-a（Phosphatidylinositol glycan anchor biosynthesis, class A）は、GPIアンカーの合成に必要な遺伝子の一つです。GPIアンカーの形成な必要な遺伝子のうち、このPig-a遺伝子だけがX染色体上に位置しており、変異が生じると機能的なアンカーが作れなくなり、細胞表面のGPIアンカー型タンパク質が欠如します。そのため、GPIアンカーと結合する細胞表面マーカーを持たない細胞は、Pig-a遺伝子変異について信頼できる表現型マーカーとなります。

本製品では、変異を持たない野生型のL5178Yの細胞表面に高レベルに発現しているCD90.2を標的とします。細胞表面のPE標識抗CD90.2抗体に由来する蛍光の消失をPig-a遺伝子変異の表現型レポーターとしてアッセイを行います。
Pig-a遺伝子変異

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特長

フローサイトメトリーを用いてPig-a遺伝子変異細胞を検出します。
測定可能な細胞株：L5178Y TK+/-3.7.2c＊
分析試料数：150試料

＊本製品はマウス胸腺リンパ腫に由来するL5178Y TK+/-3.7.2cを測定対象として開発されました。本製品に含まれる抗体はマウス抗原に特異的であり、他の細胞株への適用は検証されていません。

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細胞調製方法の概略

各細胞培養液（コントロール用を含む）をそれぞれ遠心分離し、2×10⁶個の細胞試料を用意する。
各試料にAnti-CD90.2-PE antibodyをBuffer solutionで希釈したComplete antibody solutionを各試料に加える。コントロール用の試料には Anti-CD45-FITC antibodyをBuffer solution + 1％FBSで希釈したIncomplete antibody solutionにIsotype control antibodyを加えて調製したWorking isotype control antibody solutionを加える。
それぞれの試料およびコントロールを96ウェルプレートの各ウェルにアプライし、遮光して4℃で20分間インキュベートする。
各試料を再懸濁後、冷やしたBuffer solution + 1％FBSを分注した遠心チューブに移し、5分間遠心分離を行う。
上清を吸引除去後、ペレットをBuffer solution + 1％FBS に懸濁し、遮光して氷上に保管する。フローサイトメーターでの解析を3時間以内に行う。

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