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動物実験代替法として開発された感作性試験法 h-CLAT試験受託サービス
掲載日情報:2022/04/14 現在Webページ番号:69787
カマクラテクノサイエンス /
(株)鎌倉テクノサイエンス
[メーカー略称:KTS]
h-CLAT(human Cell Line Activation Test)法は動物実験代替法として開発された感作性試験法です。THP-1細胞(ヒト単球由来細胞)の細胞表面に発現するCD86およびCD54を染色し、その発現量をフローサイトメトリー(FACS)で測定して感作性を評価します。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
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試験方法
用量設定試験
■細胞生存率が75%となる被験物質濃度(CV75)の算出
- THP-1細胞に複数濃度の被験物質を添加し、24時間培養します。
- MTT試薬を添加し、細胞生存率を測定して、CV75を算出します。
本試験
■方法
- THP-1細胞に複数濃度の被験物質を添加し、24時間培養します。
濃度:CV75×1.2から公比1.2で8濃度 - 細胞を回収し、抗体および7-AADを添加し、FACS測定をします。
抗体:抗CD86抗体、抗CD54抗体、マウスIgG1
■データ解析
- RFI(%)=(被験物質処理MFI - 被験物質処理Isotype control MFI)/(被験物質未処理MFI - 被験物質未処理Isotype control MFI)×100
※MFI;(Geometric)Mean Fluorescence Intensity
■陽性判定基準
- CD86 RFI > 150%
- CD54 RFI > 200%
3回の実験のうち、いずれか一方の抗体で基準を超えるRFI値が2回以上ある場合、陽性と判定します。
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基本納品物
- 報告書
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ご注文方法/価格
詳細は、下記の当社受託・特注品担当までお問い合わせ下さい。
オススメ:フナコシニュース2021年11月15日号(皮膚科学研究特集)
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製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。