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ウエスタンブロットやELISAのコントロールに!!最大17種類のエピトープタグを有する組換え体タンパク質 Multi-Tag Control Protein

掲載日情報:2021/09/22 現在Webページ番号:69767

Absolute antibody社のMulti-Tag Control Proteinは、一般的によく用いられている17種類(Control Protein、#Pr00106)または12種類(Control Protein2、#Pr00565)のエピトープタグを有する組換え体タンパク質です。
ウエスタンブロットやELISAのポジティブコントロールとして使用できます。

製品に含まれるエピトープタグのN末端(左)からC末端(右)への配列

図1. Control Protein(#Pr00106)およびControl Protein2(#Pr00565)のエピトープタグ配列
    左がN末端側

エピトープタギングとは

エピトープタギング(Epitope tagging)とは、組換えDNA技術を用いて、特定の抗体のエピトープを標的タンパク質に融合・発現させる方法です1。タンパク質発現のモニタリング、細胞や細胞内レベルでのタンパク質の局在化、タンパク質の精製、さらにはタンパク質の空間的配置、経時的変化、相互作用の分析など、幅広いアプリケーションにおいて有用です2。すでに抗体が存在するエピトープを用いることによって、まだ抗体が存在しないタンパク質の検出が可能となるため、新奇タンパク質や免疫原性の低いタンパク質の特性評価に特に有効です。適切なエピトープと抗体のペアを選ぶことで、ウエスタンブロット、免疫沈降、免疫化学、アフィニティ精製など、実験用途に最適な特性を持つ組み合わせを使用することができます3

参考文献

  1. Brizzard, B. and Chubet, R., Curr. Protoc. Neurosci., Chapter 5:Unit 5.8., (2001). PMID:18428506
  2. Jarvik, J.W, and Telmer, C.A., Annu. Rev. Genet., 32, 601(1998). PMID:9928493
  3. Brizzard, B., Biotechniques, 44(5), 693(2008). PMID:18474046

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特長

  • 17種類(Control Protein、#Pr00106)または12種類(Control Protein2、#Pr00565)のエピトープタグを有する組換え体タンパク質です。
  • 産生細胞:HEK293
  • 純度:>98%(SDS-PAGE)
  • 適用:Western Blot(#Pr00106)、ELISA(#Pr00565)

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エピトープタグの種類とアミノ酸配列

Multi-Tag Control Protein #Pr00106


タグの種類アミノ酸配列抗エピトープタグ抗体の
商品コード
Thioredoxin(Trx)SDKIIHLTDDSFDTDVLKADGAILVDFWAEWCGPCKMIAPILDEIADEYQGKLTVAKLNIDQNPGTAPKYGIRGIPTLLLFKN
GEVAATKVGALSKGQLKEFLDANLA
-
T7CMASMTGGQQMG-
HSVQPELAPEDPEDC-
VSV-gYTDIEMNRLGKG-
Glu-GluCEEEEYMPME-
V5GKPIPNPLLGLDSTAb00136
E-tagGAPVPYPDPLEPR-
HA YPYDVPDYACAb00828
FLAG®DYKDDDDKAb00739
GSTPILGYWKIKGLVQPTRLLLEYLEEKYEEHLYERDEGDKWRNKKFELGLEFPNLPYYIDGDVKLTQSMAIIRYIADKHNMLGGC
PKERAEISMLEGAVLDIRYGVSRIAYSKDFETLKVDFLSKLPEMLKMFEDRLCHKTYLNGDHVTHPDFMLYDALDVVLYMDP
MCLDAFPKLVCFKKRIEAIPQIDKYLKSSKYIAWPLQGWQATFGGGDHPPKSDLV
-
mycEQKLISEEDLCAb00100
S-tagKETAAAKFERQHMDS-
KT3 KPPTPPPEPET-
E2GVSSTSSDFRDR-
AU1DTYRYI-
AU5TDFYLK-
His HHHHHHAb00101

エピトープタグの順番とアミノ酸配列

図2. Control Protein(#Pr00106)のエピトープタグおよびリンカーの配置とアミノ酸配列

Multi-Tag Control Protein 2 #Pr00565


タグの種類アミノ酸配列抗エピトープタグ抗体の
商品コード
MBPMKIEEGKLVIWINGDKGYNGLAEVGKKFEKDTGIKVTVEHPDKLEEKFPQVAATGDGPDIIFWAHDRFGGYAQSGLLAEITPDKAFQDKLYPFTWDAVRYNGKLIAYPIAVEALSLIYNKDLLPNPPKTWEEIPALDKELKAKGKSALMFNLQEPYFTWPLIAADGGYAFKYENGKYDIKDVGVDNAGAKAGLTFLVDLIKNKHMNADTDYSIAEAAFNKGETAMTINGPWAWSNIDTSKVNYGVTVLPTFKGQPSKPFVGVLSAGINAASPNKELAKEFLENYLLTDEGLEAVNKDKPLGAVALKSYEEELAKDPRIAATMENAQKGEIMPNIPQMSAFWYAVRTAVINAASGRQTVDEALKDAQTNSSSNNNNNNNNNNLGIEGRAb02194
GCN4 HLENEVARLKKAb00436
MAPGDGMVPPGIEDKITAb00875
Protein C EDQVDPRLIDGKAb01200
Rap GDDMVNPGLEDRIECAb00885
RhoTETSQVAPAAb00337
AlphaSRLEEELRRRLTE-
RimPLHPRTAGASRAb01563
Softag SLAELLNAGLGGS-
Strep-tagWSHPQFEKAb02208
HisHHHHHHAb00101
PepAVERYLKDQQLLGIW-

Pr00565エピトープタグの順番とアミノ酸配列

図3. Control Protein2(#Pr00565)のエピトープタグおよびリンカーの配置とアミノ酸配列


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使用例

抗DDDDK抗体のMulti-Tagタンパク質への結合試験

図4. 抗DDDDK(FLAG®)抗体とControl Protein(#Pr00106)の結合試験
Control Protein(#Pr00106)を5μg/mgプレコートしたウェルに抗DDDDK(FLAG®)抗体(黄色:#Ab00739-1.1、赤色:他社製品)を添加し、HRP標識抗マウス抗体で検出した。


抗His Tag抗体のMulti-Tagタンパク質への結合試験

図5. 抗Hisタグ抗体を用いたウエスタンブロットでのControl Protein(#Pr00106)の検出
Control Protein(#Pr00106)を25 ng(A)、10 ng(B)、5 ng(C)ずつ添加し、抗Hisタグ抗体(#Ab00101-1.1、1μg/ml)を用いて検出した。


抗エピトープタグ抗体と本製品(#Pr00565)の結合試験

図6. 抗エピトープタグ抗体とControl Protein2(#Pr00565)の結合試験
Control Protein2(#Pr00565)を5μg/mgプレコートしたウェルに以下の抗エピトープタグ抗体を添加し、抗マウス抗体で検出した。
抗MBPタグ抗体(水色)
抗MAPタグ抗体(赤色、#Ab00875-1.1
抗RAPタグ抗体(黄色、#Ab00885-1.1
抗Rhoタグ抗体(紺色、#Ab00337-1.1
抗Protein Cタグ(緑色、#Ab01200-1.1
抗Softag 1抗体(紫色)
抗GCN4タグ抗体(橙色、#Ab00436-1.1
抗MBPタグ抗体(灰色)


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価格

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Multi-Tag Control Protein
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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