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新型コロナウイルスのプロテアーゼ活性測定キット SensoLyte 520 SARS-CoV-2 Proteases Activity Assay Kits

掲載日情報：2020/11/19 現在Webページ番号：69606

アナスペック /
AnaSpec, Inc.
[メーカー略称：ANA]

新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）の感染に関与する3CLプロテアーゼ（3CL protease）とパパイン様プロテアーゼ（PLpro、Papain-like-protease/Deubiquitinase）の酵素活性を、それぞれ蛍光法により高感度に測定できるキットです。3CLプロテアーゼおよびPLproの阻害物質のハイスループットスクリーニングに有用です。

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

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阻害曲線例

SensoLyte 520 SARS-CoV-2 3CL Protease Activity Assay Kit（#AS-72262）

3CL protease阻害曲線例

3CL protease阻害物質GC 376の阻害曲線例

SensoLyte 520 SARS-CoV-2 Papain-like Protease Protease/ Deubiquitinase Activity Assay Kit
（#AS-72263）

阻害曲線例

PLpro阻害物質GRL0617の阻害曲線例

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SARS-CoV-2研究用製品
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新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）の感染におけるプロテアーゼの役割

SARS-CoV-2 3CLプロテアーゼ（3CL protease）

SARS-CoV-2 3-キモトリプシン様プロテアーゼ（3CLプロテアーゼ、メインプロテアーゼ）は、ウイルスRNAから翻訳されるポリタンパク質の処理に不可欠で1,2、ウイルス感染時の転写と複製に関与しています3,4。3CLプロテアーゼは、少なくとも11切断部位でレプリカーゼ1abを切断し、ビリオンを構築するタンパク質を生成します2（図1参照）。コロナウイルス科全体で3CLプロテアーゼのタンパク質構造がよく保存されていることから、SARS-CoV-2ウイルスの創薬ターゲットとしての優位性を有しています2,5。

3CL protease is involved in the transcription and replication during the viral infection

図1. 3CLプロテアーゼのウイルス感染における転写と複製への関与6

SARS-CoV-2 パパイン様プロテアーゼ（PLpro、Papain-like-protease/Deubiquitinase）

SARS-Cov-2パパイン様プロテアーゼ（PLpro）は、非構造タンパク質3（nsp3）としてコードされ、ウイルスポリタンパク質の切断に関与しています7～9。PLproは、炎症過程で重要なユビキチン鎖を加水分解し、またインターフェロン刺激遺伝子15（ISG15）の修飾をタンパク質から除去して抗ウイルス応答を逆転させます6～11（図2参照）。PLproは、SARS-CoV-2の複製と宿主の感染の過程で不可欠な酵素として、コロナウイルス阻害剤の創薬研究開発にとって魅力的なターゲットとなっています8,12。

3CL protease is involved in the transcription and replication during the viral infection

図2. SARS-CoV-2パパイン様プロテアーゼ活性9

SARS-CoV-2パパイン様プロテアーゼは、ウイルス性ポリタンパク質を切断します。脱ユビキチン化およびdeISGylationの能力により、宿主の自然免疫応答を抑制することが示されています。

参考文献

  1. Hilgenfeld, R., et al., FEBS. J., 281, 4085 (2014).
  2. Zhang, L., et al Science, 368, 409 (2020).
  3. Thiel, V., et al, J. Gen. Virol., 84, 2305 (2003).
  4. Macchiagodena, M., et al, Chem. Phys. Lett., 750, 137489 (2020).
  5. Chen, YW., et al., F1000 Res., 9, 129 (2020).
  6. Mengist, HM., et al., Signal Transduct. Target Ther., 5, 67 (2020).
  7. Freitas, BT., et al., ACS Infect. Dis., 4, 0c00168 (2020).
  8. Wu, C., et al., Acta. Pharm. Sin. B., 10, 766 (2020).
  9. Klemm, T., et al., bioRxiv., 06, 160614 (2020).
  10. Mielech, AM., et al., J. Virol., 89, 4907 (2015).
  11. Ratia, K., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U S A., 103, 5715 (2006).
  12. Dömling, A., et al., Chem., 6, 1283 (2020).

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測定原理

SensoLyte 520 SARS-CoV-2 3CL Protease Activity Assay Kit（#AS-72262）

HiLight 488蛍光FRETペプチド基質を用いて、コロナウイルス3CLpro酵素の部位特異的な切断により発する緑色蛍光（Em 490 nm/Ex 520 nm）を測定します。


SensoLyte 520 SARS-CoV-2 Papain-like Protease Protease/ Deubiquitinase Activity Assay Kit
（#AS-72263）

Rh110蛍光ペプチド基質を用いて、PLproの脱ユビキチン化活性により発する緑色蛍光（Em 490 nm／Ex 520 nm）を測定します。



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製品の種類

検量線例の図をクリックすると拡大図、商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 SensoLyte 520 SARS-CoV-2
3CL Protease
Activity Assay Kit		 SensoLyte 520 SARS-CoV-2
Papain-like Protease/Deubiquitinase
Activity Assay Kit
商品コード AS-72262 AS-72263
検量線例 AS-72262検量線例 AS-72263検量線例
アッセイ数 100 assays
フォーマット 96 well plate
適応 阻害物質のスクリーニング、生物学的試料中の活性測定
測定方法 蛍光
測定波長 励起 490 nm／蛍光 520 nm
検出限界 15.6 ng/ml（活性型3CL protease） 7.8 ng/ml（活性型PLpro）
キット内容
  • Hilyte Fluor-488/QXL 520 3CL protease substrate
  • Hilyte Fluor-488 fluorescence reference standard
  • Recombinant SARS-CoV-2 3CL protease
  • Assay buffer
  • Inhibitor (GC 376)
  • Papain-like protease deubiquitination substrate
  • Rh110 fluorescence reference standard
  • Recombinant SARS-CoV-2 papain-like protease
  • Assay buffer
  • Inhibitor (GRL0617)
製品データシート pdf※最新のデータシートでない場合があります pdf※最新のデータシートでない場合があります

※ キットには、黒色平底（表面非吸着）96 well plateは含まれていません。測定には蛍光プレートリーダーが必要です。



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関連製品

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品名 包装 商品コード 製品概要
SensoLyte 390 ACE2 Activity Assay Kit 1 kit AS-72086 ACE2（Angiotensin I converting enzyme 2）により切断されると蛍光を生じるFRETペプチドを使用して、ACE2の酵素活性を簡便かつ高感度に測定できるキットです。ACE2阻害物質、活性化物質のハイスループットスクリーニングに有用です。
SARS-CoV-2 T-cell Peptide Antigens Set 0.25 mg each AS-65640 in silicoの研究から特定されたSARS-CoV-2スパイクタンパク質配列由来の6種類のT細胞エピトープのペプチドセットです。


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価格

SensoLyte 520 SARS-CoV-2 3CL Protease Activity Assay Kit

[在庫・価格 ：2024年04月19日 13時55分現在]

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詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
 納期 文献数
SARS-CoV-2 3CL Protease Activity Assay Kit, SensoLyte 520
 2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
Abs：490，Em：520
法規制等
保存条件 -20℃,-80℃,暗所保存,乾燥状態（デシケータ内）で保存 法規備考
掲載カタログ

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[在庫・価格 ：2024年04月19日 13時55分現在]

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SARS-CoV-2 3CL Protease Activity Assay Kit, SensoLyte 520

文献数： 0

説明文 Abs：490，Em：520
法規制等
保存条件 -20℃,-80℃,暗所保存,乾燥状態（デシケータ内）で保存 法規備考
掲載カタログ

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SensoLyte 520 SARS-CoV-2 Papain-like Protease Protease/ Deubiquitinase Activity Assay Kit

[在庫・価格 ：2024年04月19日 13時55分現在]

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SARS-CoV-2 Papain-like Protease/ De-ubiquitinase Activity Assay Kit, SensoLyte 520
 2週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
Abs：490，Em：520
法規制等
保存条件 -20℃,-80℃,暗所保存,乾燥状態（デシケータ内）で保存 法規備考
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SARS-CoV-2 Papain-like Protease/ De-ubiquitinase Activity Assay Kit, SensoLyte 520

文献数： 0

説明文 Abs：490，Em：520
法規制等
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お問い合わせ先

（テクニカルサポート 試薬担当）

reagent@funakoshi.co.jp

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