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バイオセンサーやELISAに有用な部位特異的な捕捉抗体の固定化試薬 Nano-CaptureLigandシリーズ

掲載日情報:2020/07/31 現在Webページ番号:69538

Nano-CaptureLigandは,ビオチン化VHH/Nanobodyで,抗体の部位特異的な固定化に用いられます。アビジン/ストレプトアビジンバイオセンサーまたはアビジン/ストレプトアビジンをコートしたELISA用マイクロプレート表面に免疫グロブリンのFcまたはλ-LC(Light Chain)特異的なNano-CaptureLigandを結合させることで(下図参照),抗体を固定化できます。捕捉抗体を直接コーティングする従来の方法に比べ,より強固で方向性のある結合をもたらします。これによりバイオセンサーにおけるベースラインの安定性の向上や,ELISA構築においての広範な捕捉・検出ペア抗体の組み合わせが可能となるなど,様々なメリットが得られます。

Nano-CaptureLigand

Nano-CaptureLigand(ビオチン化VHH/Nanobody)を用いた捕捉抗体の模式図

Nano-CaptureLigand(ビオチン化VHH)は,バイオセンサーやマイクロプレート表面にコートされたアビジン/ストレプトアビジンと結合し固定される。ここに非ビオチン化捕捉抗体を加えると,Nano-CaptureLigandは抗体のFc部位(#shuLB-1-10,#shuLB-1-10の場合はλ-LC(Light Chain))と特異的に結合する。

  • VHH:Nano-CaptureLigand
  • VHH:免疫グロブリン

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適用図

バイオセンサーでの適用

Nano-CaptureLigandのバイオセンサーでの適用

サンドイッチELISAでの適用

Nano-CaptureLigandのサンドイッチELISAでの適用

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Nano-CaptureLigandとは

アルパカ(ラクダ科)抗体

ラクダ科(アルパカ,ラマ,ラクダとヒトコブラクダ)は,従来のIgG抗体以外に重鎖抗体(hcAbs)と呼ばれる抗体の第2のタイプを持っています。HcAbsは,重鎖のみで構成され,ナノボディとして知られる単一の可変領域(VHHドメイン)を介して,その標的タンパク質に結合します。一般の複合体分子を形成しているIgG抗体の分子量は約150 kdaで,その複合体構造上ばらつきが生じるのに対し,このVHHドメインの分子量はわずか約13 kDaで,標的タンパク質に対する高い結合特性や特異性に加えて,ロット間差がなく高い品質で製造できるといった長所があります。


Nano-CaptureLigand

Nano-CaptureLigand



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製品の種類

商品コードをクリックすると各製品の価格表,Nano-CaptureLigandをクリックすると製品データシートをご覧いただけます。

品名 Nano-CaptureLigand
Human Igλ Human
/Rabbit IgG
Mouse IgG1 Mouse IgG2a Mouse IgG2b
標的部位 λ LC Fc-fragment Fc-fragment Fc-fragment Fc-fragment
クローン名 CTK0110
(VHH0369)
CTK0101
(VHH0238)
CTK0103
(VHH0295)
CTK0108
(VHH0249)
CTK0106
(VHH0285)
交差性 交差有 ・Rabbit IgG Fab ・Macaque (cynomolgus monkey) serum ・Mouse IgG2c
交差なし ・Human Ig kappa
・Goat IgG
・Mouse IgG
・Rabbit IgG Fc
・Rat IgG
・Human IgA, IgE, IgM
・Mouse IgG2a, IgG2b, IgG2c, IgG3
・Rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c
・Sera from Goat, Guinea pig, Rat, Sheep
・Mouse IgG2a, IgG2b, IgG2c, IgG3
・Human IgG1, IgG2a, IgG3, IgG4, IgA, IgM, IgE
・Rabbit IgG
・Rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c
・Sera from Goat, Guinea pig, Human, Macaque (cynomolgus monkey), Rabbit, Rat, Sheep
・Mouse IgG1, IgG2b, IgG3
・Human IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA
・Rat IgG1, IgG2, IgG2b
・Sera from Goat, Human, Macaque (cynomolgus monkey), Sheep
・Mouse IgG1, IgG2a, IgG2c, IgG3
・Human IgG1, IgG2a, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM
・Rabbit IgG
・Rat IgG1, IgG2, IgG2b, IgG2c
・Sera from Goat, Guinea pig, Human, Macaque (cynomolgus monkey), Rabbit, Rat, Sheep
濃度 1 g/L(68μM) 1 g/L(71μM) 1 g/L(73μM) 1 g/L(68μM) 1 g/L(65μM)
包装 10μl 100μl 10μl 100μl 10μl 100μl 10μl 100μl 10μl 100μl
商品コード shuLB-1-10 shuLB-1-100 shurbGB-1-10 shurbGB-1-100 smsG1B-1-10 smsG1B-1-100 smsG2aB-1-10 smsG2aB-1-100 smsG2bB-1-10 msG2bB-1-100
製品データシート pdf※最新のデータシートでない場合があります pdf※最新のデータシートでない場合があります pdf※最新のデータシートでない場合があります pdf※最新のデータシートでない場合があります pdf※最新のデータシートでない場合があります


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特長

  • 捕捉抗体に部位特異的に結合し,温和な条件で固定化できます。
  • Nano-CaptureLigandと捕捉抗体とはアフィニティー結合のため,捕捉抗体をビオチン化する必要はありません。
  • 特異性が高いため,粗製試料から選択的に固定化することができます。
  • Nano-CaptureLigandと捕捉抗体との結合力は強いため,安定したベースラインが得られます。
  • 複数回の再生,再利用が可能です。
  • 仕様:捕捉ナノボディ(VHH)
  • 産生:バクテリア(組み換え体アルパカVHH抗体)
  • クローン:モノクローナル
  • 標的部位:免疫グロブリンFc-フラグメント
  • 標識:ビオチン
  • 標識価:平均1~2ビオチン分子/Nanobody

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検証済みの適用,特異性

  • ELISA
  • BLI(Bio-Layer Interferometry,FORTEBIO Octetシステム)
  • 交差性
  • サブクラス交差性
  • 配列
  • アフィニティー
  • 融点

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標的部位

λ LCが標的部位の場合(#shuLB-1-10, #shuLB-1-100

Lamda LC

Fcが標的部位の場合(上記を除く全Nano-CaptureLigandキット)

Lamda LC

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捕捉抗体の固定化方法の違い

Comparison

  • 左:Nano-CaptureLigandsを使用した場合,捕捉抗体のFc部位に特異的で,温和な条件下で,強固で方向性のある結合で固定化できる。
  • 右:抗体を直接ビオチン化した場合,抗体が無作為に無指向で固定化される。この場合,ランダムなビオチン化によって抗体のパラトープが変化したり,標的因子への結合ができない方向に抗体が固定化されるため,抗体の一部しか標的因子に結合できない。

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使用例

ヒトおよびマウスの抗SARS-CoV-2抗体(CR3022)の結合のBLIカイネティクス解析

ビオチン化Nano-CaptureLigandを用いてヒトおよびマウスのCR3022抗体をストレプトアビジンバイオセンサー上に捕捉し,様々な濃度のSARS-CoV2 Spike RBDで解析した。RBD濃度の色分けについては,図の凡例(下部)をご参照下さい。

COVID-19

  • A:Nano-CaptureLigand Human IgG /Rabbit IgG,Fc specific VHH, Biotinylated(#shurbGB-1-10)を用いて,ヒトIgG1抗体(CR3022)を捕捉した。
  • B:Nano-CaptureLigand Mouse IgG2b, Fc specific VHH, Biotinylated(#smsG2bB-1-10)を用いて,キメラマウスIgG2b抗体(CR3022)を捕捉した。
  • C:Nano-CaptureLigand Mouse IgG, Fab-κ-LC specific VHH, Biotinylatedを用いて,キメラマウスIgG2bκ抗体(CR3022)を捕捉した。

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価格

Nano-CaptureLigand Human Ig, lamda-LC-specific VHH, biotinylated

[在庫・価格 :2020年08月06日 09時51分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
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Anti-human Ig, lambda-LC-specific VHH, biotinylated, Nano-CaptureLigand
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Anti-human Ig, lambda-LC-specific VHH, biotinylated, Nano-CaptureLigand

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  • 商品コード:shuLB-1-10
  • メーカー:CHT
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Anti-human Ig, lambda-LC-specific VHH, biotinylated, Nano-CaptureLigand

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  • 商品コード:shuLB-1-100
  • メーカー:CHT
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Nano-CaptureLigand Human IgG/Rabbit IgG, Fc-specific VHH, biotinylated

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Anti-human IgG/rabbit IgG, Fc-specific VHH, biotinylated, Nano-CaptureLigand
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[在庫・価格 :2020年08月06日 09時51分現在]

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Anti-human IgG/rabbit IgG, Fc-specific VHH, biotinylated, Nano-CaptureLigand

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  • 商品コード:shurbGB-1-10
  • メーカー:CHT
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Anti-human IgG/rabbit IgG, Fc-specific VHH, biotinylated, Nano-CaptureLigand

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  • 商品コード:shurbGB-1-100
  • メーカー:CHT
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Nano-CaptureLigand Mouse IgG1, Fc-specific VHH, biotinylated

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Anti-mouse IgG1, Fc-specific VHH, biotinylated, Nano-CaptureLigand
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Anti-mouse IgG1, Fc-specific VHH, biotinylated, Nano-CaptureLigand

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  • 商品コード:smsG1B-1-10
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Anti-mouse IgG1, Fc-specific VHH, biotinylated, Nano-CaptureLigand

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  • 商品コード:smsG1B-1-100
  • メーカー:CHT
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Nano-CaptureLigand Mouse IgG2a, Fc-specific VHH, biotinylated

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Anti-mouse IgG2a, Fc-specific VHH, biotinylated, Nano-CaptureLigand

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  • 商品コード:smsG2aB-1-100
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Nano-CaptureLigand Mouse IgG2b, Fc-specific VHH , biotinylated

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Anti-mouse IgG2b, Fc-specific VHH, biotinylated, Nano-CaptureLigand

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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