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SARS-CoV-2 Spike RBD LlaMABody VHH Domain Antibody
新型コロナウイルスに対するラクダ科動物由来のVHH抗体 SARS-CoV-2 Spike RBD LlaMABody VHH Domain Antibody
掲載日情報：2022/05/16 現在Webページ番号：69353
SARS-CoV-2 Spike RBDに対するラクダ科動物（Camelid）由来のVHHドメインを持つ（有する）組換えモノクローナル抗体です。VHHドメインにHisタグが結合した（#LMAB12503、#LMAB10869）と2価のVHHドメインにHuman IgG2が融合した製品（#LMAB10870、#LMAB10731）があります。
ラクダ科動物（ラマ）のイムノグロブリンの構造の模式図
追加しました。
新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）とは
■新型コロナウイルス SARS-CoV-2 Spike RBD
新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）は、一般的に4つの構造タンパク質（スパイク（S）タンパク質、エンベロープ（E）タンパク質、膜（M）タンパク質、およびヌクレオカプシド（N）タンパク質）で構成されるコロナウイルスとして知られているウイルスのファミリーに属し、世界的なパンデミックとなった新型コロナウイルス感染症（Covid-19）を引き起こします1。SARS-CoV-2 Spike Protein（Sタンパク質）は、膜融合とウイルスの侵入を仲介する糖タンパク質です。Sタンパク質はホモ三量体で、それぞれの約180 kDaのモノマーは2つのサブユニット、S1とS2から構成されます2。SARS-CoV-2では、ほとんどのコロナウイルスと同様に、活性化にはSタンパク質の2つの異なるペプチド（S1およびS2サブユニット）へのタンパク質分解的切断が必要です。S2サブユニットが細胞融合に関与する一方、S1サブユニットは宿主レセプターへのタンパク質の結合を重点的に行います3～5。
構造生物学研究に基づいて、S1のC末端領域にあるレセプター結合ドメイン（RBD）は、上向き／立っている状態または下向き／横たわっている状態のいずれかに配向されていることが示されました6。立っている状態はより高い病原性に関与し、SARS-CoV-1（SARSコロナウイルス）とMERSの両方において、それぞれのRBDに柔軟性があるため、この状態を取ることができます。SARS-CoV-2 RBDにおいても同様に、2つの状態を取ることと構造の柔軟性が見られます7。
アミノ酸（aa）配列相同性については、SARS-CoV-2 S1 RBDは、SARS-CoV-1 S1 RBDと73％の相同性を有していますが、MERS S1 RBDとは22％の相同性しかありません。アミノ酸配列の低い相同性は、SARSとMERSが異なる細胞レセプターに結合するという研究結果と一致しています8。
■SARS-CoV-2とACE2
SARS-CoV-1ウイルスと同様に、SARS-CoV-2ウイルスのSタンパク質はアンジオテンシン変換酵素2（ACE2）に結合しますが、親和性は非常に高く、結合反応速度はより速くなります9。ACE2レセプターに結合する前は、S1三量体の構造解析により、3つのRBDドメインの1つだけが“上向き”の立体構造にあることが示されています。これは、三量体サブユニット間を通過する不安定で一時的な状態ではありますが、中和抗体療法の標的となる露出状態です10。SARS-CoV-2タンパク質のRBDに対するポリクローナル抗体は、ACE2レセプターとの相互作用を阻害することが示されており、RBDがワクチン接種または抗ウイルス療法の魅力的な標的となることを確認しています11。SARS-CoV-2ウイルスへの暴露後の発達した免疫性と一致して、RBDが患者の血流に存在する中和抗体の存在を検出するために使用できることを示す有望な研究もあります12。Sタンパク質がCD147/EMMPRINレセプターを介して宿主細胞に侵入し、膜融合を媒介できることも示されています13、14。
■参考文献
- Wu, F., et al., Nature, 579:265 (2020).
- Tortorici, M.A. and D. Veesler, Adv. Virus Res., 105:93 (2019).
- Bosch, B.J., et al., J. Virol., 77:8801 (2003).
- Belouzard, S., et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 106:5871 (2009).
- Millet, J.K. and G. R. Whittaker, Virus Res., 202:120 (2015).
- Yuan, Y., et al., Nat. Commun., 8:15092 (2017).
- Walls, A.C., et al., Cell, 180:281 (2010).
- Jiang, S., et al., Trends. Immunol., (2020).
- Ortega, J.T., et al., EXCLI. J., 19:410 (2020).
- Wrapp, D., et al., Science, 367:1260 (2020).
- Tai, W., et al., Cell. Mol. Immunol., (2020).
- Okba, N. M. A., et al., Emerg. Infect. Dis., (2020).
- Wang, X., et al., Cellular & Molecular Immunology, (2020).
- Wang, K., et al., bioRxiv (2020).
追加しました。
ラクダ科動物（Camelid）抗体とは
Camelid抗体は、ラマ、ラクダ、およびアルパカを含むラクダ科の哺乳類の抗体です。これらの動物は2種類の主要なタイプの抗体を産生します。下記模式図の1つ目は、2本の重鎖と2本の軽鎖で構成される従来型の抗体です。2つ目は2本の重鎖のみで構成される別のタイプの抗体で、重鎖抗体、または重鎖IgGとして知られています。CH1領域は含んでいませんが、VHH領域と呼ばれる抗原結合ドメインを保持しています。そこからさらにVHH領域のみを遺伝子工学的に切り取った抗体（VHH抗体）を、単一ドメイン抗体またはナノボディとも呼びます。
抗体の模式図
追加しました。
VHH単一ドメイン抗体の利点
VHH抗体は、従来のIgG抗体よりも多くの利点があります。VHH抗体のサイズは、IgG抗体のサイズが150 kDaであるのに対して、約15 kDaです。サイズが小さいため、従来の抗体では立体障害のため到達できなかった特定のエピトープを検出できます。また、組織を通ってより簡単に細胞に侵入することができ、より特異的な免疫組織染色（IHC）および細胞内フローサイトメトリー染色を可能にします。さらにVHH抗体はより安定しており、より広いpHおよび温度範囲に耐えることができます。
追加しました。
特長
- 交差性：SARS-CoV-2
- 特異性：direct ELISAにおいて、SARS-CoV-2 Spike RBDを検出します。
- 免疫動物：ラマ
- 抗原：ヒト胎児腎細胞293（HEK細胞293）由来 SARS-CoV-2 Spike RBD
- 適用：レセプター・リガンド間の相互作用の阻害（使用例参照）
- 標識：未標識
- 形状：凍結乾燥品とPBS溶液の2種類あります。
- Hisタグが結合されたVHHドメイン（#LMAB12503、#LMAB10869）と2価のVHHドメインにHuman IgG2が融合した製品（#LMAB10870、#LMAB10731）があります。
追加しました。
使用例
図1.SARS-CoV-2 Spike RBD Llamabody VHH His-tag Antibody（#LMAB10869によるSARS-CoV-2 Spike 1のACE-2/eGFPトランスフェクトHEK293ヒト細胞株への結合阻害
フローサイトメトリーを用いた機能解析において、Fcタグ付き組換え体SARS-CoV-2 Spike 1（#10622-CV）は、組換えヒトACE-2とeGFPをトランスフェクトしたHEK293細胞株に結合した。
結合は50μg/ml濃度の#LMAB10869によって完全にブロックされたが（A）、Llama IgG1 Controlではブロックされなかった（B）。
タンパク質結合は、APC標識マウス抗ヒトIgG Fcモノクローナル抗体（#FAB110A)で検出された。染色は、RSD社のStaining Membrane-Associated Proteinsプロトコルを用いて行った。
図2. SARS-CoV-2 Spike RBD LlaMABody Bivalent VHH HuIgG2 Fusion Antibody（#LMAB10731）によるSARS-CoV-2 Spike 1のACE-2/eGFPトランスフェクトHEK293ヒト細胞株への結合阻害
フローサイトメトリーを用いた機能解析において、Fcタグ付き組換え体SARS-CoV-2 Spike 1（#10522-CV）は、組換えヒトACE-2とeGFPをトランスフェクトしたHEK293細胞株に結合した。
結合は50μg/ml濃度の#LMAB10731によって完全にブロックされたが（A）、Llama IgG1 Controlではブロックされなかった（B）。
タンパク質結合は、APC標識マウス抗ヒトIgG Fcモノクローナル抗体（#IC050A)で検出された。染色は、RSD社のStaining Membrane-Associated Proteinsプロトコルを用いて行った。
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価格
Hisタグ付き抗体
[在庫・価格 ：2024年04月25日 15時35分現在]
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Anti-SARS-CoV2 Spike RBD Llamabody VHH His-tag MAb (L009.2.69N) |
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[在庫・価格 ：2024年04月25日 15時35分現在]
Anti-SARS-CoV2 Spike RBD Llamabody VHH His-tag MAb (L009.2.69N)
文献数： 0
- 商品コード：LMAB12503-SP
- メーカー：RSD
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- 法規制等：
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※受注発注品。 Protein Accession No： YP_009724390.1 |
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- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
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[在庫・価格 ：2024年04月25日 15時35分現在]
Anti-SARS-CoV-2 Spike RBD Llamabody VHH hIgG2 MAb (Cl L009.2.69H)
文献数： 0
- 商品コード：LMAB10870-SP
- メーカー：RSD
- 包装：25μg
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- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
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※受注発注品。 Protein Accession No： YP_009724390.1 |
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[在庫・価格 ：2024年04月25日 15時35分現在]
Anti-SARS-CoV-2 Spike RBD MAb (Clone 1034515)
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- 商品コード：MAB105401-SP
- メーカー：RSD
- 包装：25μg
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クローン：1034522 Protein Accession No： YP_009724390 |
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- 価格：¥30,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
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SARS-CoV-1/2 Spike RBDラマ抗体 |
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Anti-SARS-CoV-2 Spike S1 MAb (Clone 1035224)
文献数： 0
- 商品コード：MAB105405-SP
- メーカー：RSD
- 包装：25μg
- 価格：¥30,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
※受注発注品。 クローン：1035224 Protein Accession No： YP_009724390.1 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 抗原種 | 免疫動物 | Mouse | |
| 交差性 | SARS-CoV-2 | 適用 | Blocking |
| 標識 | Unlabeled | 性状 | Protein A/G Affinity Purified |
| 吸収処理 | クラス | IgG | |
| クロナリティ | Monoclonal | フォーマット | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
SARS-CoV-1/2 Spike RBDラマ抗体 |
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Anti-SARS-CoV-2 Spike S1 MAb (Clone 1035224)
文献数： 0
- 商品コード：MAB105405-100
- メーカー：RSD
- 包装：100μg
- 価格：¥80,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
クローン：1035224 Protein Accession No： YP_009724390.1 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | -20℃ | 法規備考 | |
| 抗原種 | 免疫動物 | Mouse | |
| 交差性 | SARS-CoV-2 | 適用 | Blocking |
| 標識 | Unlabeled | 性状 | Protein A/G Affinity Purified |
| 吸収処理 | クラス | IgG | |
| クロナリティ | Monoclonal | フォーマット | |
| 掲載カタログ |
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