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Fab-TACSを用いて簡便、迅速に高純度のエクソソームを単離するキット Fab-TACS Exosome Isolation Kitシリーズ

掲載日情報:2020/04/23 現在Webページ番号:69298

IBA life sciences社独自のエクソソームへの可逆的結合性を有するマトリックスを用いたFab-TACS法により、血清、血漿または細胞培養上清から、高純度のエクソソームを簡便、迅速に単離するキットです。

製品外観6-3219

CD9/CD81 Exosome Isolation Kit,
Humanの製品外観

製品外観6-3295

CD9/CD81 Exosome Isolation Starter Kit, Humanの製品外観

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Fab-TACSテクノロジーとは

エクソソームの粒子サイズは小さく、また、アポトーシス小体(100~5,000 nm)や、マイクロパーティクル(100~1,000 nm)などの他の細胞外小胞と粒子サイズが一部重複するため、分離は未だに困難です。現在使用されている精製方法には、分画遠心分離、サイズ排除クロマトグラフィー、ろ過、マイクロパーティクルまたはPEGylationどが含まれます。しかし、エクソソームの由来試料の種類、他の細胞外小胞の混入、低回収率、などの問題点により適用が制限されることがあります。

Fab-TACSテクノロジー



Fab-TACS(Fab-based traceless affinity cell selection)は、エクソソームの非磁性分離のためのアフィニティクロマトグラフィーシステムです。このシステムは、Twin-Strepタグに融合させたCD特異的なFabフラグメント(Fab)がエクソソームを可逆的に捕捉・放出する原理を用いています。

表面マーカーに特異的な磁気ビーズ分離の開発により、精製プロセスは改善されましたが、磁気ビーズへの不可逆的な結合によってエクソソームの完全性が損なわれてしまいます。それに対して、Fab-TACSテクノロジーを用いたエクソソーム単離法では、血清、血漿または細胞培養上清といった試料の種類に関わらず、生物学的機能を損失することなく、余計な標識のないエクソソームを迅速かつ再現性高く単離することができます。



製品ラインナップ

商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 Exosome Isolation Introductry Kit, Human Exosome Isolation Kit, Human Exosome Isolation Starter Kit, Human
CD9 Fab-TACS CD81 Fab-TACS CD9 Fab-TACS CD81 Fab-TACS CD9/CD81 Fab-TACS
包装 2 columns 4 columns 10 columns 4 columns 10 columns 4 columns
商品コード 6-3296-002 6-3297-002 6-3219-004 6-3219-010 6-3281-004 6-3281-010 6-3295-004
キット内容 Fab-TACS Gravity Column filled with agarose matrix
Fab-TACS CD9 Fab-Strep Human, lyophilized
Fab-TACS CD81 Fab-Strep Human, lyophilized
100 mM biotin stock solution for elution
FAb-TACS gravity adapter
Minisart syringe filter, cellulose Acetate, 0.2μm
Minisart syringe filter, polyethersulfone, 0.22μm

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特長

  • 最高99%までの高純度のエクソソームが得られます。
  • 試料の種類に関わらず、共通のプロトコルでエクソソームの単離を行うことができます。
  • 抗体および磁気ビーズは使用しません。また遠心分離操作は不要です。
  • 他の細胞外小胞のコンタミネーションを最少化できます。
  • エクソソームへの可逆的結合性を有するマトリックスを用いています。
  • 適応試料:血清、血漿、細胞培養上清
  • 最大結合量:5×1010 particles/ml担体容量
  • 操作時間:約30分

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操作方法概略

操作法概要


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使用例

Figure-A

CD81 Fab-TACS Exosome Isolation Kit(#6-3281-004)を用い、MSC(mesenchymal stem cells、ヒト間葉幹細胞)培養上清から分離したエクソソームの粒径分布をNanoSight LM10とNTA software 2.3で分析した。


Figure-B

比較のためにPEGylation法により、MSC培養上清から分離したエクソソームの粒径分布をNanoSight LM10とNTA software 2.3で分析した。Fab-TACS(A)に比べて、実際のエクソソームの粒径に相当する含有量が低く不純物を多く含むのがわかる。

Figure-C




CD81 Fab-TACS Exosome Isolation Kit(#6-3281-004)を用いてMSC細胞培養上清から分離したエクソソームをウエスタンブロッティングで解析した。エクソソームマーカータンパク質のAlixおよびCD63の存在が確認できた。


Figure-D

CD81 Fab-TACS Exosome Isolation Kit(#6-3281-004)を用い、3つのMSC培養上清から単離したエクソソームをNanoSight LM10とNTA software 2.3で分析した。

Figure-E

ヒト血清からCD81 Fab-TACS Exosome Isolation Kit(#6-3281-004)を用いて単離した細胞外小胞体を解析したところ、その96%は、30~150 nmの典型的なエクソソームの粒径を示した。

アプリケーションノートダウンロード

  • ISOLATION OF EXOSOMES FROM JURKAT CELLS AND HUMAN SERUM pdf
  • ISOLATION OF EXOSOMES FROM MESENCHYMAL STEM CELLS pdf

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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