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メーカー：	Horizon社Dharmacon製品 OriGene Technologies TransOMIC Technologies
	Horizon社Dharmacon製品(メーカー略称：DHA)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら OriGene Technologies社(メーカー略称：ORI)のTrueClone / TrueORF / TrueORF Gold cDNAクローンなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら TransOMIC Technologies社(メーカー略称：TOT)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら
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HOME> 試薬> ELISA> ELISA/EIAキット> Human Obestatin ELISA Kit（Bertin Bioreagent社 )
HOME> 試薬> タンパク質／酵素> タンパク質解析> タンパク質・ペプチドの定量> Human Obestatin ELISA Kit（Bertin Bioreagent社 )

ヒト・オベスタチンELISA（定量）キット Human Obestatin ELISA Kit（Bertin Bioreagent社 )

掲載日情報：2020/02/13 現在Webページ番号：69256

ベルテンバイオリージェント /
Bertin Bioreagent（旧 SPI-BIO）
[メーカー略称：SPB]

ヒト血漿中のオベスタチン（Obestatin）を、トレーサーにアセチルコリンエステラーゼ(AChE, Acetylcholinesterase）を、捕捉用抗体にモノクローナル抗体を用いたサンドイッチ法により比色定量するELISAキットです。

※ こちらからAcylated / Unacylated Ghrelin EIA Kit製品についての詳細をご覧いただけます。
※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

検量線例
オベスタチン（Obestatin）とは
MEMO アセチルコリンエステラーゼ（AChE, Acetylcholinesterase）標識のメリット
測定原理
特長
操作方法概略
キット内容
交差性
関連製品
価格

検量線例

Human obestatin検量線例

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オベスタチン（Obestatin）とは

オベスタチン（Obestatin）は、α-ヘリックス中に二次構造を有する23個のアミノ酸からなるアミド化ペプチドです¹。2005年にラットの胃から最初に分離されました²。オベスタチンは、プレプログレリン由来のペプチドであり、胃³、膵臓³、脂肪組織³、骨格筋または心臓など、多くの組織や器官によって生成されます。

オベスタチンは、食物摂取に作用する食欲抑制ペプチドとして同定されました²。最初の研究では、オベスタチンの食物摂取と体重減退が示され、さらにグルコースと脂質代謝に積極的な影響を与えることから、抗糖尿病ペプチドであるとも考えられています³。ヒトオベスタチンは、アポトーシスを減少させ、B細胞とヒト膵島の増殖を促進します⁴。これらは不均衡のため、オベスタチンは様々な機能があります。実際、オベスタチンは血圧調節機能があり⁵、高血圧患者の場合には血漿中濃度が上昇します⁶。また、オベスタチンは不安の調節と記憶の改善に関与している可能性があります⁷。

Obestatinの構造 — Preproghrelin（**Ghrelin**の前駆体）とObestatin

参考文献

Alen, B., et al., PLOS ONE, 7(10), (2012).
Zhang, J.V., et al., Science, 310, 996～999 (2005).
Gronberg, M., et al., J. Histochem. Cytochem., 56, 793～801 (2008).
Granata, R., et al., J. Mol. Endocrinol., 45, 107～118 (2010).
Ren, A.J., et al., Peptides, 30, 1742～1745 (2009).
Li, X.F., et al., Peptides, 31, 297～300 (2010).
Carlini, V.P., et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 352, 907～912 (2007).

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MEMO アセチルコリンエステラーゼ（AChE, Acetylcholinesterase）標識のメリット

アセチルコリンエステラーゼ（AChE, Acetylcholinesterase）標識のメリット (クリックで開閉します)

Bertin Bioreagent社のELISAキットでは、主に酵素標識としてアセチルコリンエステラーゼ（AChE, Acetylcholinesterase）による方法が採用されています。AChEアッセイは、基質としてアセチルチオコリンを含むエルマン試薬を使用して発色させます。この酵素反応最終生産物（5-チオ-2-ニトロ安息香酸）は405～414 nmに吸収極大を持つ明るい黄色化合物です。AChEは、ELISA法で用いられる他の酵素に比べて以下のような長所を有しています。

AChEは、64,000 sec^-1の代謝回転で真の一次速度を示すため、他の標識酵素に比べてカイネティック測定に適し、また高い感度が得られます。
HRP（Horseradish Peroxidase）やAP（Alkaline Phosphatase）の約3倍の代謝回転速度に相当します。
バッファー中のアセチルコリンの非酵素的加水分解は本質的に起こらないため、低バックグラウンドでアッセイを行うことができます。
高感度かつ低バックグラウンドにより、ELISAキットの測定に求められる高いS/N比を実現しています。
AChEは安定性に優れた酵素であり、その酵素活性は長時間維持されます。そのため、広いダイナミックレンジが得られます。
AChEは安定した酵素であり、その活性は長時間にわたって一定であるため、低～高濃度の試料の同時分析が可能です。

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測定原理

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特長

キットには、回収率算用のQC controlが含まれています。
測定試料：血漿（K₃-EDTA処理）
必要試料量：100μl
測定原理：サンドイッチELISA法
フォーマット：96-wellプレート
測定方法：比色
測定波長：405～414 nm
測定範囲：31.3～4,000.0 pg/ml
検出感度：62.5 pg/ml

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操作方法概略

ELISAワークフロー概略
	Blank	NSB	Standard	QC	Sample
Obestatin EIA bufferの添加	－	100μl	－	－	－
Standardの添加	－	－	100μl	－	－
QCの添加	－	－	－	100μl	－
Sampleの添加	－	－	－	－	100μl
プレートをカバーし、オービタルシェーカー（300rpm）で撹拌しながら室温下、1時間インキュベートする。
ストリップを300μl/wellのWash bufferで5回洗浄し、ウェルの中の液を廃棄する。
Biotin-labeled antibodyの添加	－	100μl
プレートをカバーし、4℃で、一晩（20時間）インキュベートする。
ストリップを300μl/wellのWash bufferで5回洗浄し、ウェルの中の液を廃棄する。
Streptavidin AChE tracerの添加	－	100μl
プレートをカバーし、オービタルシェーカー（300rpm）で撹拌しながら室温下、1時間30分インキュベートする。
ストリップを300μl/wellのWash bufferで5回洗浄し、ウェルの中の液を廃棄する。
Ellman's reagentの添加	200μl
プレートを室温下、暗所で撹拌する。
OD _{405～414 nm}を測定する。

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キット内容

96-well plate precoated with anti-obestatin(human) MAb
Streptavidin AChE tracer
Biotin labeled obestatin(human) antibody
Obestatin(human) standard
Obestatin(Human) quality control
Obestatin EIA buffer
Wash buffer concentrated
Tween 20
Ellman's reagent
Well cover sheet

製品外観

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交差性

Human obestatin	100％	Mouse/Rat obestatin	19.1％
Dog obestatin	10.1％	Pig obestatin	0.0％

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品名	商品コード	測定試料	測定方法	測定波長	製品概要
Obestatin (Mouse, Rat) ELISA Kit	A05035	血漿（EDTA処理）	比色	405～414 nm	マウスおよびラット血漿中のObestatin（オベスタチン）を、サンドイッチ法により比色定量するELISAキット。

品名	CAS No.	化学式	M.W.	純度	メーカー	商品コード	包装
Obestatin (human)	1081110-72-6	C₁₁₆H₁₇₆N₃₂O₃₃	2546.8	≧95％	CAY	24552	500μg
Obestatin （trifluoroacetate salt） (rat)	－	C₁₁₄H₁₇₄N₃₄O₃₁・XCF₃COOH	2516.8	≧95％	CAY	24553	500μg