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ヒト・オベスタチンELISA（定量）キット Human Obestatin ELISA Kit（Bertin Bioreagent社 )

掲載日情報：2020/02/13 現在Webページ番号：69256

ベルテン バイオリージェント /
Bertin Bioreagent（旧 SPI-BIO）
[メーカー略称：SPB]

ヒト血漿中のオベスタチン（Obestatin）を、トレーサーにアセチルコリンエステラーゼ(AChE, Acetylcholinesterase）を、捕捉用抗体にモノクローナル抗体を用いたサンドイッチ法により比色定量するELISAキットです。

※ こちらからAcylated / Unacylated Ghrelin EIA Kit製品についての詳細をご覧いただけます。
※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

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検量線例

Human obestatin検量線例

Human obestatin検量線例

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オベスタチン（Obestatin）とは

オベスタチン（Obestatin）は、α-ヘリックス中に二次構造を有する23個のアミノ酸からなるアミド化ペプチドです1。2005年にラットの胃から最初に分離されました2。オベスタチンは、プレプログレリン由来のペプチドであり、胃3、膵臓3、脂肪組織3、骨格筋または心臓など、多くの組織や器官によって生成されます。

オベスタチンは、食物摂取に作用する食欲抑制ペプチドとして同定されました2。 最初の研究では、オベスタチンの食物摂取と体重減退が示され、さらにグルコースと脂質代謝に積極的な影響を与えることから、抗糖尿病ペプチドであるとも考えられています3。ヒトオベスタチンは、アポトーシスを減少させ、B細胞とヒト膵島の増殖を促進します4。これらは不均衡のため、オベスタチンは様々な機能があります。 実際、オベスタチンは血圧調節機能があり5、高血圧患者の場合には血漿中濃度が上昇します6。また、オベスタチンは不安の調節と記憶の改善に関与している可能性があります7。

Obestatinの構造

Preproghrelin（Ghrelinの前駆体）とObestatin




参考文献

  1. Alen, B., et al., PLOS ONE, 7(10), (2012).
  2. Zhang, J.V., et al., Science, 310, 996～999 (2005).
  3. Gronberg, M., et al., J. Histochem. Cytochem., 56, 793～801 (2008).
  4. Granata, R., et al., J. Mol. Endocrinol., 45, 107～118 (2010).
  5. Ren, A.J., et al., Peptides, 30, 1742～1745 (2009).
  6. Li, X.F., et al., Peptides, 31, 297～300 (2010).
  7. Carlini, V.P., et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., 352, 907～912 (2007).

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MEMO アセチルコリンエステラーゼ（AChE, Acetylcholinesterase）標識のメリット

アセチルコリンエステラーゼ（AChE, Acetylcholinesterase）標識のメリット (クリックで開閉します)

Bertin Bioreagent社のELISAキットでは、主に酵素標識としてアセチルコリンエステラーゼ（AChE, Acetylcholinesterase）による方法が採用されています。AChEアッセイは、基質としてアセチルチオコリンを含むエルマン試薬を使用して発色させます。この酵素反応最終生産物（5-チオ-2-ニトロ安息香酸）は405～414 nmに吸収極大を持つ明るい黄色化合物です。AChEは、ELISA法で用いられる他の酵素に比べて以下のような長所を有しています。

  • AChEは、64,000 sec-1の代謝回転で真の一次速度を示すため、他の標識酵素に比べてカイネティック測定に適し、また高い感度が得られます。
  • HRP（Horseradish Peroxidase）やAP（Alkaline Phosphatase）の約3倍の代謝回転速度に相当します。
  • バッファー中のアセチルコリンの非酵素的加水分解は本質的に起こらないため、低バックグラウンドでアッセイを行うことができます。
  • 高感度かつ低バックグラウンドにより、ELISAキットの測定に求められる高いS/N比を実現しています。
  • AChEは安定性に優れた酵素であり、その酵素活性は長時間維持されます。そのため、広いダイナミックレンジが得られます。
  • AChEは安定した酵素であり、その活性は長時間にわたって一定であるため、低～高濃度の試料の同時分析が可能です。

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測定原理

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特長

  • キットには、回収率算用のQC controlが含まれています。
  • 測定試料：血漿（K3-EDTA処理）
  • 必要試料量：100μl
  • 測定原理：サンドイッチELISA法
  • フォーマット：96-wellプレート
  • 測定方法：比色
  • 測定波長：405～414 nm
  • 測定範囲：31.3～4,000.0 pg/ml
  • 検出感度：62.5 pg/ml

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操作方法概略

ELISAワークフロー概略
Blank NSB Standard QC Sample
Obestatin EIA bufferの添加 － 100μl － － －
Standardの添加 － － 100μl － －
QCの添加 － － － 100μl －
Sampleの添加 － － － － 100μl
プレートをカバーし、オービタルシェーカー（300rpm）で撹拌しながら室温下、1時間インキュベートする。
ストリップを300μl/wellのWash bufferで5回洗浄し、ウェルの中の液を廃棄する。
Biotin-labeled antibodyの添加 － 100μl
プレートをカバーし、4℃で、一晩（20時間）インキュベートする。
ストリップを300μl/wellのWash bufferで5回洗浄し、ウェルの中の液を廃棄する。
Streptavidin AChE tracerの添加 － 100μl
プレートをカバーし、オービタルシェーカー（300rpm）で撹拌しながら室温下、1時間30分インキュベートする。
ストリップを300μl/wellのWash bufferで5回洗浄し、ウェルの中の液を廃棄する。
Ellman's reagentの添加 200μl
プレートを室温下、暗所で撹拌する。
OD 405～414 nmを測定する。

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キット内容

  • 96-well plate precoated with anti-obestatin(human) MAb
  • Streptavidin AChE tracer
  • Biotin labeled obestatin(human) antibody
  • Obestatin(human) standard
  • Obestatin(Human) quality control
  • Obestatin EIA buffer
  • Wash buffer concentrated
  • Tween 20
  • Ellman's reagent
  • Well cover sheet
製品外観

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交差性

Human obestatin 100％ Mouse/Rat obestatin 19.1％
Dog obestatin 10.1％ Pig obestatin 0.0％

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関連製品

Obestatin EIA Kit (Mouse, Rat)

品名をクリックすると製品の詳細、商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 商品コード 測定試料 測定方法 測定波長 製品概要
Obestatin (Mouse, Rat) ELISA Kit A05035 血漿（EDTA処理） 比色 405～414 nm マウスおよびラット血漿中のObestatin（オベスタチン）を、サンドイッチ法により比色定量するELISAキット。

Obestatin Peptides

品名をクリックすると製品の詳細、商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

品名 CAS No. 化学式 M.W. 純度 メーカー 商品コード 包装
Obestatin (human) 1081110-72-6 C116H176N32O33 2546.8 ≧95％ CAY 24552 500μg
Obestatin （trifluoroacetate salt） (rat) － C114H174N34O31・XCF3COOH 2516.8 ≧95％ CAY 24553 500μg

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価格

[在庫・価格 ：2025年04月26日 08時35分現在]

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 納期 文献数
Obestatin (human) ELISA kit
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説明文
種交差性：Human，測定試料：Plasma/Buffer，測定試料量：100 µL，検出限界：62,5 pg/mL，測定範囲：31,3 pg/mL - 4 000,0 pg/mL
法規制等 医薬用外毒物
保存条件 法規備考
掲載カタログ

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Obestatin (human) ELISA kit

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説明文 種交差性：Human，測定試料：Plasma/Buffer，測定試料量：100 µL，検出限界：62,5 pg/mL，測定範囲：31,3 pg/mL - 4 000,0 pg/mL
法規制等 医薬用外毒物
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お問い合わせ先

（テクニカルサポート 試薬担当）

reagent@funakoshi.co.jp

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