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Gene Knockout Kit v2 sgRNA
multi-guide法による高効率ゲノム編集（ノックアウト）用デザイン済みsgRNAキット Gene Knockout Kit v2 sgRNA
掲載日情報：2022/06/20 現在Webページ番号：68903
ヒトまたはマウスの標的遺伝子をCRISPRを用いてノックアウトする際に用いるsgRNAです。ご指定いただいた遺伝子に対する3種類のsgRNAを，独自のアルゴリズムによりデザイン・合成し，混合した状態でご提供します。空間的に最適な領域に配置された複数種類のsgRNAを同時に使用するmulti-guideストラテジーにより，確実性の高いCRISPRノックアウトを行うことができます。
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multi-guideストラテジーとは
一つの遺伝子に対し，最適な空間配置でデザインされた複数種類のsgRNAを同時に使用することで，長い鎖長での「断片欠失」が起こり，従来法よりも確実なCRISPRノックアウトが可能になります。
通常のCRISPRノックアウトでは単独のガイドRNAを使用してランダムに起きる欠失に頼ることになるため，様々なゲノム編集が予測不可能に起きる，機能的なノックアウトが行われない，等の欠点がありました。複数種類のガイドRNAを同時に使用するmulti-guide法では，長い断片の欠失を誘導することで，より確実な遺伝子機能のノックアウトを行うことができます。
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特長
- 各sgRNA配列はSpCas9ヌクレアーゼ（S. pyogenes）を使用したゲノム編集用にデザインされています。
- 初代培養細胞，幹細胞を含む様々な細胞に適用できます。
- sgRNAは化学的に修飾されており，RNA分解や細胞内免疫応答が抑えられています。
- 3種類のsgRNAは1本のチューブに混合されて納品されます。
- NucleofectionおよびLipofectionによるプロトコルが用意されています。
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Multi-guide sgRNAの検証例
multi-guide法と単独のsgRNAを使用したゲノム編集の比較
2種類のsgRNAを使用したmulti-guide法（緑）によるゲノム編集では，単独のsgRNAを使用した例（黒）に比べてより長鎖の断片欠失が誘導されている。
multi-guide法を用いた樹状細胞におけるTNF，TLR4遺伝子のゲノム編集例
樹状細胞においてTNF，TLR4遺伝子に対するmulti-guide法（3種類使用）または各sgRNA個別使用による遺伝子ノックアウトを行った。得られた細胞における標的領域の欠失について，塩基配列解析により検出した。multi-guide法によるゲノム編集では，75％以上の効率で長い領域（50 bp以上）の欠失を引き起こした。
データ提供：Dr. Marco Jost and Dr. Jonathan Weissman（米国UCSF）
Dr. Amy Jacobson and Dr. Michael Fischbach（米国Stanford大学）
multi-guide法を用いた，CINPまたはCOASY，CDK9遺伝子に対する遺伝子ノックアウト例
CINPまたはCOASY，CDK9遺伝子に対してmulti-guide法による遺伝子ノックアウトを行い，KOスコア（標的領域の塩基配列解析を行い，断片欠失またはフレームシフト欠失が起きている割合）を算定した（左）。HEK293細胞にmulti-guide sgRNAを導入後，1～7日目の細胞中の標的タンパク質をウエスタンブロットにより検出した。ノーマライズにGAPDHを用いた（右）。細胞のクローニングを行っていない状態で，7日目にはほぼ完全に標的タンパク質の発現が消失した。
multi-guide法または単独のsgRNAを用いた，32種類の遺伝子ノックアウト結果
32種類の遺伝子に対する遺伝子ノックアウトを，単独のsgRNAまたはmulti-guide法により行い，KOスコアを算定した。単独sgRNAでは69.6％だったKOスコアの中央値がmulti-guide法では89.9％まで上昇している。
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メーカー動画
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納品
- 合成されたsgRNA
- Nuclease-free Tris-EDTA buffer
- Nuclease-free water
※ Cas9ヌクレアーゼおよびTransfection Optimization Kitは含まれていません。下記のSynthego Corporation社製品のご使用をお勧めします。
追加しました。
ご注文方法／価格
ヒトまたはマウスの標的遺伝子名（タンパク質名）をご指定の上，Add-On Products（追加購入品）として，Cas9 2NLS NucleaseまたはTransfection Optimization Kit(Multi-guide)，Positive Control Multi-guide sgRNA (mod), Human TRAC のご注文の有無をご記入下さい。
※ 専用注文書に必要事項をご記入の上，電子メールに添付して下記の当社受託・特注品業務担当までお送り下さい。
Human
[在庫・価格 ：2022年06月30日 09時51分現在]
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Gene Knockout Kit v2, Human (1.5nmol Multi-guide SgRNA) |
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Gene Knockout Kit v2, Human (5nmol Multi-guide SgRNA) |
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[在庫・価格 ：2022年06月30日 09時51分現在]
Gene Knockout Kit v2, Human (1.5nmol Multi-guide SgRNA)
文献数： 0
- 商品コード：GKO-HS1-1.5
- メーカー：SGO
- 包装：1kit
- 価格：¥60,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
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※購入時にSGO社専用の「使用目的確約書」が必要です。 |
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- メーカー：SGO
- 包装：1kit
- 価格：¥60,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
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- メーカー：SGO
- 包装：1kit
- 価格：¥80,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
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Mouse
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Gene Knockout Kit v2, Mouse (1.5nmol Multi-guide SgRNA) |
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Gene Knockout Kit v2, Mouse (5nmol Multi-guide SgRNA) |
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[在庫・価格 ：2022年06月30日 09時51分現在]
Gene Knockout Kit v2, Mouse (1.5nmol Multi-guide SgRNA)
文献数： 0
- 商品コード：GKO-HM1-1.5
- メーカー：SGO
- 包装：1kit
- 価格：¥100,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
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- 商品コード：GKO-HM1-003
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- 価格：¥100,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
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- 商品コード：GKO-HM1-005
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- 価格：¥120,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
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※購入時にSGO社専用の「使用目的確約書」が必要です。 |
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[在庫・価格 ：2022年06月30日 09時51分現在]
Cas9 2NLS Nuclease
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- 商品コード：00033
- メーカー：SGO
- 包装：300pmol
- 価格：¥20,000
- 在庫：無(発注済)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
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単品購入不可。sgRNA合成と同時購入が必要。 ※ご注文時には専用注文書に必要事項をご記入下さい。 |
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Cas9 2NLS Nuclease
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- 価格：¥60,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
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単品購入不可。sgRNA合成と同時購入が必要。 ※ご注文時には専用注文書に必要事項をご記入下さい。 |
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- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
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単品購入不可。sgRNA合成と同時購入が必要。 ※ご注文時には専用注文書に必要事項をご記入下さい。 |
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ニュース2021年6月15日号 p.15 ニュース2020年5月15日号 p.21
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Positive Control Multi-guide sgRNA (mod), Human TRAC
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- メーカー：SGO
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- 在庫：無(未発注)
- 納期：3～4週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
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単品購入不可。sgRNA合成と同時購入が必要。 ※ご注文時には専用注文書に必要事項をご記入下さい。 |
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