細胞レベルのDNA損傷度を測定するキット OxiSelect Comet Assay Kit(コメットアッセイキット)
掲載日情報:2025/04/10 現在Webページ番号:68880
細胞のDNA損傷をシングルセル電気泳動アッセイ(SCGE:Single Cell Gel Electrophoresis Assay、「通称:コメットアッセイ」)で簡単に評価できるキットです。
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※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
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Comet Assayとは
細胞内におけるDNA損傷は、環境的要因や通常の代謝過程が原因で、1つの細胞当たり、1日で1,000~1,000,000分子の割合で発生します。これは、ヒトゲノムの約60億塩基(30億塩基対)のごく一部に過ぎませんが、重要な遺伝子における未修復の損傷は細胞機能を妨げ、またがんのリスクを大幅に増加させます。
コメットアッセイ(単一細胞ゲル電気泳動アッセイ:SCGE, single cell gel electrophoresis assayとも呼ばれる)は、個々の細胞におけるDNA損傷を測定するための一般的な技術です。電気泳動により、核内に残ったインタクトなDNA(コメットヘッド)と、損傷を受けたDNA(断片や鎖の切断を含む)は分離され、下図に示されるようなコメットテール形状が得られます。DNA損傷自体は落射蛍光顕微鏡によるテール部の観察で視覚的に確認できますが、画像解析ソフトウェアを用いてさまざまなパラメータを測定することにより、さらに個々の細胞のDNA損傷度の解析が可能になります。
DNA損傷度は、インタクトなDNA(コメットヘッド)と損傷を受けたDNA(コメットテール)の比率により求められます。コメットアッセイの結果解析には、一般的に次の2つのパラメータ(テールDNA%、テールモーメント)が用いられます。
テールモーメントは、次のいずれかの方法でにより求められます。
- (a) Olive Tail Moment = Tail DNA% × Tail Moment Length*
- (b) Extent Tail Moment = Tail DNA% × Length of Tail
* Tail Moment Lengthは、頭部中央から尾部中央までの距離です。
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製品ラインナップ
画像(Comet slideの外観)をクリックすると拡大図、商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。
品名 | OxySelect Comet Assay Kit | |||||||
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Comet slideの外観 | ![]() |
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フォーマット | 3-well slides | 10-well slides | 96-well | |||||
アッセイ数 | 15 assays | 75 assays | 5×75 assays | 50 assays | 250 assays | 96 assays | 5×96 assays | |
商品コード | キット | STA-350 | STA-351 | STA-351-5 | STA-850 | STA-851 | STA-355 | STA-355-5 |
Comet slide単体 | STA-352 | STA-353 | STA-353-5 | STA-852 | STA-853 | STA-356 | STA-356-5 | |
検出方法 | 落射蛍光顕微鏡 | |||||||
キット内容 | OxiSelect 3-Well Comet slide | ● (5 slides) |
● (25 slides) |
● (125 slides) |
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OxiSelect 10-Well Comet slide | − | ● (5 slides) |
● (25 slides) |
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OxiSelect 96-Well Comet slide | − | ● (1 slide) |
● (5 slides) |
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OxiSelect Comet agarose | ● | |||||||
Vista Green DNA dye, 10000X | ● | |||||||
EDTA solution, 500 mM | ● | |||||||
Lysis solution, 10X | ● |
※ 測定には、水平型電気泳動装置および落射蛍光顕微鏡が別途必要です。
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特長
- さまざまな種類のDNA損傷のスクリーニングに有用です。
- スライドは低融点アガロースの接着のために特殊な処理を行っています。
- 落射蛍光顕微鏡により、簡単に可視化できます。
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操作方法概略
①試料の調製 | ②スライドへのアプライ | ③変性処理 | ④電気泳動 | ⑤落射蛍光顕微鏡観察 | |||
3-well slide | ![]() |
➡ | ![]() |
➡ | ![]() |
➡ | ![]() 正常細胞 |
10-well slide | ➡ | ![]() |
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➡ | |||||||
96-well slide | ![]() |
➡ | ![]() |
➡ | ![]() |
![]() 損傷した細胞 |
- ① 37℃で細胞をOxySelect Commet Agaroseと結合させる。
- ② 個々の細胞を溶融アガロースと混合した後、OxiSelect Comet Slideにアプライする。
- ③ アプライした包埋細胞をバッファーとアルカリ溶液で処理する。これによりDNAが弛緩し変性する。
- ④ 無傷のDNAと損傷したDNA断片を分離するために、試料を水平チャンバー内で電気泳動する。
- ⑤ 試料を乾燥し、DNA Dyeで染色後、落射蛍光顕微鏡で観察する。損傷を受けたDNA(切断と鎖切断を含む)は無傷のDNAよりも移動距離が大きいため、「コメットテール」形状を生成する(上図参照)。
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FAQ
Q-2. このアッセイの検出限界はどのくらいですか?☟
Q-7. 推奨のポジティブコントロールを教えて下さい。☟
Q-10. スライドはどのくらい保存できますか?☟
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