外因性物質の抗酸化能を細胞レベルで測定するキット OxiSelect Cellular Antioxidant Activity Assay Kit
掲載日情報：2019/06/13 現在Webページ番号：68779
外因性物質の抗酸化能を蛍光法により細胞レベルで定量するキットです。他のキットとは異なり、細胞全体での温度、pH、化合物の取り込み、代謝および効果を反映した環境下で測定できるため、in vivoにおける活性により近い測定結果を得られることが期待できます。
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| ケルセチン（Quercetin）の用量反応曲線例 | ケルセチン（Quercetin）処理によるHeLa細胞における抗酸化能の測定例 | |
| HeLa細胞60,000個を96-wellプレートに播種し、コンフルエントになるまで培養後、DCFA-DAとケルセチン（Quercetin）で37℃、60分間前処理した。キットに含まれるFree radical indicatorを細胞に加えてアッセイを開始し、37℃で5分ごとに1時間まで蛍光強度（RFU)を計測した。 |
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酸化ストレスと活性酸素種（ROS)について
酸化ストレスの増加に伴う活性酸素種（ROS, Reactive oxygen speicies）の蓄積は、いくつかの疾病の病因に関与しています。血管疾患、糖尿病、腎虚血、アテローム性動脈硬化症、肺疾患、炎症性疾患およびがんにおける酸化ストレスの関与は、かなり解明されてきました。フリーラジカルおよび他の反応種はin vivoで絶えず生成されており、生体分子に酸化的損傷を引き起こします。このプロセスは、複数の抗酸化物質と修復システムの存在や、損傷した核酸、タンパク質および脂質の置換によって抑制されます。
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測定原理
本キットでは、細胞透過性蛍光プローブ色素2',7'-Dichlorodihydrofluorescin diacetate (DCFH-DA)を用います。DCFH-DAが、細胞内に拡散し、まず細胞内エステラーゼによって脱アセチル化されて非蛍光性の2', 7'-Dichlorodihydrofluorescin (DCFH)に変換されます。フリーラジカルによってすぐに酸化されて高蛍光性の2', 7'-Dichlorodihydrofluorescein (DCF) を産生します（下図参照）。この蛍光強度は細胞質のROS濃度に比例します。抗酸化能をキットに含まれるケルセチン（Quercetin）*標準物質のDCF形成に対する蛍光阻害（蛍光強度の減少）により測定することができます。
＊ ケルセチン（Quercetin）は、果物や野菜に広く含まれている植物フラボノイドです。
本キットの反応機構
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特長
- 測定試料：哺乳動物培養細胞（HepG2, HeLaなど）
- インキュベーション時間：60分間（5分ごとのカイネティック測定）
- 測定方法：蛍光
- 測定波長：励起 480 nm／蛍光：530 nm
- 測定範囲：31.3～2,000μM（Quercetin）
- 感度：約10μM（Quercetin）
- アッセイ数：192 assays
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キット内容
- 96-well cell culture microtiter plate
- DCFH-DA probe
- Free radical initiator
- Quercetin
※ 測定には蛍光プレートリーダーが必要です。
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関連製品
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| 品名 | 商品コード | 測定方法 | 測定波長 | 製品概要 |
|---|---|---|---|---|
| OxiSelect HORAC Activity Assay Kit | STA-346 STA-346-5 STA-346-T |
蛍光 （カイネティック測定） |
励起 480 nm ／蛍光 530 nm |
Hydroxyl Radical Antioxidant Capacity (HORAC)法により、血清、血漿、組織ホモジネート、食品抽出物中の抗酸化能を蛍光法により測定するキット。 |
| OxiSelect ORAC Activity Assay Kit | STA-345 STA-345-5 STA-345-T |
蛍光 （カイネティック測定） |
励起 480 nm ／蛍光 530 nm |
Oxygen Radical Antioxidant Capacity (ORAC)法により、血清、血漿、組織ホモジネート、食品抽出物の抗酸化能を蛍光法により測定するキット。 |
| Total Antioxidant Capacity (TAC) Assay | STA-360 STA-360-T |
比色 | 490 nm | 血清、血漿、尿、細胞ライセート、組織ホモジネート、食品抽出物中の総抗酸化能（TAC, total antioxidant capacity）を比色法により測定するキット。 |
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月20日 20時55分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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OxiSelect Cellular Antioxidant Assay Kit (Green Fluorescence) (192assays) |
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[在庫・価格 ：2024年04月20日 20時55分現在]
OxiSelect Cellular Antioxidant Assay Kit (Green Fluorescence) (192assays)
文献数： 15
- 商品コード：STA-349
- メーカー：CBO
- 包装：1kit
- 価格：¥131,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：1週間程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 |
外因性物質の抗酸化能を蛍光法により細胞レベルで定量するキット。 |
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃,-20℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
Cell Biolabs（セルバイオラボ）社製品特集 |
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