ウエスタンブロッティングによりオートファジーを検出するキット Cell Biolabs社 Autophagy Immunoblot Kit (LC3-ⅡDetection)

オートファジー（autophagy）は、細胞質成分のリソソーム分解経路であり、アミノ酸の飢餓下やウイルス感染などのストレス条件下において活性化されます。哺乳動物細胞が飢餓下に短期間曝されると、オートファジーによって不要な細胞成分を分解し、栄養素を遊離させて重要な生合成反応に使用します。最近の研究結果では、オートファジーは発生、成長調節、がんおよび長寿にも関与してることが示されています。

アミノ酸飢餓下などのストレスシグナルによってオートファジーが誘導されると、最初にオートファゴソーム（autophagosome、自食胞）が形成されます。オートファゴソームマーカータンパク質として知られるMAP LC3は、もともと微小管関連タンパク質として同定され、「Microtubule-Associated-Protein-Light-Chain-3」と命名されました。LC3は、16～18 kDaの小さなタンパク質で、非飢餓下の細胞では可溶性ですが、アミノ酸飢餓下では末梢膜結合性となります。免疫電子顕微鏡により、LC3はオートファゴソームの境界内膜および境界外膜に会合することが示されています。この膜会合は、脂質とホスファチジルエタノールアミンへの共有結合によって媒介されます。ウエスタンブロッティングでは、LC3はLC3-ⅠおよびLC3-Ⅱの2つの形態が見られます。LC3-Ⅰは可溶性画分に見られ、LC3-Ⅱはペレット化が可能な膜画分に見られます。LC3-ⅠおよびLC3-Ⅱは共に非飢餓細胞において見られるますが、オートファジー誘導下においてはLC3-Ⅱの割合が増加します。