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Fab-Strepを用いた各種T細胞単離キット Fab-TACS Gravity Kitシリーズ

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:68767

ヒトまたはマウスの全血から直接、高純度、高収率かつ高い生存率で標的T細胞を単離するキットです。CD特異的Fab-Strep(Strep-tag融合Fabフラグメント)を結合した細胞グレードアガロースマトリックスを充填したカラムを用いたFab-TACSポジティブセレクション法により単離します。

キットイメージ Fab-TACS Gravityカラムイメージ Gravity Adapterイメージ
キット外観 Fab-TACS Gravity Column Fab-TACS Gravity Adapter

使用方法動画



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Fab-TACSポジティブセレクション法とは

Fab-TACSは、Strep-tag/Strep-Tactinをベースにした、新しいアフィニティ細胞選別法です。この技術では、細胞グレードのアガロースマトリックス表面に、Strep-tag/Strep-Tactinを介してCD特異的Fabフラグメント(Fab-Strep)結合し、免疫アフィニティクロマトグラフィーにより標的細胞を可逆的に捕捉および放出させます。詳細は、「Fab-TACS Agarose Column Starter Kitシリーズ」をご覧下さい。

原理


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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると各製品の価格表をご覧いただけます。

標的T細胞対象細胞品名フローサイトメトリー解析結果包装商品コード
処理前処理後
Human
CD3+
T細胞
全血CD3 Fab-TACS
Gravity Kit, Human
CD3<sup>+</sup> Before CD3<sup>+</sup> After4 columns6-6201-004
10 columns6-6201-010
Human
CD4+ T細胞
CD4+ Fab-TACS
Gravity Kit, Human
CD4<sup>+</sup> Before CD4<sup>+</sup> After4 columns6-6202-004
10 columns6-6202-010
Human
CD8+ T細胞
CD8+ Fab-TACS
Gravity Kit, Human
CD8+ Before CD8+ After4 columns6-6203-004
10 columns6-6203-010
Human
CD31+ T細胞
CD31+ Fab-TACS
Gravity Kit, Human
CD31+ Before CD31+ After4 columns6-6216-004
10 columns6-6216-010
Mouse
CD3+ T細胞
脾細胞CD3 Fab-TACS
Gravity Kit, Mouse
CD3<sup>+</sup> Before CD3<sup>+</sup> After4 columns6-6404-004
10 columns6-6202-010
Mouse
CD4+ T細胞
脾臓CD4 Fab-TACS
Gravity Kit, Mouse
CD4<sup>+</sup> Before CD4<sup>+</sup> After4 columns6-6401-004
10 columns6-6401-010

Check it out! Fab-TACS Introductory Kit Fab-Strep of choice

お試し用製品として、上記10種の細胞のうちご希望の1種に対するカラム2本入りのFab-TACS Introductory Kit Fab-Strep of choice(#6-6299-002)もあります。

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特長

  • 全血(ヒト)または細胞懸濁液(マウス)をカラムに加えることにより、Fab-Strepをコートしたマトリックスに標的細胞が特異的に吸着され、非標的細胞はフロースルーに排出されます。洗浄後、ビオチンを含む溶出液で標的細胞を溶出します。
  • 非標識のT細胞を単離できます。
  • 遠心分離は必要ありません。
  • 溶出後、Fab-Strepは、標的細胞表面から自己解離します。

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操作方法概略(ヒト全血の場合)

操作法概要


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キット内容

  • Fab-TACS gravity column filled with cell-grade agarose matrix*2
  • Fab-Strep, lyophilized*2
  • 100 mM biotin stock solution for elution of cells
  • Buffer CI (10x) for cell isolation
  • Fab-TACS Gravity Adapter
  • Fab-TACS flow restrictor (Human用キットのみ)

*2 キットにより内容は異なります。

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使用例

YIELD - for efficient workflow(高収率)

YIELD

CD3+およびCD4+T細胞を、それぞれFab-TACS Gravity Isolation Kitを用いて濃縮した。棒グラフは、計5つの試料から単離された標的細胞の平均値収率を示す。Fab-TACS Gravity Isolation Kitを用いた場合、再現性が高い方法で高収率が得られることがわかる。

PURITY - for reliable results(高純度)

PURITY

全血から直接CD3+およびCD4+T細胞を単離した。細胞をCD3-APC(OKT-3)またはCD4-PE(OKT-4)のいずれかで蛍光染色し、フローサイトメトリーによって分析した。左側は単離前、右側は単離後を示す。死細胞はDAPI染色を用いた分析から除外した。重なりとデブリの識別は、異なるFSC / SSCシグナルを用いて行った。本キットを用いた場合、試料の違いに関わらず最高純度が得られることがわかる。

VIABILITY - for downstream experiments(高い生存率)

VIABILITY

分離細胞の生存率を計5つの試料の平均値で示した。本キットで単離したT細胞は、単離したT細胞は高い生存率と免疫応答性を有し、以降の適用に使用できることがわかる。

REVERSIBILITY - for authentic cells(標的細胞の可逆性)

REVERSIBILITY

CD3 Fab-TACS Gravity Kit(#6-6201-004/-010)により単離した標的細胞(CD3発現細胞)とFab-Strep標識細胞にStrep-Tactin-APCを加え、細胞のAPCの蛍光シフトを測定した。この実験例では、試料中の標的細胞はFab-TACS Gravity Kitによる単離の過程でCD特異的Fab-Strepと結合し、それを介してアガロースビーズ表面に結合したStrep-Tactinに一旦吸着されるが、単離・溶出後の標的細胞は再び非標識細胞として回収されることがわかる。
上図:標的細胞は、単離、溶出後はFab-strepなどの単離試薬を含まない非標識細胞として回収されるため、Strep-Tactin-APCとは結合せず、細胞にはAPCによる蛍光シフトは生じない。
下図:Fab-Strep標識細胞を用いた場合、Strep-Tactin-APCと結合し、細胞にAPCによる蛍光シフトが生じる。


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価格

Human Fab-TACS Gravity Kit

[在庫・価格 :2024年04月26日 00時00分現在]

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Mouse Fab-TACS Gravity Kit

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Fab-TACS Gravity Introducory Kit

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本製品に関するご注文については、当社テクニカルサポート部までお問い合わせ下さい。

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(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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