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メーカー：	Horizon社Dharmacon製品 OriGene Technologies
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HOME > 試薬 > タンパク質／酵素 > タンパク質解析 > タンパク質の抽出・精製 > MBP-Spin Protein Miniprep Kit

MBPタグ融合タンパク質をわずか6分で精製するキット MBP-Spin Protein Miniprep Kit

掲載日情報：2018/09/27 現在Webページ番号：68574

Zymo-Spinカラムを用いて、MBPタグ融合タンパク質を含む細胞ライセートなど^＊から、わずか6分間の簡便な方法でMBPタグ融合タンパク質を精製できるキットです。得られた精製タンパク質は、酵素反応、生化学的実験、SDS-PAGEなどに使用することができます。

＊目的のMBPタグ融合タンパク質は、バッファー中で完全に溶解している必要があります。ほとんどのタンパク質ではpH 7.0のバッファーが適しますが、タンパク質によっては異なります。本キットに使用可能な還元剤や界面活性剤の種類と濃度については、こちらをご覧下さい。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

使用例
製品の種類と仕様
使用可能な化合物と濃度
操作方法概略
キット内容
関連製品
価格

使用例

N末端側にMBP(Maltose-binding-protein)を融合させたタンパク質を発現しているE.coli細胞粗抽出物と、本製品を用いて精製したタンパク質を、4～20％SDS-PAGEにより分析した。タンパク質の検出にはInstantBlueを用いた。

MBP-カルモジュリン：55 kDa
MBP-BDV-P（リン酸化）タンパク質：65 kDa
MBP-GFP：69 kDa

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製品の種類と仕様

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

品名	MBP-Spin Protein Miniprep Kit
商品コード	P2006	P2007
使用回数	10 preps	50 preps
試料の種類	MBPタグ融合タンパク質を含む細胞ライセートまたはタンパク質混合溶液
精製方法	アミロース担体＆スピンカラム
最大結合容量	≧400μg（MBPタグ融合タンパク質）/100μlアミロースレジン
処理時間	6 分間
溶出方法	大過剰なマルトース溶液
溶出液量	≧200μl

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使用可能な化合物と濃度

本キットでは、試料溶液中に以下の化合物が混在しても問題なく使用できることを確認しています。また、試料溶液中にマルトースが含まれていないことが必要です。

種類	化合物	濃度
還元剤	β-メルカプトエタノール	50 mM
非イオン性界面活性剤	Nonidet P-40	2％
	Titon X-100	2％
	Tween-20	2％
イオン性界面活性剤	SDS	0.1％
その他の化合物および試薬	EDTA	50 mM
	エタノール	10％(v/v)
	グリセロール	25％(v/v)
	イミダゾール	250 mM
	NaCl	1 M

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操作方法概略

以下の操作は、4～8℃または室温（15～30℃）で行って下さい。遠心分離は、卓上遠心分離機を用いて最大速度（通常13,000～17,000×g）で行って下さい。

Zymo-Spin P1 columnをCollection tubeにセットする。
Amylose resinをボルテックスまたはピペッティングにより完全に再懸濁し、100μlをZymo-Spin P1 columnに加える。
15秒間遠心分離する。
MBP-wash bufferを加える。
15秒間遠心分離後、フロースルーを廃棄する。
最大800μlまでのタンパク質試料をZymo-Spin P1 columnに加え、ピペッティングまたは指で叩いてレジンを再懸濁する。
カラムを3分間インキュベートし、その間、レジンの再懸濁を数回行う。
15秒間遠心分離する。フロースルーを廃棄し、カラムを再度Collection tubeにセットする。
MBP-wash buffer 500μlをカラムに加え、レジンを再懸濁する。フロースルーを廃棄する。
MBP-wash buffer 200μlをカラムに加え、レジンを再懸濁する。15秒間遠心分離する。
上記の操作をもう一回繰り返す。
Zymo-Spin P1 columnをお手持ちの新しい1.5 ml遠心チューブにセットする。
MBP-elution buffer 200μlをカラムに加え、レジンを再懸濁後に1分間インキュベートする。
15秒間遠心分離し、精製タンパク質を回収する。

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キット内容

各キットコンポーネント名をクリックすると、単品の価格表をご覧いただけます。

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品名	使用回数	商品コード	製品概要
His-Spin Protein Miniprep Kit	10 preps	P2001	Zymo-Spinカラムを用いて、Hisタグ融合タンパク質をわずか5分間で簡便に精製できるキット
50 preps	P2002
Strep-Spin Protein Miniprep Kit	10 preps	P2004	Zymo-Spinカラムを用いて、Strepタグ融合タンパク質をわずか7分間で簡便に精製できるキット
50 preps	P2005