MBPタグ融合タンパク質をわずか6分で精製するキット MBP-Spin Protein Miniprep Kit
掲載日情報：2018/09/27 現在Webページ番号：68574
Zymo-Spinカラムを用いて、MBPタグ融合タンパク質を含む細胞ライセートなど＊から、わずか6分間の簡便な方法でMBPタグ融合タンパク質を精製できるキットです。得られた精製タンパク質は、酵素反応、生化学的実験、SDS-PAGEなどに使用することができます。
＊ 目的のMBPタグ融合タンパク質は、バッファー中で完全に溶解している必要があります。ほとんどのタンパク質ではpH 7.0のバッファーが適しますが、タンパク質によっては異なります。本キットに使用可能な還元剤や界面活性剤の種類と濃度については、こちらをご覧下さい。
※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
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使用例
N末端側にMBP(Maltose-binding-protein)を融合させたタンパク質を発現しているE.coli細胞粗抽出物と、本製品を用いて精製したタンパク質を、4～20％SDS-PAGEにより分析した。タンパク質の検出にはInstantBlueを用いた。
- MBP-カルモジュリン：55 kDa
- MBP-BDV-P（リン酸化）タンパク質：65 kDa
- MBP-GFP：69 kDa
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製品の種類と仕様
商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。
| 品名 | MBP-Spin Protein Miniprep Kit | |
|---|---|---|
| 商品コード | P2006 | P2007 |
| 使用回数 | 10 preps | 50 preps |
| 試料の種類 | MBPタグ融合タンパク質を含む細胞ライセートまたはタンパク質混合溶液 | |
| 精製方法 | アミロース担体＆スピンカラム | |
| 最大結合容量 | ≧400μg（MBPタグ融合タンパク質）/100μlアミロースレジン | |
| 処理時間 | 6 分間 | |
| 溶出方法 | 大過剰なマルトース溶液 | |
| 溶出液量 | ≧200μl | |
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使用可能な化合物と濃度
本キットでは、試料溶液中に以下の化合物が混在しても問題なく使用できることを確認しています。また、試料溶液中にマルトースが含まれていないことが必要です。
| 種類 | 化合物 | 濃度 | |
| 還元剤 | β-メルカプトエタノール | 50 mM | |
| 非イオン性界面活性剤 | Nonidet P-40 | 2％ | |
| Titon X-100 | 2％ | ||
| Tween-20 | 2％ | ||
| イオン性界面活性剤 | SDS | 0.1％ | |
| その他の化合物および試薬 | EDTA | 50 mM | |
| エタノール | 10％(v/v) | ||
| グリセロール | 25％(v/v) | ||
| イミダゾール | 250 mM | ||
| NaCl | 1 M |
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操作方法概略
以下の操作は、4～8℃または室温（15～30℃）で行って下さい。遠心分離は、卓上遠心分離機を用いて最大速度（通常13,000～17,000×g）で行って下さい。
- Zymo-Spin P1 columnをCollection tubeにセットする。
- Amylose resinをボルテックスまたはピペッティングにより完全に再懸濁し、100μlをZymo-Spin P1 columnに加える。
- 15秒間遠心分離する。
- MBP-wash bufferを加える。
- 15秒間遠心分離後、フロースルーを廃棄する。
- 最大800μlまでのタンパク質試料をZymo-Spin P1 columnに加え、ピペッティングまたは指で叩いてレジンを再懸濁する。
- カラムを3分間インキュベートし、その間、レジンの再懸濁を数回行う。
- 15秒間遠心分離する。フロースルーを廃棄し、カラムを再度Collection tubeにセットする。
- MBP-wash buffer 500μlをカラムに加え、レジンを再懸濁する。フロースルーを廃棄する。
- MBP-wash buffer 200μlをカラムに加え、レジンを再懸濁する。15秒間遠心分離する。
- 上記の操作をもう一回繰り返す。
- Zymo-Spin P1 columnをお手持ちの新しい1.5 ml遠心チューブにセットする。
- MBP-elution buffer 200μlをカラムに加え、レジンを再懸濁後に1分間インキュベートする。
- 15秒間遠心分離し、精製タンパク質を回収する。
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キット内容
各キットコンポーネント名をクリックすると、単品の価格表をご覧いただけます。
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関連製品
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| 品名 | 使用回数 | 商品コード | 製品概要 |
|---|---|---|---|
| His-Spin Protein Miniprep Kit | 10 preps | P2001 | Zymo-Spinカラムを用いて、Hisタグ融合タンパク質をわずか5分間で簡便に精製できるキット |
| 50 preps | P2002 | ||
| Strep-Spin Protein Miniprep Kit | 10 preps | P2004 | Zymo-Spinカラムを用いて、Strepタグ融合タンパク質をわずか7分間で簡便に精製できるキット |
| 50 preps | P2005 |
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月20日 09時55分現在]
| 詳細 | 商品名 |
|
文献数 | ||
|---|---|---|---|---|---|
|
MBP-Spin Protein Miniprep (10 preps) |
|
本製品は取扱中止になりました | 0 | ||
|
MBP-Spin Protein Miniprep (50 preps) |
|
本製品は取扱中止になりました | 0 | ||
[在庫・価格 ：2024年04月20日 09時55分現在]
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