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新生したタンパク質および細胞増殖を測定するキット EZClick Global Protein Synthesis Assay Kit

掲載日情報:2018/09/14 現在Webページ番号:68554

細胞増殖や分化に伴うタンパク質の新生を簡便かつ特異的に測定するキットです。蛍光マイクロプレートリーダーや蛍光顕微鏡を用いるキット(#K467-100)と,フローサイトメーターや蛍光顕微鏡を用いるキット(#K459-100,#K715-100)があり,それぞれ浮遊細胞と接着細胞の両方に用いることができます
本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。

製品の種類

商品コードをクリックすると価格表を,画像をクリックすると拡大像をご覧いただけます。

品名 商品コード 測定方法/測定波長 使用例
蛍光マイクロプレート フローサイトメーター(使用チャンネル) 蛍光顕微鏡
EZClick Global Protein Synthesis Assay Kit K467-100 励起 494 nm
蛍光 521 nm
励起 494 nm
蛍光 521 nm
Cycloheximideの阻害効果

Jurkat細胞におけるシクロヘキサミドによるタンパク質新生の阻害効果
HeLa細胞
上段:未処理細胞
下段:シクロヘキサミド処理細胞
左側:緑色蛍光はHeLa細胞においてde novo合成された合成ペプチドを示す。
右側:それぞれの細胞の核染色
右側の核染色に対する左側の緑色シグナルの差により,タンパク質新生に起因することがわかる。
HeLa細胞(105 cells/ml)を37℃で30分間シクロヘキサミドで処理し,次にEZClick protein label単独またはEZClick protein labelとシクロヘキサミドを添加して30分間インキュベートを行った後に蛍光顕微鏡またはフローサイトメトリーで分析した。
HeLa細胞
Jurkat細胞の細胞数による検量線。検出限界:約31,250 cells/well
HeLa細胞
Fluorescence Azide添加量による検量線(0~0.1× range)
EZClick Global Protein Synthesis Assay Kit (FACS/Microscopy), Green Fluorescence K459-100 FL-1 励起 440 nm
蛍光 490 nm
HeLa細胞
新生したポリペプチド合成におけるシクロヘキサミドの影響
HeLa細胞(105 cells/ml)とJurkat細胞(106 cells/ml)をそれぞれ37℃で30分間シクロヘキサミドで処理し,次にEZClick protein label単独またはEZClick protein labelとシクロヘキサミドを添加して30分間インキュベートを行った後に蛍光顕微鏡またはフローサイトメトリーで分析した。
上段:未処理細胞
下段:シクロヘキサミド処理細胞
左側:緑色蛍光は細胞においてde novo合成されたペプチドを示す。
右側:それぞれの細胞の核染色
右側の核染色に対する左側の緑色シグナルの差により,タンパク質新生に起因することがわかる。
HeLa細胞
フローサイトメトリーによる分析
白線:ネガティブコントロール
青線:核のバックグラウンド(Fluorescence Azideのみ)
緑線:ポジティブコントロール(Protein Label)
赤線:シクロヘキサミド処理(検出:FL-1チャンネル)
EZClick Global Protein Synthesis Assay Kit (FACS/Microscopy), Red Fluorescence K715-100 FL-2 励起 440/490 nm
蛍光 540/580 nm
HeLa細胞
HeLa細胞(105 cells/ml)とJurkat細胞(106 cells/ml)をそれぞれ37℃で30分間シクロヘキサミドで処理し,次にEZClick protein label単独またはEZClick protein labelとシクロヘキサミドを添加して30分間インキュベートを行った後に蛍光顕微鏡またはフローサイトメトリーで分析した。
上段:未処理細胞
下段:シクロヘキサミド処理細胞
左側:赤色蛍光は細胞においてde novo合成されたペプチドを示す。
右側:それぞれの細胞の核染色
右側の核染色に対する左側の赤色シグナルの差により,タンパク質新生に起因することがわかる。
HeLa細胞
フローサイトメトリーによる分析
白線:ネガティブコントロール
青線:核のバックグラウンド(Fluorescence Azideのみ)
赤線:ポジティブコントロール(Protein Label)
緑線:シクロヘキサミド処理(検出:FL-2チャンネル)

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適用

  • タンパク質新生の検出
  • 細胞毒性を有する化合物によるタンパク質の発現または分解パターンの検出
  • 遺伝毒性のある化合物およびタンパク質合成の促進/阻害物質のスクリーニング

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特長

  • 測定方法:マイクロプレートを用いた蛍光測定,フローサイトメーター,蛍光顕微鏡
  • アッセイ数:100 assays

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測定原理

アルキンを含有する細胞透過性のピューロマイシンアナログのO-プロパギル-ピューロマイシン(OP-puro:O-Propargyl-puromycin)を用いた,新規かつ確実性の高い化学的手法により検出を行います。OP-puroが細胞内に入ると,新生したポリペプチド鎖と共有結合を形成することにより翻訳を停止させます。翻訳が停止したポリペプチドは,プロテアソームによって迅速に代謝されるため,蛍光アジドとのクリック反応に基づいて検出が可能になります。メチオニンアナログを用いた手法とは異なりOP-puroは,メチオニンフリーの条件が必要ないため,細胞培養中に新生したタンパク質を直接標識することができます。

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キット内容

  • EZClick wash buffer
  • Fixative solution
  • Permeabilization buffer
  • EZClick protein label
  • Copper reagent
  • EZClick fluorescent azide*
  • Reducing reagent
  • EZClick total DNA stain
  • Cycloheximide

キットにより内容は異なります。

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価格

[在庫・価格 :2018年11月20日 23時06分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。
詳細 商品名 商品コード メーカー 包装 価格 在庫 納期 文献数 リスト
EZClick Global Protein Synthesis Assay Kit
データシート
K467-100 BVNバイオビジョン
BioVision, Inc.
1 kit ¥88,000
(未発注)
10日程度  0 追加

説明文 測定波長:Fluorescence (Ex/Em= 494/521 nm),種交差性:Eukaryotes,測定試料:Adherent And Suspension Cells
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ

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K459-100 BVNバイオビジョン
BioVision, Inc.
1 kit ¥88,000
(未発注)
10日程度  0 追加

説明文 測定波長:Flow Cytometry (Ex/Em (488)/(440/490) nm) and Fluorescence Microscopy,種交差性:Eukaryotes,測定試料:Adherent And Suspension Cells
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ

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K715-100 BVNバイオビジョン
BioVision, Inc.
1 kit ¥98,000
(未発注)
10日程度  0 追加

説明文 測定波長:Flow Cytometry (Ex/Em (440/490)/(530/590) nm) and Fluorescence Microscopy,種交差性:Eukaryotes,測定試料:Adherent And Suspension Cells
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ

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[在庫・価格 :2018年11月20日 23時06分現在]

※ 納期として表示している期間は弊社発注日からの「目安」となり、納期を保証する物ではございません。実際には長くかかる場合もございます。ご注意ください。

EZClick Global Protein Synthesis Assay Kit

文献数:0


  • 商品コード:K467-100
  • メーカー:BVN
  • 包装:1kit
  • 価格: ¥88,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:10日程度 

説明文 測定波長:Fluorescence (Ex/Em= 494/521 nm),種交差性:Eukaryotes,測定試料:Adherent And Suspension Cells
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ

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文献数:0


  • 商品コード:K459-100
  • メーカー:BVN
  • 包装:1kit
  • 価格: ¥88,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:10日程度 

説明文 測定波長:Flow Cytometry (Ex/Em (488)/(440/490) nm) and Fluorescence Microscopy,種交差性:Eukaryotes,測定試料:Adherent And Suspension Cells
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ

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文献数:0


  • 商品コード:K715-100
  • メーカー:BVN
  • 包装:1kit
  • 価格: ¥98,000
  • 在庫:無(未発注)
  • 納期:10日程度 

説明文 測定波長:Flow Cytometry (Ex/Em (440/490)/(530/590) nm) and Fluorescence Microscopy,種交差性:Eukaryotes,測定試料:Adherent And Suspension Cells
法規制等
保存条件 法規備考
掲載カタログ

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reagent@funakoshi.co.jp

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