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DNA・RNAの1塩基変異をシングルセル、1分子レベルで検出可能 mutaFISH Probe

掲載日情報:2019/05/13 現在Webページ番号:68119

mutaFISH(mutation-specific Fluorescence in situ Hybridization)は、padlock probeとin situでのRCA(Rolling Cycle Amplification)法の組み合わせにより、組織・細胞試料中のDNA・RNAの変異検出を行う手法です。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

特長

  • DNAおよびRNAの1塩基変異をシングルセル、1分子レベルで検出でき、点変異やSNPの検出に有用です。
  • 組織切片、培養細胞、循環腫瘍細胞などからの検出が行えます。
  • dPCR(デジタルPCR)やNGS(次世代シークエンシング)よりも高感度です。
  • マルチプレックスアッセイや、他の解析法との併用が可能です。
  • DNAやRNAの抽出操作は不要です。

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使用例

培養細胞

培養細胞での検出
CytoQuest CRで捕捉したCWR22Rv1細胞(ヒト由来)をmutaFISHで検出した。
橙色:AR-V7(Cy3標識)、赤色:ARwt(Cy5標識)


CTC

循環腫瘍細胞(CTC)での検出
非小細胞肺がん(NSCLC)患者由来のCTCをmutaFISHで検出した。
橙色:EGFR L858R点変異(Cy3標識)、紫色:EGFR Ex19wt(Texas Red標識)、緑色:抗CSV抗体(FITC標識)でCTCの蛍光免疫染色


凍結組織

新鮮凍結組織切片での検出
ヒト肺腺がんの新鮮凍結組織切片をmutaFISHで検出した。
橙色:EGFR L858R点変異(Cy3標識)、赤色:EGFR L858wt(Cy5標識)、緑色:EGFR Ex19wt(Texas Red標識)


FFPE

ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織切片での検出
ヒト乳がんのFFPE組織切片をmutaFISHで検出した。
赤色:HER2(Cy5標識)


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操作方法概略

操作方法概略

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mutaFISH原理の動画



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mutaFISHおよび従来のFISHそれぞれの適用

適 用 mutaFISH FISHによる
DNA解析
FISHによる
RNA解析
点変異検出 × ×
コピー数異常検出
(増幅/欠損)
×
転座検出 ×
遺伝子発現解析 ×

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参考文献

  • "In situ mutation detection and visualization of intratumor heterogeneity for cancer research and diagnostics."
    Grundberg, I., et al., Oncotarget, 4 (12), 2407-2418 (2013)

  • "In situ detection and genotyping of individual mRNA molecules."
    Larsson, C., et al., Nat. Methods., 7 (5), 395-397 (2010)

  • "Lock and roll: single-molecule genotyping in situ using padlock probes and rolling-circle amplification."
    Nilsson, M., Histochem. Cell. Biol., 126 (2), 159-164 (2006)

  • "In situ genotyping individual DNA molecules by target-primed rolling-circle amplification of padlock probes."
    Larsson, C., et al., Nat. Methods., 1 (3), 227-232 (2004)

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価格

■ DNA検出用mutaFISH Probe

[在庫・価格 :2024年04月19日 20時55分現在]

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別名:C-K-RAS,K-RAS2A,K-RAS2B,K-RAS4A,K-RAS4B,KI-RAS,KRAS1,KRAS2,NS3,RASK2
Genbank No: 3845
法規制等
保存条件 -20℃ 法規備考
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mutaFISH MAMwt RNA Probes

文献数: 0

説明文 組織・細胞試料内のRNAの1塩基変異を高感度に検出するプローブ。検出にはmutaFISH RNA Accessory Kitが必要。
別名:MGB1,MGC71974,UGB2
Genbank No: 4250
法規制等
保存条件 法規備考
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mutaFISH PD-L1wt RNA Probes

文献数: 0

説明文 組織・細胞試料内のRNAの1塩基変異を高感度に検出するプローブ。検出にはmutaFISH RNA Accessory Kitが必要。
別名:B7-H,B7H1,MGC142294,MGC142296,PD-L1,PDCD1L1,PDCD1LG1,PDL1
Genbank No: 29126
法規制等
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mutaFISH PSAwt RNA Probes

文献数: 0

説明文 組織・細胞試料内のRNAの1塩基変異を高感度に検出するプローブ。検出にはmutaFISH RNA Accessory Kitが必要。
別名:APS,KLK2A1,PSA,hK3
Genbank No: 354
法規制等
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mutaFISH PSCAwt RNA Probes

文献数: 0

説明文 組織・細胞試料内のRNAの1塩基変異を高感度に検出するプローブ。検出にはmutaFISH RNA Accessory Kitが必要。
別名:PRO232
Genbank No: 8000
法規制等
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mutaFISH TERTwt RNA Probes

文献数: 0

説明文 組織・細胞試料内のRNAの1塩基変異を高感度に検出するプローブ。検出にはmutaFISH RNA Accessory Kitが必要。
別名:EST2,TCS1,TP2,TRT,hEST2
Genbank No: 7015
法規制等
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■ Accessory Kit

[在庫・価格 :2024年04月19日 20時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
mutaFISH DNA Accessory Kit 1 for Cell
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
mutaFISH法で組織・細胞試料内のDNAを検出する際に用いる酵素・バッファー類のセット。
法規制等
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mutaFISH DNA Accessory Kit 2 for Cell
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
mutaFISH法で組織・細胞試料内のDNAを検出する際に用いる酵素・バッファー類のセット。
法規制等
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mutaFISH RNA Accessory Kit
2~3週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
mutaFISH法で組織・細胞試料内のRNAを検出する際に用いる酵素・バッファー類のセット。
法規制等 医薬用外劇物
保存条件 4℃,-20℃ 法規備考
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[在庫・価格 :2024年04月19日 20時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

mutaFISH DNA Accessory Kit 1 for Cell

文献数: 0

説明文 mutaFISH法で組織・細胞試料内のDNAを検出する際に用いる酵素・バッファー類のセット。
法規制等
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mutaFISH DNA Accessory Kit 2 for Cell

文献数: 0

説明文 mutaFISH法で組織・細胞試料内のDNAを検出する際に用いる酵素・バッファー類のセット。
法規制等
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mutaFISH RNA Accessory Kit

文献数: 0

説明文 mutaFISH法で組織・細胞試料内のRNAを検出する際に用いる酵素・バッファー類のセット。
法規制等 医薬用外劇物
保存条件 4℃,-20℃ 法規備考
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■ 細胞染色試薬

[在庫・価格 :2024年04月19日 20時55分現在]

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詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Calcein AM
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
法規制等
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10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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Hoechst 33342
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 4
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Propidium Iodide
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
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[在庫・価格 :2024年04月19日 20時55分現在]

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Calcein AM

文献数: 0

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DAPI

文献数: 0

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文献数: 4

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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