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未反応の蛍光色素を迅速に除去できる磁気ビーズ MaGO Beads

掲載日情報:2017/11/20 現在Webページ番号:68025

芳香環を有し塩基性な蛍光色素や低分子色素を選択的に吸着する磁気ビーズです。タンパク質、抗体、核酸などの高分子と結合した蛍光色素は吸着しないため、高分子への蛍光色素反応の際に、未反応の蛍光色素の迅速な除去に特に有用です。

使用例動画

MaGO beadsによるNile Blueの吸着



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特長

  • トータルの操作時間はわずか3分間です。
  • ビーズはアガロースに酸化グラフェン(GO)および還元型酸化グラフェン(rGO)を添加したもので、磁性体のコアを有します。ビーズは多孔質構造を有しており、反応性表面が増大し、また反応物が多孔質中を流れる速度が加速する構造となっています。
  • 粒径:30~100μm
  • 磁性体の種類:超常磁性ナノ粒子
  • ビーズ容量:10% v/v gel
  • 溶媒:10% v/v エタノール含有水

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操作方法概略

タンパク質標識後の未反応の蛍光色素除去の場合

  1. MaGO beadsが入ったチューブをボルテックスで30秒撹拌する。
  2. 新しい1.5mlチューブに必要量のMaGO beadsを加える。
  3. チューブを磁気ビーズ用セパレーターにセットし、上清を除去する。
  4. チューブにタンパク質・蛍光色素反応液を加え、MaGO beadsを懸濁させる。
  5. チューブをボルテックスで5~10秒撹拌する。
  6. 撹拌後、直ちにチューブを磁気ビーズ用セパレーターにセットし、上清を回収する。
  7. 未反応の蛍光色素を吸着したMaGO beadsが入ったチューブは廃棄する。

磁気ビーズ用セパレーターなどは別途ご用意下さい。

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使用例

TAMRA標識抗体 TAMRA標識抗体2

図1:遊離(単独)のTAMRA およびTAMRA標識抗体について、MaGO beadsによる処理(5秒撹拌後、磁力的処理)前後のスペクトル解析を行った。
TAMRA標識抗体において、未反応のTAMRAは効果的に除去されているが、TAMRA標識抗体の減損はわずか(<10%)であった。
黒線:MaGO beads処理前、赤線:MaGO beads処理後。
解析試料: A、C:単独のTAMRA(TAMRA dye)。B、D:TAMRA標識抗体(IgG-TAMRA)。
解析法: A、B:UV-可視光領域の吸収スペクトル。C、D:TAMRAが発する蛍光スペクトル。

蛍光標識BSA 蛍光標識BSA2

図2:FITC標識BSA(BSA488)と他の色素の混合物を用いて、MaGO beadsによる処理(15秒撹拌後、磁力的処理)における遊離の色素への特異的吸着の確認を、UV-可視光領域の吸収スペクトル測定によって行った。

A:BSA488とRhodamine B isothiocyanate(RhB)の混合物を使用。
黒線:MaGO beads処理前、赤線:MaGO beads処理後。
紫線:Rhodamine B isothiocyanate単独、緑線:BSA488単独。

B:BSA488とMethylene Blueの混合物を使用。
黒線:MaGO beads処理前、赤線:MaGO beads処理後。

C:Bの処理後の光学顕微鏡によるMaGO beadsの観察。Methylene Blueのみが吸着していることが判る。

低分子色素 低分子色素2

色素名 含有グラフェン当りの
吸着容量(Qt:mg/gGO)
吸着速度
(t:min)
Nile Blue (NB, H2O) 989 1
Methylene Blue (MB) 622
Rhodamine 6G (Rh6G) 507
Crystal Violet (CV) 685

図3:芳香環および正電荷を有する各種低分子色素について、MaGO beadsによる処理(1分撹拌後、磁力的処理)前後のスペクトル解析を行った。
用いたすべての低分子色素について、含有グラフェン(GO)当りの吸着容量で高い値(Qt)、および非常に速い吸着速度(t)を示した。

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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