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遠心分離で高い効率、収量でペプチドを分画できます! GL-Tip SCX / GL-Tip SDB-SCX

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:67550

従来の塩濃度グラジエント法に変わる独自のTFAによるグラジエント法を用いたペプチド分画用チップカラムで、遠心分離により細胞抽出液などから高効率かつ高収量でペプチドの分画を行えます。チップカラムの先端部に陽イオン交換樹脂が充填されているGL-Tip SCXチップカラムと、スチレンビニルベンゼンポリマー(SDB)+陽イオン交換樹脂の2層構造で脱塩を同時に行えるGL-Tip SDB-SCXチップカラムがあります。

GL-Tip操作法

製品の種類

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品名GL-Tip SCXGL-Tip SDB-SCX
商品コード751011203751011202
ペプチド分画用樹脂陽イオン交換樹脂(SCX)スチレンジビニルベンゼンポリマー(SDB)
陽イオン交換樹脂(SCX)
機能ペプチド分画脱塩+ペプチド分画
包装96本
チップ容量200μl
試料負荷量60μg*
遠心分離条件3,000×g

* 負荷量はAngiotensinⅡを使用した場合の目安です。試料の最大試料負荷量は、マトリックスの状態により変化します。

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塩濃度グラジエント法とTFAグラジエント法の比較

ショットガンプロテオミクスにおいて、細胞抽出液などの複雑な試料を用いる場合には、陽イオン交換樹脂を用いた塩濃度グラジエントによるペプチド分画が同定数向上に用いられています。しかし、従来の塩濃度グラジエントによる溶出では、前後の画分にも同一のペプチドが混合することが多く、同一のペプチドを同定することによる効率の悪さがありました。今回塩濃度グラジエント法を改良した、より分画効率の高いTFAによるグラジエント法(特許出願済)を採用することによって、さらなるペプチド同定数の向上と効率化が期待できます。

比較

ヒト大腸がん樹立細胞DLD-1由来リン酸化ペプチドを用いて分画効率の比較を行った。TFAグラジエント法は同定数14,307個のペプチドが同定され、高効率であることが分かる。また、溶出液には重複するペプチドが少なく、効率の良い同定が可能であることが示された。
(国立研究開発法人医薬基盤・健康・栄養研究所 足立先生ご提供)


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特長

  • 分画効率の高いTFAによるグラジエント法(特許出願済)を採用しています。
  • ペプチド分画のみのGL-Tip SCXチップカラムと、脱塩処理を同時に行えるGL-Tip SDB-SCXチップカラムの2種類があります。

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定量ペプチド数の比較

ペプチド分画及び回収性能について、A社製チップカラムとの比較を実施した。各フラクションともA社製チップカラムと比較して多くのペプチドが回収でき、総ペプチド同定数でも良好な結果が得られた。本カラムとTFAフラクション法を用いることで各フラクションにおける重複が少なく、効率よくペプチドの同定が行えることが示された。

定量ペプチド数の比較

HeLa 細胞のトリプシン消化物 25μg分を各チップで分画し、回収量の40 %をLTQ-Orbitrap XLで測定した(45分グラジエント)。Maxquant 1.5.1.2, uniprot human database で解析した。

青■:GL-Tip SCX
赤■:A社製チップカラム

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品名包装商品コード製品概要
遠心アダプター24 pieces501021514GL-Tip SCX(#751011203)、GL-Tip SDB-SCX(#751011202)を廃液用チューブにセットする際に使用する専用アダプター。
遠心アダプター 96 Well Plate用1 piece501021341GL-Tip SCX(#751011203)、GL-Tip SDB-SCX(#751011202)を廃液用96ウェルプレートにセットする際に使用する専用アダプター。
2 pieces501021343

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価格

[在庫・価格 :2024年04月20日 20時55分現在]

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詳細 商品名
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GL-Tip SCX
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  • 商品コード:501021343
  • メーカー:GLI
  • 包装:2pieces
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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