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蛍光による生細胞内カスパーゼ活性測定キット SensoLyte 520 Fluorimetric Generic Caspase Assay Kit

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:6725

活性型カスパーゼに結合する蛍光標識阻害物質を利用して、生細胞内のカスパーゼ活性を定量するキットです。

カスパーゼとアポトーシス

カスパーゼはタンパク質分解酵素のファミリーで、細胞死を誘導する刺激によって活性化されます。活性化されたカスパーゼは様々なタンパク質を分解し、細胞をアポトーシスへと導きます。

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特長

  • 細胞内の活性型カスパーゼに、蛍光標識した膜透過性カスパーゼ阻害物質(FAM-VAD-FMK)を結合させ、その蛍光を測定することによってカスパーゼ活性を定量します。
  • 蛍光プレートリーダー、蛍光顕微鏡、フローサイトメーターで測定できます。
  • 染色から測定まで約2時間で終了します。
  • 測定波長:励起490 nm/蛍光520 nm

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操作方法概略

1. 細胞にアポトーシスを誘導する。

2.1.の細胞懸濁液にFAM-VAD-FMKを加え、遮光下で1時間インキュベートする。

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蛍光プレートリーダーで測定する場合

3. 細胞を洗浄して再懸濁し、一部を採取して細胞数をカウントする。

4. 96 wellの黒色プレートに分注し、蛍光強度を測定する。

5. 細胞数をもとに相対蛍光単位(RFU)を算出する。

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蛍光顕微鏡で測定する場合

3. 必要に応じてHoechst 33342(全細胞の核を染色、励起/蛍光波長:350 / 461 nm)およびpropidium iodide(死細胞の核を染色、励起/蛍光波長:535 / 617 nm)で染色する。

4. 細胞懸濁液をスライドグラスに採取して観察する(Fixative solutionを用いれば24時間固定可能)。

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使用例

Jurkat細胞にstaurosporinでアポトーシスを誘導したのち測定した

Jurkat細胞にstaurosporinでアポトーシスを誘導したのち、本キットのFAM-VAD-FMKを添加してプレートリーダーで蛍光を測定した。DMSOはstaurosporin処理のコントロール。
縦軸:細胞数あたりの相対蛍光単位(RFU/Cell No.)

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キット内容

  • FAM-VAD-FMK reagent
  • DMSO
  • PBS
  • Hoechst 33342 solution
  • Propidium iodide solution
  • Fixative solution

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価格

[在庫・価格 :2024年04月29日 16時15分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
  • 商品コード
  • メーカー
  • 包装
  • 価格
  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
Generic Caspase Assay Kit, Fluorimetric, SensoLyte 520 (100assays)
中止
本製品は取扱中止になりました 0
説明文
法規制等 医薬用外劇物
保存条件 法規備考
掲載カタログ

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Generic Caspase Assay Kit, Fluorimetric, SensoLyte 520 (100assays)

文献数: 0

  • 商品コード:AS-72211
  • メーカー:ANA
  • 包装:1kit
  • 本製品は取扱中止になりました

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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アポトーシス誘導/阻害物質