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メーカー：	Horizon社Dharmacon製品 OriGene Technologies TransOMIC Technologies
	Horizon社Dharmacon製品(メーカー略称：DHA)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら OriGene Technologies社(メーカー略称：ORI)のTrueClone / TrueORF / TrueORF Gold cDNAクローンなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら TransOMIC Technologies社(メーカー略称：TOT)のRNAiコレクション，cDNAコレクション，Yeastコレクションなど，遺伝子機能研究に有用な遺伝子リソースを検索することができます。クローンコレクション検索の使い方はこちら
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お手持ちのリポソームでオリゴ核酸の内包検討を行えますオリゴ核酸内包専用溶液

掲載日情報：2019/05/08 現在Webページ番号：65875

ヒュギエイアバイオサイエンス /
ヒュギエイアバイオサイエンス（片山化学工業（株））
[メーカー略称：HYG]

オリゴ核酸のアニオン性リポソーム内包の検討が簡単に行える試薬です。オリゴ核酸 DDS の評価に有用です。

※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

特長
Lipocapsulater FD-U PL（不飽和タイプ）を使った使用例
価格

特長

お手持ちのリポソームでオリゴ核酸の内包検討が可能です*1。
通常の調製方法よりも、高効率で内包が可能です*1。
薬剤内包検討用リポソームカプセル化キット『Lipocapsulater』を使用した場合、リポソームの外から核酸を内包化することができるため、リポソームの調製が不要です。

*1核酸の長さやリポソームの脂質組成によって変わります。

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Lipocapsulater FD-U PL（不飽和タイプ）を使った使用例

※本使用方法はあくまでも一例であり、核酸の内包を保証するものではございません。使用する核酸の種類やサイズ、リポソームの脂質組成によっては凝集が発生する場合や内包化が難しい場合がございます。
※Lipocapsulater FD-U PL（不飽和タイプ）についてはこちらをご覧下さい。

Step 1　オリゴ核酸内包化

Lipocapsulater FD-U PLにsiRNA 100μg/500μlを添加し、転倒混和でリポソームを再水和する。
再水和したリポソーム溶液をボルテックスで撹拌しながら、核酸内包専用溶液（750μl）をゆっくりと滴下する（撹拌時にリポソーム溶液がこぼれる場合がありますので、大きめのチューブなどに移して実施することをお勧めします）。
滴下後、数秒間ボルテックスで撹拌を続けて調製完了。

Step 2　未内包のオリゴ核酸除去

Step1で調製したリポソーム溶液を緩衝液にて限外ろ過を行う*2, 3。

限外ろ過後、リポソームを1 mlで回収し0.45μmフィルターおよび0.22μmフィルターろ過にて滅菌処理を行う。

*2分画分子量300 kDaの遠心式限外ろ過ユニットや透析膜を用いて除去が可能。
*3限外ろ過に用いる緩衝液は実験系に合わせてお選び下さい。

調製したリポソームの物性確認

脂質濃度*4	回収 siRNA 量*5	内包率*6	平均粒子径	PDI	ゼータ電位
9.0 mg/ml	46.7μg	0.47	166 nm	0.187	-27 mV

*4 脂質濃度は酵素法にてコレステロールを定量し総脂質量に換算（本製品には 1 vialあたり10 mgの脂質が含まれています）
*5 界面活性剤(TritonX-100)によりリポソームの破壊を行い Quant-iT™ RiboGreen® RNA Reagent and Kit (Thermo Fisher Scientific社) を用いて定量
*6 添加および回収したsiRNA量より内包率を算出

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