電子伝達系からATP合成まで、ミトコンドリア機能を多角的に解析 ミトコンドリア機能解析・毒性評価に有用な研究用試薬

Cayman Chemical社ではミトコンドリア呼吸鎖ComplexⅠ～Ⅳ、ATP synthase（ComplexⅤ）、アンカップリング、ADP/ATP輸送、ミトコンドリア分裂など、ミトコンドリア機能に関わる各種阻害物質をラインナップしています。ミトコンドリア毒性評価、OCR/ECAR解析、酸化的リン酸化の解析、化合物スクリーニングにおけるポジティブコントロールや作用機序解析に有用です。

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

電子伝達系阻害物質は、ミトコンドリア呼吸鎖ComplexⅠ～Ⅳなどに作用し、電子伝達、プロトン勾配形成、酸素消費、ATP産生に影響を与える化合物です。OCR解析、ミトコンドリア毒性評価、電子伝達系阻害の解析用プローブやコントロール化合物として使用されます。

ATP合成阻害物質は、ミトコンドリアATP synthase（ComplexⅤ）を阻害し、酸化的リン酸化によるATP産生を抑制する化合物です。OCR/ECAR解析やミトコンドリア毒性評価では、ATP産生に関わる酸素消費を評価するための既知阻害物質として用いられます。

その他のミトコンドリア阻害物質として、ADP/ATP translocase、ミトコンドリアNa⁺/Ca²⁺ exchanger（NCLX）、UCP2、ミトコンドリア分裂に関わる因子などを標的とする化合物があります。ミトコンドリア膜機能、Ca²⁺制御、エネルギー代謝、ROS産生など、ミトコンドリア機能の多面的な解析に有用です。

ミトコンドリア機能への影響は、単一化合物だけでなく、化合物ライブラリーを用いたスクリーニングでも評価することができます。Cayman Chemical社のメーカー資料「Screening a Kinase Inhibitor Library for Mitochondrial Dysfunction」では、Kinase Screening Library（#10505）を用いてヒト肝がん細胞株（Huh7）を処理し、OCR（酸素消費速度）およびECAR（細胞外酸性化速度）への影響を解析した例が紹介されています。

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Screening a Kinase Inhibitor Library for Mitochondrial Dysfunction
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OCR/ECAR解析は、細胞の酸素消費速度（OCR）と細胞外酸性化速度（ECAR）を測定することで、ミトコンドリア呼吸や解糖系への影響を評価する方法です。Rotenone、Oligomycin、FCCPなどの既知のミトコンドリア機能調節物質をコントロールとして用いることで、酸化的リン酸化やミトコンドリア呼吸への影響を確認できます。

OCR/ECAR解析などでミトコンドリア機能への影響が示唆された場合、MitoCheck Complex Activity Assay Kitシリーズを用いて、単離ミトコンドリアにおける電子伝達系（ETC）機能への影響や阻害部位をさらに解析できます。ComplexⅠ、ComplexⅡ、ComplexⅡ/Ⅲ、ComplexⅣ、ComplexⅤに対応したキットがあり、電子伝達系Complexごとの酵素活性を測定することで、化合物が電子伝達系のどの段階に影響しているかをより詳しく確認できます。

各キットは96ウェル比色フォーマットで、単離ウシ心臓ミトコンドリアが付属しており、抗体とのプレインキュベーションを必要としません。電子伝達系阻害物質のスクリーニングやミトコンドリア毒性評価に適しています。

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