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QRFP-26RFa (human) ELISA kit（Bertin Bioreagent社）
インスリン分泌阻害、食欲促進作用を示すヒト神経ペプチドQRFP-26RFa定量キット QRFP-26RFa (human) ELISA kit（Bertin Bioreagent社）
掲載日情報：2020/02/07 現在Webページ番号：65746
ヒト血漿中のQRFP-26RFaを、アセチルコリンエステラーゼ(AChE, Acetylcholineesterase）トレーサーを用いた競合法により比色定量するELISAキットです。
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検量線例
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QRFP-26RFaとは
QRFP-26RFaは、RFamidesファミリーの26アミノ酸（C末端にアルギニンとアミド化フェニルアラニンモチーフを有する）の神経ペプチドです1。QRFP-26RFaは、2003年にヨーロッパアオガエルの脳で発見されました1。その後、26RFaは、ヒト、ラット、ニワトリなどの多くの種で解析が行われました2。ペプチド構造解析では、GPR1034と呼ばれるレセプターとの相互作用に用いられる両親媒性αヘリックスが中央ドメイン中に存在することが示されました3。
QRFP-26RFaは、主に視床下部や、脳幹、脊髄の外側角のようないくつかの末梢組織で生成されます5。マウスのin vivoにおける研究において、QRFP-26RFaは、NPY／プロオピオメラノコルチン系に対する作用6、およびグルコース誘発インスリン分泌阻害7により、食欲促進ペプチドであることが示されました。QRFP-26RFaは、高脂肪食の調節、および肥満者の脂肪細胞の脂肪分解に作用します8。また、26RFaの睡眠8および血圧6の調節における関連性についても研究されています。
参考文献
- Chartrel, N, et al., Frontiers in Neuroendocrinology, 32, 387～397 (2011).
- Thuau, R., et al., Peptides, 26, 779～789 (2005).
- Jiang F.Y., et al., J. Biol. Chem., 278, 27652～27657 (2003).
- Bruzzone, F., et al., J. Neurochem., 99, 616～627 (20060).
- takayasu, S., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103, 7438～7443 (2006).
- Egido, E.M., et al., Peptides, 28, 725～730 (2007).
- Prevost, G., et al., Diabetes., 64, 2805～2816/DOI:10.2337/db14-1864 (2015).
- Mulumba, M., et al., Mol. Endocrinol., 24, 1615～1625 (2010).
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MEMO アセチルコリンエステラーゼ（AChE, Acetylcholinesterase）標識のメリット
Bertin Bioreagent社のELISAキットでは、主に酵素標識としてアセチルコリンエステラーゼ（AChE, Acetylcholinesterase）による方法が採用されています。AChEアッセイは、基質としてアセチルチオコリンを含むエルマン試薬を使用して発色させます。この酵素反応最終生産物（5-チオ-2-ニトロ安息香酸）は405～414 nmに吸収極大を持つ明るい黄色化合物です。AChEは、ELISA法で用いられる他の酵素に比べて以下のような長所を有しています。
- AChEは、64,000 sec-1の代謝回転で真の一次速度を示すため、他の標識酵素に比べてカイネティック測定に適し、また高い感度が得られます。
- HRP（Horse Radish Peroxidase）やAP（Alkaline phosphatase）の約3倍の代謝回転速度に相当します。
- バッファー中のアセチルコリンの非酵素的加水分解は本質的に起こらないため、低バックグラウンドでアッセイを行うことができます。
- 高感度かつ低バックグラウンドにより、ELISAキットの測定に求められる高いS/N比を実現しています。
- AChEは安定性に優れた酵素であり、その酵素活性は長時間維持されます。そのため、広いダイナミックレンジが得られます。
- AChEは安定した酵素であり、その活性は長時間にわたって一定であるため、低～高濃度の試料の同時分析が可能です。
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測定原理
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特長
- キットには、回収率算出用のQC controlが含まれています。
- 測定試料：血漿（EDTA-K3、C18 SEPカラム処理）
- 必要試料量：50μl
- 測定原理：競合ELISA法
- フォーマット：96-wellプレート
- 測定方法：比色
- 測定波長：405～414 nm
- 測定範囲：0.10～12.50 pg/ml
- 検出限界：0.07 ng/ml
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操作方法概略
| ELISAワークフロー概略 | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Blank | NSB | B0 | Standard | QC | Sample | |
| Bufferの添加 | － | 100μl | 50μl | － | － | － |
| Standardの添加 | － | － | － | 50μl | － | － |
| QCの添加 | － | － | － | － | 50μl | － |
| Sampleの添加 | － | － | － | － | － | 50μl |
| Tracerの添加 | － | 50μl | ||||
| Antiserumの添加 | － | － | 50μl | |||
| プレートにカバーし、室温下、20時間インキュベートする。 | ||||||
| ストリップを300μl/wellのWash bufferで5回洗浄し、ウェルの中の液を廃棄する。 | ||||||
| Ellman's reagentの添加 | 200μl | |||||
| 室温、暗所下で、オービタルシェーカー300rpmで撹拌しながらインキュベートする。 | ||||||
| OD 405～414 nmを測定する。 | ||||||
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キット内容
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交差性
| Mouse/Rat QRFP-26RFa | 10.0％ | Human QRFP-43RFa | 37.3％ | Mouse/Rat QRFP-43RFa | 2.6％ |
|---|
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価格
[在庫・価格 ：2025年04月26日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
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QRFP-26RFa (human) EIA kit |
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[在庫・価格 ：2025年04月26日 00時00分現在]
QRFP-26RFa (human) EIA kit
文献数： 0
- 商品コード：A05037
- メーカー：SPB
- 包装：1kit
- 価格：¥111,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | 種交差性：Human，測定試料：Plasma，測定試料量：50 µL，検出限界：0,07 ng/mL，測定範囲：0,10-12,50 ng/mL |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 | |||
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