Twin-Strep-tagを用いた優れたタンパク質精製システム Strep-Tactin XT システム

• 特長
• 適用
• 使用例
• Strep-Tactin XTとは
• Twin-Strep-tagの発現
• 製品ラインナップ
• Strep-Tactin XT 4Flow Starter Kit
• 操作方法概略
• 関連製品

特長

• 従来のStrep-Tactinによるタンパク質精製における高純度精製（>95%）、生理学的バッファーの使用、緩和な条件での溶出および樹脂再生可能などの特長はそのままで、より高い収率でタンパク質が得られます。
• Twin-Strep-tagまたはStrept-tag Ⅱタグ付きタンパク質のビオチン添加による溶出後に、Buffer XT-R（#2-1045-250、下記Starter Kitにも付属）またはNaOHで樹脂の再生（3～5回）が可能です。
• Strep-Tactin XT Systemを用いたタンパク質精製に必要な試薬がすべて含まれた☞ Starter Kitがあります。

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適用

• メタロプロテイン
• 膜タンパク質
• 低含有率のタンパク質（Strep-Tactin XTとの併用により可能）
• 複数のサブユニットを有するタンパク質複合体
• 生物学的活性を有するタンパク質

システム		Strep-Tactin XT（本製品）		Strep-Tactin（旧製品）
tag		Twin-Strep-tag	Strep-tag Ⅱ	Twin-Strep-tag	Strep-tag Ⅱ
精製	濃縮物 （サイトゾル）	✔	✔	✔	✔
	希釈物 （分泌）	✔✔	✔✔	✔	△
	バッチ法（磁性ビーズ）	✔✔	△	△	×
検出（Western, ELISA）		✔✔	✔✔	✔	✔
アッセイ／固定相（MTP, chips） 溶出オプションを含む		✔✔	△	△	×

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使用例

SDS-PAGEによるタンパク質の精製法の違いの影響の検証

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Strep-Tactin XTとは

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Twin-Strep-tagの発現

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製品ラインナップ

Strep-Tactin XT		Strep-Tactin XT
		4Flow high capacity	4Flow
粒径		50～150μm球状
pH安定性		4～10
タンパク質結合能		14 mg/ml resin	5 mg/ml resin
対応可能なタンパク質サイズ		小～大
低含量のタンパク質収量		優
高分子タンパク質収量		5倍増
分離困難なタンパク質との適合性		完全に適合
形状		50%懸濁液
適用		Strep-tag Ⅱ and Twin-Strep-tag 結合タンパク質の精製
特異性		Twin-Strep-Tag、Strep-tag Ⅱ
担体		4%アガロース架橋
製品の種類	包装	商品コード
Resin	4 ml	2-5030-002	2-5010-002
	20 ml	2-5030-010	2-5010-010
	50 ml	2-5030-025	2-5010-025
Cartridge （HPLC / FPLC）	1 ml	2-5027-001	2-5023-001
	5 ml	2-5028-001	2-5024-001
Column （重力法）	5 × 0.2 ml	2-5031-005	2-5011-005
	1 ml	2-5032-001	2-5012-001
	5 ml	2-5033-001	2-5013-001
	10 ml	2-5034-001	2-5014-001
Starter Kit	1 Kit	－	2-5998-000

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Strep-Tactin XT 4Flow Starter Kit

キット内容

• Strep-Tactin XT 4Flow column（Protein purification of Strep tagⅡ and Twin-Strep-tag proteins by gravity flow. ）
• Buffer W (Ready-to-use wash buffer)
• Buffer BXT (Ready-to-use elution buffer)
• Buffer XT-R (Ready-to-use regeneration buffer)
• Strep-Tactin with HRP (conjugated for western blot detection)

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操作方法概略

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関連製品

Strep-Tactin XT coated microplate（#2-5101-001）

使用例

製品概略

品名	包装	商品コード	特長
Strep-Tactin XT coated microplate 図をクリックすると拡大します（🔍）	1 plate	2-5101-001	結合能力：4 pmol/well（200 μlインキュベーション容量）* コーティング液量：250～260 μl 1ウェル当たりの最大液量：300 μl 最適pH：8

測定方法の例（ELISAの場合）

1. タンパク質希釈液（必要に応じて3% BSAを添加することができる）をStrep-Tactin XT coated microplateに直接加える。
2. 室温で1～2時間インキュベートする。
3. プレートを洗浄後、メーカー推奨の方法で検出試薬を加えてインキュベートし発色させ、プレートリーダーにより測定する。

その他の関連製品

品名	包装	商品コード	製品概要
Avidin	50 mg	2-0204-050	遊離ビオチンを含む増殖培地を使用する場合などで、Strep-tagタンパク質精製中にビオチンとビオチン化タンパク質がStrep-Tactinカラムに結合するのを防止します。
Anhydrotetracycline	25 mg	2-0401-002	tetプロモーター制御のpASKおよびpASG-IBAベクターの誘導に使用します。Strep-tag / Strept-Tactin大腸菌発現カセットは、tet Aプロモーター／オペレーターおよびリプレッサーの転写制御下にあります。プロモーターは低濃度のアンヒドロテトラサイクリン（AHT）によって誘導されるため、コスト低減やAHTの抗菌力の影響を最小化できます。
Biotin	2 g	2-1016-002	Streptavidin、Strep-Tactin、Sterp-Tactin XTと非常に強く結合するため、これらのタグ付きタンパク質の溶出に用いられます。
	5 g	2-1016-005
Buffer BXT	25 ml	2-1042-025	ビオチンを含むStrep-Tactin XT溶出バッファー（×10 concentrated）です。
Buffer XT-R	250 ml	2-1045-250	Strep-Tactin XTのカラム再生に用いる試薬です。 ※ Strep-Tactinの再生には使用できません。
MagStrep Strep-Tactin XT beads	2 ml	2-5090-002	Strep-Tactin XTでコーティングされた磁気ビーズ（5%（v/v）懸濁液）です。本製品は、非特異的タンパク質結合性と高い結合能を併せ持っています。そのため、タンパク質の機能性の必要がない場合には、ビオチンの代わりに変性SDSゲルローディングバッファー中で煮沸することにより溶出が可能です。天然型タンパク質の溶出には、BXT-biotin elution buffer（#2-1042-025）を使用して下さい。 ※本製品の詳細についてはこちらをご覧下さい。
	10 ml	2-5090-010
Magnetic Separator	1 piece	2-1602-000	MagStrep type3 XTビーズ（Strep-Tactin XTをコーティングした磁気ビーズ）用のマグネチックセパレーターです。Strep-tagタンパク質をバッチで迅速に精製できます（24反応チューブ用、12×1.5 mlおよび12×2 ml）。標的分子はStrep-Tactin XTに数分以内に特異的に結合します。磁気ビーズは、磁気分離器を使用することにより、溶液から数秒以内に分離できます。
Strep-tag Ⅱ peptide	1.8 mg	2-1018-002	Strep-Tactinに結合する合成ペプチドです。目的に応じて、使用されることがあります。
Buffer W（10×）	100 ml	2-1003-100	Strep-tagタンパク質精製中において、固定化Strep-TactinおよびStrep-Tactin XTから非結合分子を洗浄除去に使用します。
WET FRED Set	1 set （1 ml用）	2-0911-001	すべてのStrep-Tactinおよび Strep-Tactin XT gravity flow columnと互換性があります。
	1 set （5～10 ml用）	2-0910-001

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