細胞外小胞（EV）の粒子径などのより正確な測定に ExoGlow-NTA Fluorescent Labeling Kit
掲載日情報：2018/09/11 現在Webページ番号：65647
細胞外小胞（EV）を蛍光標識する製品です。本製品で蛍光標識したEVを蛍光NTAで解析することにより、EVの粒子径や粒度分布をより正確に測定できます。
本キットでエクソソーム表面に蛍光染色することで、夾雑物の測定を防ぎインタクトなエクソソームを検出することが可能になります。
必要な装置（Nanosightおよび488 nmレーザー）をお持ちでないお客様には、受託サービスもございます。
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本製品でEVを蛍光標識する利点
蛍光を用いない従来法NTA（ナノ粒子トラッキング解析法）では、膜フラグメント、タンパク質凝集物、そのほかのバックグラウンドとなる粒子によるデータも取得してしまいます。
インタクトなEV 膜に特異的に結合する‘ExoGlow-NTA Dye’（本製品に付属）で標識したEV を蛍光NTA で測定すれば、非特異的な結果が排除でき、シグナル／ノイズ比の高いデータを得ることができます。
図をクリックすると拡大します（
）
ExoGlow-NTA色素は、インタクトな EV膜にのみ結合します。溶液中のすべての粒子データを収集する従来の光散乱に基づくNTAとは異なり、蛍光モードを用いることで、蛍光標識されたEVが選択的に検出され、その粒子から得られたデータのみが報告されます。
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比較例
EpiQuick、超遠心分離／洗浄、およびカラム法を用いて血清タンパク質よりEVを単離し、従来のNTA測定法とExoGlow-NTA Fluorescent Labeling Kitを用いて各試料中のEVの測定を行った。従来のNTA測定法では、EV単離法に関わらずEV濃度の過大測定結果が得られたが、ExoGlow-NTA Fluorescent Labeling Kitを用いた場合は、より正確なEV濃度の測定結果が得られた。
- A：ExoQuickでEV単離（10 μg血清タンパク質）
- B：超遠心分離／洗浄でEV単離（1 μg血清タンパク質）
- C：カラム法でEV単離（1 μg血清タンパク質）
NanoSight用キット（#EXONTA200A-1）使用
ZetaView®用キット（#EXONTA110A-1）使用
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特長
- EVを特異的に標識することにより、蛍光NTAによる定量を可能にした唯一の市販キットです。
- Reaction buffer とEV 試料を混合し、インキュベートするだけで標識できます。
- 水またはPBS中では蛍光を発しませんが、EVとの結合により強い蛍光を発します。
- EVに特異的な独自の染料を用いることで、高いS/N比を得られます。
- ExoQuick、超遠心分離およびカラムによるEV単離方法を用いて検証を行っています（上図参照）。
- 20～30分で試料の単離から分析までの操作が完了します。
- 使用回数：10 reactions
- NanoSight（Malvern 社）用のキットとZetaView®（ParticleMetrix 社）用のキットがあります。
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操作方法概略
- Reaction bufferとLabeling dyeを滅菌済みエッペンドルフチューブに加え、色素が完全に溶解するまでよく混合し、Labeling reaction bufferを調製する。
- EV（1～100 μg）をLabeling reaction bufferに加え、0.02 μmフィルターろ過済みのPBSを加えて反応液量を50 μlとする。内部標準を標識する場合、1 μlの標準液をLabeling reaction bufferに加える。
試薬 NanoSight用 ZetaView用 試料 内部標準 試料 内部標準 Reaction buffer 12 μl 12 μl Labeling dye 4 μl 2 μl EVs (1～100 μg) X μl － X μl － Standards － 1 μl － 1 μl フィルター滅菌水または1×PBS 液量を50 μlにする - 試料をよく混合し、室温、遮光下でチューブを回転させずに静置して3～5分間インキュベートする。
- Size exclusion columnを用いて未反応のdyeを除去する（NanoSight用キットのみ）。
- 試料を蛍光NTA分析に使用する。
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使用例
光散乱モードおよび蛍光モードによるExoGlow-NTA標識リポソームの測定
光散乱モードおよび蛍光モードで得られたデータの高い一致により、ExoGlow-NTA色素の標識効率およびEVを特徴付ける蛍光NTA方法の精度が実証された。
ExoGlow-NTAはバックグラウンドシグナルを検出しない
従来のNTA測定法とExoGlow-NTA Fluorescent labeling Kitを用いた蛍光NTA測定法を用いて、EVが存在しない試料のバックグラウンドシグナルを粒子数で分析した。EV非存在下では、ExoGlow-NTA Fluorescent labeling Kitは、偏りなく自己蛍光を検出しなかった。
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キット内容
- Reaction buffer
- Labeling dye
- Internal standards
- Size exclusion column（#EXONTA200A-1のみ）
※ 測定には、488 nmレーザーを装備したNanoSight NTA System（モデルLM10、NS300など）、または520 nmレーザーを装備したParticle Metrix ZetaView®（モデルPMX120）が必要です。
必要装置をお持ちでないお客様には、受託サービスもございます。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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ExoGlow-NTA Fluorescent Labeling Kit(for Malvern NanoSight), 10reactions |
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ExoGlow-NTA Fluorescent Labeling Kit(for Particle Metrix ZetaView), 10reactions |
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[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
ExoGlow-NTA Fluorescent Labeling Kit(for Malvern NanoSight), 10reactions
文献数： 0
- 商品コード：EXONTA200A-1
- メーカー：SBI
- 包装：1kit
- 価格：¥90,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年10月15日号 p.20
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| 製品記事 |
エクソソーム（Exosome）研究用製品特集 |
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| 関連記事 | |||
ExoGlow-NTA Fluorescent Labeling Kit(for Particle Metrix ZetaView), 10reactions
文献数： 0
- 商品コード：EXONTA110A-1
- メーカー：SBI
- 包装：1kit
- 価格：¥90,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：10日程度 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 4℃ | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
ニュース2022年10月15日号 p.20
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| 製品記事 |
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