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gRNAをCas9ベクターへクローニングするキット High-Efficiency gRNA-Cas9 Plasmid Assembly Kitシリーズ

掲載日情報:2017/04/28 現在Webページ番号:65595

Cas9ベクターにgRNAを簡便、迅速かつ高効率にクローニングするキットです。
ガイドRNAは、自殺レポーター遺伝子(suicide gene)領域に挿入されるよう設計されています。これによりほぼ100%の陽性クローンが得られるために、スクリーニングは不要です。Cas9は、自己切断ペプチド2Aを介してPuroまたはGFPレポーター遺伝子と結合されており、Cas9とは別に発現されるためにCas9活性の低下を防止できます。

シリーズの種類

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

品名 商品コード Cas9ベクター*     insert gRNA    gRNA-Cas9発現プラスミド
High-Efficiency
gRNA-Cas9-GFP
Plasmid (linear) Assembly Kit
L00690 Cas9-GFP Plasmid
High-Efficiency
gRNA-Cas9-GFP
Plasmid Assembly Kit
L00692
High-Efficiency
gRNA-Cas9-Puro
Plasmid (linear) Assembly Kit
L00691 Cas9-GFP Plasmid
High-Efficiency
gRNA-Cas9-Puro
Plasmid Assembly Kit
L00693

* キットに含まれています。

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特長

  • 2つのプライマーのみ必要で、また制限酵素による消化*およびライゲーションも1回の反応で済むため、操作が簡便です。
  • 高フィデリティーのため変異を生じません。
  • 30分以内でgRNA-Cas9プラスミド構築が完了します。
  • キットにはコントロール用のgRNA insert、gRNA primer F、Screening primer Rが含まれています。
  • 使用回数:10または25 reactions

* Linear Assembly Kit(#L00690または#L00691)を用いた場合には、制限酵素による消化および精製工程が省略でき、より短時間で目的のgRNA-Cas9陽性クローンが得られます。

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gRNA標的配列に特異的なPrimer(gRNA-F / gRNA-R)のデザイン

Forward primer(gRNA-F) CACC + N19-21 (gRNA target sequences)
Reverse primer(gRNA-R) AAAC + N19-21 (gRNA Reverse complementary sequence)

(例)標的gRNA配列:CATCATTGGAAGACGTTCTTの場合

Forward primer gRNA-F:CACCCATCATTGGAAGACGTTCTT
Reverse primer gRNA-R:AAACAAGAACGTCTTCCAATGATG

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作製したgRNA-Cas9プラスミドと各種コンピテントセルとの互換性

DH5α, stbl2, stbl3, EPI300, EPI400, JM108, ER2925, DH10B-N
不適 Top10, XL1-Blue, SURE2

上表のまたは不適のコンピテントセルは一例です。

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キット内容

商品コードをクリックすると価格表をご覧いただけます。

品名 High-Efficiency gRNA-Cas9 Plasmid Assembly Kit
gRNA-Cas9-GFP (linear) gRNA-Cas9-GFP gRNA-Cas9-Puro (linear) gRNA-Cas9-Puro
商品コード L00690 L00692 L00691 L00693
キット
内容
Linearized Cas9-GFP Vector
Cas9-GFP Vector
Linearized Cas9-Puro Vector
Cas9-Puro Vector
Control gRNA insert
Control gRNA primer F
Control Screening primer R

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価格

[在庫・価格 :2024年04月24日 00時00分現在]

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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