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ヒト/マウスT細胞を容易に活性化/増殖できます CD3/CD28 Streptamer Kit for T Cell Expansion

掲載日情報:2022/04/04 現在Webページ番号:65578

Streptamer技術を用いて作製した、CD3およびCD28のそれぞれに対して特異的なFab-Strepを結合したStrep-Tactin multimer(多量体)です。CD3およびCD28を発現しているT細胞に可逆的に結合することにより、活性化/増殖、および停止を行うことができます。ビオチン(#6-6325-001)の添加によって結合したStrep-Tactin multimerを細胞から除去することができます。

CD3/CD28 Streptamer Kitの外観

CD3/CD28 Streptamer Kit(#6-8900-050)の外観

CD3/CD28 Streptamerとは

安定したT細胞活性化複合体を生成するために、CD3およびCD28のそれぞれに対するFabフラグメントとTwin-Strep-tagを融合したFab-Strepsを作製し、次にそれらをStrep-Tactin multimerと結合させて可溶性CD3/CD28 Streptamerを生成します。

Fab-Strepsは、標的に対して低い親和性しか持たないため、Strep-TactinとのFab-Strepsの多量体化が必要となります。したがって、親和性が十分に高まった時にT細胞へ安定して結合します。単量体のFab-StrepsではT細胞を効率的に活性化することができないため、Strep-Tactin上のFab-Streps多量体だけがT細胞を効率的に活性化する可溶性の複合体となります。

Fab-Strepsの構造

Fab-Strep:Twin-Strep-Tagに融合させた表面マーカーに特異的なFabフラグメント(Fab)

Strep-Tactin multimer

CD3/CD28 Streptamer:Fab-StrepとStrep-Tactin multimerが結合した多量体


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T細胞の活性化/増殖の原理

CD3およびCD28に対するTwin-Strep-tag(Fab-Streps)に融合した低親和性のFabフラグメントは、Strep-Tactin multimer上で多量体化されます。得られたCD3/CD28 Streptamer複合体は、T細胞レセプター/CD3複合体(TCR/CD3; signal 1)と共刺激分子CD28(signal 2)を刺激します。この2つのシグナルを与えることで、効率的なT細胞の活性化と増殖が可能になります。in vitroでの刺激・活性化には、可溶性のCD3/CD28 StreptamersをT細胞に添加します。FabフラグメントとCD3およびCD28との親和性は低いため、親和性のより高いビオチンを添加することによりT細胞から解離させることができます。その結果、どの時点でも刺激の終了が可能となります。

Strep-Tactin multimer
  1. CD3 Fab-StrepsおよびCD28 Fab-StrepsをStrep-Tactin multimerと結合させる。
  2. 生成した可溶性CD3/CD28 Streptamer複合体。
  3. 可溶性CD3/CD28 Streptamer複合体はT細胞に結合し、活性化/増殖させる。
  4. ビオチンを添加するとFab-Strepが解離するため、刺激を中止できる。

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特長

  • Strep-Tactin multimerとCD3 Fab-StrepsおよびCD28 Fab-Strepsの多量体化によって生成された非磁性可溶性タンパク質複合体です。
  • 抗原提示細胞(APC)または抗原を必要とせずに、T細胞を容易に活性化できます。
  • 可逆的な試薬のため、ビオチンの添加によって細胞から解離することができ、刺激/増殖、および終了を厳密に制御することができます。
  • 計5×107のT細胞またはPBMCの刺激/増殖に用いることができます。

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キット内容

  • CD3 Fab-Strep, human
  • CD28 Fab-Strep, human
  • Strep-Tactin multimer
  • Biotin stock solution

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価格

[在庫・価格 :2024年04月20日 00時00分現在]

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CD3/CD28 Streptamer Kit, human
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CD3/CD28 Streptamer Kit, human

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  • 商品コード:6-8900-050
  • メーカー:IBA
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CD3/CD28 Streptamer Kit, mouse (for 5 x 107 total cells)

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  • 商品コード:6-8920-050
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関連製品

商品コード 品名 製品概要
6-6325-001 Biotin Stock Solution 細胞からStreptamer試薬を解離する(刺激/増殖を終了する)ためのビオチンストック溶液。
6-8000-101 CD3 Fab-TACS, Magnetic Microbead Starter Kit, Human* CD3抗原を発現するT細胞を選択的に分離するキット。
6-8000-106 CD4 Fab-TACS, Magnetic Microbead Starter Kit, Human* CD4抗原を発現するT細胞を選択的に分離するキット。
6-8000-103 CD8 Fab-TACS, Magnetic Microbead Starter Kit, Human* CD8抗原を発現するT細胞を選択的に分離するキット。
6-5650-065 StrepMan magnet* Fab Streptamer Magnetic T Cell Isolation Kitと共に使用し、細胞表面に各種CD抗原を発現しているT細胞の選択的な分離を行う装置。

* 製品の詳細については、こちら「Fab Streptamer Magnetic T Cell Isolation Kit」の記事をご覧下さい。
ヒト全血またはマウス脾細胞から各種T細胞/B細胞を単離するカラムについてはFab-TACS Agarose Column Starter Kitシリーズをご覧下さい。

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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