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密度勾配遠心法によるエキソソームの単離を効率化する試薬 ExoMAX Opti Enhancer

掲載日情報:2017/06/29 現在Webページ番号:65563

一般的なショ糖を用いた密度勾配遠心法によりエクソソームを単離する場合、低速~超遠心分離を複数ステップ行う必要があります。しかし、ExoMAX Opti Enhancer を用いることによりこの操作を短縮でき、さらにエクソソームの収率を上げることができます。

OptiPrepTM は、AXIS-SHIELD 社の登録商標です。


ExoMAX Opti Enhancerの操作方法概略

ExoMAX Opti Enhancerの操作方法概略

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特長

  • 高純度のため、ウイルスやタンパク質凝集物由来のエクソソームの分離に有用です。
  • 高収率が得られるため、より少量の試料でエクソソームの調製が行えます。
  • 簡便な3段階の密度勾配遠心の前操作で済むため、実験の手間が省けます。
  • 調製したエクソソームは、バイオマーカーの探索や機能性分析に用いることができます。
  • 様々な容量の培地や生体液から調製したエクソソームは、密度勾配の必要に応じて再懸濁できます。
  • ExoMAX Opti Enhancerは、使用時に等量の試料に添加してご利用下さい。
  • 使用回数(包装):12 reactions(120 ml)または24 reactions(240 ml)(1回 10 ml使用時)

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種類

商品コードをクリックすると、価格表がご覧いただけます。

品名 使用回数 包装 商品コード
ExoMAX Opti Enhancer Reagent 12 reactions 120 ml EXOMAX12A-1
24 reactions 240 ml EXOMAX24A-1

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使用例

■細胞培養液から単離したエクソソームのウェスタンブロット像

OptiPrep勾配から得られた14個のフラクションのウエスタンブロット解析

密度勾配にかける前操作でExoMAX Opti Enhancerまたは標準的な段階的遠心分離法により、OptiPrepTM勾配から得られた14個のフラクションのウエスタンブロット解析
α-Tsg101(エクソソームの既知のマーカー)のウエスタンブロット解析を実施した。各フラクション(フラクションNo.1~7)のバンド強度を見ると、密度勾配遠心の前操作としてExoMAXを使用した場合は超遠心分離を使用した場合より高収率を示した。エクソソームは、U1細胞由来の馴化培地10 mlから単離したものを用いた。

ExoMAX CD63 Westを用いたα-CD63およびβ-アクチンのウエスタンブロット像

密度勾配遠心を行う前操作としてExoMAX Opti Enhancerまたは一般的な段階遠心分離法を用いて調製したα-CD63およびβ-アクチンのウエスタンブロット像
それぞれ10 mlの細胞培養液から一般的な密度勾配遠心の前操作で調製した試料では、CD63とアクチンマーカーは検出されなかった。

ExoMAX HIV Gag Westを用いたウイルスからのエクソソームの調製例

本品を用いたウイルスからのエクソソームの調製例
HIV Gagタンパク質は、感染細胞由来のエクソソームに多量に含まれていることが知られる。一方、p24キャプシドタンパク質は組換えウイルスにのみ含まれる。

A:抗Gag抗体でプローブされた密度勾配フラクションは、エクソソーム含有フラクションと同じフラクション(フラクションNo. 1~5、前図参照)の存在が示された。
B:HIV p24キャプシドタンパク質の存在により同定されるHIVウイルスでは、エクソソーム非含有フラクション(フラクションNo.11~13)においてのみHIV p24キャプシドタンパク質が検出された。

George Mason UniversityのFatah Kashanchi博士よりデータ提供

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参考文献

  • Narayanan A., et al. J. Biol. Chem., 288(27), 20014~20033 (2013).

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価格

[在庫・価格 :2024年04月20日 08時35分現在]

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詳細 商品名
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納期 文献数
ExoMAX Opti Enhancer Reagent, 12reactions
10日程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
ExoMAX Opti Enhancerを用いることにより,OptiPrepを用いた煩雑な密度勾配遠心の前操作をわずか3ステップに効率化し,さらに高収率が得られる。
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2022年10月15日号 p.14
ニュース2021年8月1日号 p.13

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説明文 ExoMAX Opti Enhancerを用いることにより,OptiPrepを用いた煩雑な密度勾配遠心の前操作をわずか3ステップに効率化し,さらに高収率が得られる。
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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