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バキュロウイルス-昆虫細胞高発現構築システム BestBac v-cath/chiA Deleted Baculovirus Cotransfection Kit

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:65542

組換えAcNPV(Autographa californicaの核多角体病ウイルス)E2クローン由来のバキュロウイルスの線状化DNAとトランスファーベクターをSf9細胞にトランスフェクションすることでタンパク質を高発現できるキットです*。野生型の持つv-cath/chiA(カテプシンおよびキチナーゼ)が欠損しているため有害なプロテアーゼ産生が抑制され、機能を有する目的タンパク質の高発現が可能です。

* 本製品には、目的遺伝子を組み込んだトランスファーベクターは含まれていません。pVL1392およびpVL1393を含む別売りのTransfer Vector Set(#91-030)(下図参照)を事前にご用意下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

BestBacバイアル

BestBac linearized DNA v-cath/chitinase deletionの外観

BestBacベクターマップ

別売品のTransfer vector set(#91-030)に含まれるpVL 1393およびpVL 1392
BestBac 2.0, v-cath/chiA Deleted Baculovirus Cotransfection Kit (#91-200)にはトランスファーベクターpVL 1393-lacZがポジティブコントロールベクターとして含まれています。

●プラスミドの特長:

  • 5’ Recombination Seq:1~3,997 bp
  • pPolh:3,998~4,092 bp
  • pVL 1393 MCS:4,129~4,169 bp
  • pVL 1392 MCS:4,134~4,174 bp
  • ColE ori::7,407~8,026 bp
  • Ampicillin Resistance:8,181~9,041 bp
  • 3’ Recombination Seq: 4,180~6,973 bp

●保存用バッファー:10 mM Tris-HCl, pH8.0

BestBac 2.0, v-cath/chiA Deleted Baculovirus Cotransfection Systemとは

昆虫細胞とバキュロウイルスは、タンパク質生産のための重要な方法となっています。Autographa californica 核多角体病ウイルス(AcNPV)は、Spodoptera frugiperda の幼虫由来のSf9細胞に感染します。Sf9細胞に豊富に存在するポリヘドリン遺伝子の発現は培養上必須ではありませんが、その強力なプロモーターは外来遺伝子産物合成に用いられます。ポリヘドリンプロモーターは、ウイルスによって宿主細胞が既に細胞死を起こした感染末期になってから高い活性を示すため、特定の毒性タンパク質も大量発現することができます。昆虫細胞では多くの翻訳後修飾が正しく行われるため、大腸菌で発現できないタンパク質も発現できます。

BestBac 2.0, v-cath/chiA Deleted Baculovirus Constraction Systemは、AcMNPV E2クローン由来の線状化バキュロウイルスDNAを用いてSf9細胞で目的遺伝子を発現します。このDNAは、ポリヘドリン遺伝子座からポリヘドリンプロモーターが除去されているため、宿主細胞中で増殖できません。しかし、ポリヘドリンプロモーターが組み込まれたトランスフェクションベクターのpVL 1393やpVL1392などと同時にトランスフェクションすることにより、Sf9細胞中における組換えバキュロウイルスがほぼ100%の効率で得られます。この線状化DNAは野生型のv-cath/chi(カセプシンとキチナーゼ)の遺伝子座を欠損させた変異型のため、有害なプロテアーゼ産生能が欠損しており、またタンパク質生産時の競合も抑制されることから、目的タンパク質を高発現できます。


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特長

  • 野生型の線状化BestBac DNAよりv-cath/chitinase(カセプシンおよびキチナーゼ)遺伝子が欠損した変異型を用いているため、有害なプロテアーゼを除去し、目的タンパク質を高発現できます。
  • AcMNPV E2クローン由来の線状化バキュロウイルスDNAで、in vivo およびin vitroにおいて交互に継代を繰り返すことで、ウイルスの完全性が確認されています。
  • 宿主細胞に対して毒性を有するタンパク質も高レベルで発現できます。
  • 発現系に昆虫細胞を用いているため、多くの翻訳後修飾が正しく行われ、大腸菌で発現できないタンパク質でも発現させることができます。

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キット内容

  • BestBac linearized DNA v-cath/chitinase deletion
  • Transfection medium
  • Transfection reagent

本製品には、目的遺伝子を組み込んだトランスファーベクターは含まれていません。pVL1392およびpVL1393を含む別売りのTransfer Vector Set(#91-030)を事前にご用意下さい。

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価格

[在庫・価格 :2024年04月25日 16時55分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
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納期 文献数
BestBac 2.0 D v-cath/chiA Baculovirus Cotransfection Kit
3~4週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
※ウイルスベクター関連製品のため,購入時に使用者確認書が必要です。 バキュロウイルス-昆虫細胞高発現構築用キット。組換えAcNPVE2クローン由来のバキュロウイルスの線状化DNAとトランスファーベクターをSf9細胞にトランスフェクションすることでタンパク質を高発現できる。
法規制等
保存条件 4℃,暗所保存,凍結禁止 法規備考
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[在庫・価格 :2024年04月25日 16時55分現在]

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BestBac 2.0 D v-cath/chiA Baculovirus Cotransfection Kit

文献数: 0

説明文 ※ウイルスベクター関連製品のため,購入時に使用者確認書が必要です。 バキュロウイルス-昆虫細胞高発現構築用キット。組換えAcNPVE2クローン由来のバキュロウイルスの線状化DNAとトランスファーベクターをSf9細胞にトランスフェクションすることでタンパク質を高発現できる。
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商品コードをクリックすると価格表がご覧いただけます。

品名商品コード包装製品概要
BestBac 2.0, v-cath/chiA Deleted Linearized Baculovirus DNA91-0021 set組換え線状化バキュロウイルスDNA
pVL 1392, 1393 transfer vector set*91-0301 setpVL 1392, pVL 1393トランスファーベクターセット
Transfection Medium95-020-02020 mlバキュロウイルス-sf9細胞トランスフェクション用培地
95-020-100100 ml

* pVL 1392とpVL 1393トランスファーベクターは、別売りのpVL 1392, 1393 transfer vector set(#91-030)に含まれます。

[在庫・価格 :2024年04月25日 16時55分現在]

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詳細 商品名
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納期 文献数
Linearized Baculovirus DNA, 2.0, v-cath/chitinase A Deletion, BestBac
3~4週間 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
※ウイルスベクター関連製品のため,購入時に使用者確認書が必要です。 組換え線状化バキュロウイルスDNA。
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Linearized Baculovirus DNA, 2.0, v-cath/chitinase A Deletion, BestBac

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説明文 ※ウイルスベクター関連製品のため,購入時に使用者確認書が必要です。 組換え線状化バキュロウイルスDNA。
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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