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メーカー：	Horizon社Dharmacon製品 OriGene Technologies
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HOME > 試薬 > タンパク質／酵素 > タンパク質解析 > 酵素活性測定キット > TOPO Ⅰ＆Ⅱ In Vivo Link Kit

トポイソメラーゼ活性の測定によりがん細胞における阻害物質の評価ができます TOPO Ⅰ＆Ⅱ In Vivo Link Kit

掲載日情報：2017/01/13 現在Webページ番号：65450

TOPO Ⅰ In Vivo Link KitおよびTOPO Ⅱ In Vivo Link Kitは、in vivo でトポイソメラーゼ（TOPO, Topoisomerase）酵素の活性を定量化することができます。遊離型とTOPO/DNA複合体をCsCl密度勾配遠心法で分離し、TOPOⅠまたはTOPOⅡに対する抗体を用いるイムノブロッティングによってTOPO/DNA複合体を定量します。
特定のがん細胞において、予測されるトポターゲットに阻害活性を有する新規薬物の評価を行うことができます。

※ 本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

特長
操作方法概略
使用例動画
キット内容
価格

特長

核内の染色体凝集において、新規化学物質の内因性TOPOに対する活性を確認することができます。
任意の腫瘍細胞または組織で使用可能です。
同一実験においてTOPOⅠおよびTOPOⅡのキットを組み合わせて使用することも可能です。
キットにはポジティブコントロールとして既知の阻害物質が含まれています。

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操作方法概略

細胞を薬物処理し、共有結合性の切断TOPO/DNA複合体のTOPOを捕捉するため、界面活性剤サルコシル（Sarkosyl）を用いて速やかに溶解する。
非共有結合DNA／タンパク質複合体を分離する。
共有結合性トポ／DNA複合体、クロマチン凝集、タンパク質をCsCl密度勾配遠心法で分離して分画する。
DNAピークにおけるTOPOの量が共有結合性トポ／DNA複合体の基準となる。
プローブとしてTOPOⅠまたはⅡに対する抗体を用い、イムノブロッティングによってDNAピークにおけるTOPO濃度を測定する。
切断可能な複合体を安定化する化学物質（Etoposide、Camptothecin）の非存在下では、DNAピーク中にTOPO（特にTOPOⅡ）は低レベルでしか含まれない。TOPOのDNA濃度とタンパク質濃度の比率は、切断可能な複合体の安定化の相対効率を示す。

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