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ウエスタンブロットAP検出用の高感度シグナル増幅試薬 VECTASTAIN ABC-AmP Kit

掲載日情報:2021/01/22 現在Webページ番号:65308

ストレプトアビジンとビオチン標識アルカリホスファターゼの間であらかじめ形成された複合体ABC(Avidin-Biotinylated enzyme Complex)を利用し,ニトロセルロースまたはPVDFメンブレン上のシグナルを著しく増強するウエスタンブロットのシグナル増幅試薬です。別売りのビオチン標識抗体とアルカリホスファターゼ基質との併用により,メンブレンに固相化されたタンパク質を高感度かつ低バックグラウンドで検出を行うことができます。

シグナルの増幅原理

VECTASTAINR ABC-AmP KitDuoLuX Substrate AP(#SK-6605)(別売品)を用いたタンパク質の検出原理

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使用例

VECTASTAINR ABC-AmP Kitを用いたウエスタンブロット検出

マルトース結合タンパク質(MBP)を段階希釈(1:2)し,12%還元PAGEゲルを用いて電気泳動を行い,ニトロセルロースメンブレンに転写した。ビオチン標識ヤギ抗MBP抗体で処理後,VECTASTAINABC-AmP KitとDuoLuX Substrate AP(#SK-6605)(別売品)およびBCIP / NBT(#SK-5400)(別売品)を用いてそれぞれ化学発光により検出した。VECTASTAINABC-AmP KitDuoLuX Substrate APを併用した場合,VECTASTAINABC-AmP KitBCIP / NBTを併用した場合に比べて約10倍の感度が得られることがわかる。

BCIP / NBT(#SK-5400)使用

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特長

  • 適用:ウェスタンブロット,Elispot(ニトロセルロースメンブレン,またはPVDFメンブレン使用)
  • 増幅システム:ABC (ストレプトアビジン/ビオチン) システム
  • 検出酵素:アルカリフォスファターゼ(AP)
  • 使用回数:20 membranes(100 cm2
  • 検出用AP基質:長時間(8 時間以上)高レベルの発光が持続する,高感度AP基質DuoLuX Substrate, AP(#SK-6605)(別売品)のご使用をお勧めします。DuoLuX の反応生成物は蛍光を発するので,化学発光消失後にUVトランスイルミネーターで検出*することも可能です。

* 波長:254~365 nm(エチジウムブロミド用フィルターを使用)。

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キット内容

  • ABC-Amp Reagent A/B

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関連製品 DuoLuX Substrate AP

DuoLuX Chemiluminescent and Fluorescent Substrate AP(#SK-6605)は,独自のアクリダン誘導体を用いた,化学発光が長時間持続する,非常に高感度なアルカリホスファターゼ(AP)用の基質です。また,永続的な蛍光発光も有しており,蛍光による検出も可能です。下図をクリックすると,製品の詳細をご覧いただけます。

AP用DuoLuX像

タンパク質の化学発光による検出

ウサギIgG(H)を段階希釈し,電気泳動によって分離した。次に,ニトロセルロースメンブレンに転写し,VECTASTAIN ABC-AmP Kit(#AK-6000)/DuoLuX Substrate AP(#SK-6605)を使用してビオチン標識抗ウサギIgG抗体を検出した。

タンパク質の化学発光検出


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価格

[在庫・価格 :2021年02月27日 00時13分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

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関連製品

[在庫・価格 :2021年02月27日 00時13分現在]

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詳細 商品名
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  • 在庫
  • 法規制等
納期 文献数
DuoLuX Chemiluminescent/Fluorescent Substrate for Alkaline Phosphatase
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0
説明文
アルカリホスファターゼ酵素に使用できる化学発光基質。ブロットおよびELISAに適する。
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2017年8月15日号 p.23

製品記事 VECTASTAIN ABC キットの使用法 -4
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DuoLuX Chemiluminescent and Fluorescent Substrate
検出(化学発光・蛍光・発色・基質) - ウエスタンブロット(Western Blot)特集
関連記事 『免疫染色実験ガイド 2019-2020』発刊のお知らせ(2019年7月発刊)
Alkaline Phosphatase Substrate Kit IV <BCIP/NBT>
2週間程度 ※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。 0

[在庫・価格 :2021年02月27日 00時13分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。

DuoLuX Chemiluminescent/Fluorescent Substrate for Alkaline Phosphatase

文献数:0

説明文 アルカリホスファターゼ酵素に使用できる化学発光基質。ブロットおよびELISAに適する。
法規制等
保存条件 4℃ 法規備考
掲載カタログ ニュース2017年8月15日号 p.23

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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