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組織からの初代細胞の単離に!高純度の新規コラーゲン分解酵素 Brightase-C(ブライターゼC)

掲載日情報:2026/04/23 現在Webページ番号:65070

Grimontia hollisaeのコラゲナーゼ遺伝子を、リポ多糖を含む外膜を持たないグラム陽性菌であるBrevibacillus choshinensisで発現させた、組換え体(リコンビナント)酵素です。動物由来成分を含まない原料で製造しており、エンドトキシン濃度規格は10 EU/mg以下です。Clostridium histolyticum由来のコラゲナーゼよりもコラーゲン分解活性が高く、Ⅵ型コラーゲンも切断できます。
また、関連製品としてサーモライシン(サーモリシン)をBrevibacillus choshinensisで発現させた組換え体(リコンビナント)酵素のBrightase-TH、およびBrightase-CとBrightase-THのセット品もあります。細胞分離に用いる組織に応じて、2種類の酵素を適切な比率で使用することができます。

Brightase-C製品外観

特長

  • 従来のクロストリジウム属細菌(Clostridium histolyticum)由来コラゲナーゼでは切断できなかったⅥ型コラーゲンの切断も可能です。
  • 再生医療研究の出発点となる、生体材料からの細胞分離に使用できます。
  • 動物由来成分フリー(Animal origin-free、AOF)です。培養を含め、製造過程で動物由来原料を使用していません。
  • 低エンドトキシンです(10 EU/mg以下)。
  • カゼイン分解活性は有しません。

中性プロテアーゼを含んでいないため、膵島分離や脂肪組織由来幹細胞など、生体組織からさまざまな細胞を分離する際は「Brightase-TH」との併用をおすすめします。


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Brightase-C(ブライターゼC)とは


図1. ブレビバチルス発現システムを用いた組換え体タンパク質の産生について

図1. Brevibacillus(ブレビバチルス)発現システムを用いた組換え体タンパク質の産生について
Brightase-C(本製品)の産生に用いているBrevibacillus発現システムには、分泌タンパク質の発現に適している、培養上清からの標的タンパク質の精製が可能、低エンドトキシン、動物由来成分および抗生物質(ネオマイシン)フリーといった特長がある。


図2. Grimontia hollisae由来コラーゲナーゼの安定性の比較

図2. Grimontia hollisae由来コラーゲナーゼの完全長酵素と触媒ドメインの安定性の比較
PPCドメイン(プレペプチダーゼC末端ドメイン)*1を含む74 kDaの全長酵素は、自己消化により62 kDaに切断され、活性も低下する。一方、触媒ドメインのみを有する62 kDaの酵素は、37℃で1日間インキュベートした後でも自己消化を起こさず安定している。つまりコラゲナーゼ製品としては、酵素活性の安定性から62 kDaの酵素(Brightase-C、本製品)が適している。

*1 PPCドメイン:CBD(コラーゲン結合ドメイン)であることが確認されている。


図3. ロット間で安定したコラゲナーゼ活性

図3. ロット間で安定したコラゲナーゼ活性
Brightase-C(本製品)の4ロットにおける平均コラゲナーゼ活性は8,717±428 U/mgであり、ロット間のばらつきが少なく、安定したコラゲナーゼ活性を示した。


図4.他社製品と同等の比活性

図4.他社製品と同等の比活性
Azocol(アゾ色素標識不溶性コラーゲン線維)を基質として用いた場合、Brightase-C(本製品)の比活性は他社製品A*2 と同等であった。この結果は、マウス膵臓の消化試験の結果とも一致する(結果の掲載なし)。


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ブライターゼC(recombinant collagenase)。Grimontia hollisaeのコラゲナーゼ遺伝子をBrevibacillusに組み換え,リコンビナントタンパク質として発現させたコラゲナーゼです。従来のClostridium histolyticum由来コラゲナーゼでは切断できなかったVI型コラーゲンの切断も可能です。再生医療の出発点となる,生体材料からの細胞分離に使用できます。
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ニュース2017年6月1日号 p.15

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ブライターゼC(recombinant collagenase)。Grimontia hollisaeのコラゲナーゼ遺伝子をBrevibacillusに組み換え,リコンビナントタンパク質として発現させたコラゲナーゼです。従来のClostridium histolyticum由来コラゲナーゼでは切断できなかったVI型コラーゲンの切断も可能です。再生医療の出発点となる,生体材料からの細胞分離に使用できます。
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Brightase C

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説明文 ブライターゼC(recombinant collagenase)。Grimontia hollisaeのコラゲナーゼ遺伝子をBrevibacillusに組み換え,リコンビナントタンパク質として発現させたコラゲナーゼです。従来のClostridium histolyticum由来コラゲナーゼでは切断できなかったVI型コラーゲンの切断も可能です。再生医療の出発点となる,生体材料からの細胞分離に使用できます。
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関連製品:Brightase-TH

サーモライシン(サーモリシン)をBrevibacillus choshinensisで発現させた組換え体(リコンビナント)酵素です。動物由来成分を含まない原料で製造しており、エンドトキシン濃度規格は10 EU/mg以下です。膵島分離や脂肪組織由来幹細胞など、生体組織から細胞を分離する際にご使用下さい。

Brightase-TH製品外観

Brightase-TH単品


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Brightase-CとBrightase-THのセット品

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Brightase-C/TH(40mg/≧4mg)
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Brightase-C/TH(40mg/≧4mg)

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