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ワンステップで標的細胞を濃縮または除去する試薬 pluriSpin Enrichment Kit / Depletion Kit

掲載日情報:2023/04/18 現在Webページ番号:64797

ヒトの全血、軟膜または臍帯血中の標的細胞を、簡便に濃縮(Enrichment Kit)または除去(Depletion Kit)する試薬です。pluriSpinによるネガティブセレクションにより、マグネットやカラムは使用せずに細胞を無傷で分離できるため、高い生存率・活性を有する細胞を回収することができます。

pluriSpin Human Monocyte Enrichment Kitを使用したヒト単球の濃縮

pluriSpin Human Monocyte Enrichment Kit
を使用したヒト単球の濃縮

pluriSpin Human Monocyte Enrichment KitとpluriSpin Human PLT Depletion Kitを併用したヒト単球の濃縮

pluriSpin Human Monocyte Enrichment Kit
とpluriSpin Human PLT Depletion Kit
を併用したヒト単球の濃縮

pluriSpin Human PLT Depletion Kitと他のpluriSpin Enrichment Kitを併用することにより、分離される細胞の純度が向上することがわかる。

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ネガティブセレクションの原理

pluriSpin細胞分離法の原理

pluriSpin細胞分離法の原理

全血などの試料にpluriSpinと 密度勾配媒体(Density gradient medium)*を加えると、標的外の細胞は、高い親和性を有するpluriSpin粒子と結合することで比重が増加し、続く遠心分離の操作で遠沈管の底部に沈殿します。pluriSpinと親和性を持たない標的の細胞濃縮物は、最上層の血漿と下層の密度勾配媒体間で中間層を形成します。洗浄、回収した細胞は、濃縮操作において他の物質との結合、吸着などの反応に関与しないため、無傷で高い生存率、細胞活性を有する細胞が得られます。

* 密度勾配媒体(Density gradient medium)は、pluriSpinに含まれていません。別途、ご用意下さい。Ready-to-useの密度勾配媒体Spin Mediaの詳細はこちらをご覧下さい。

血小板汚染の問題とpluriSpin HumanPLT Depletion Kit使用の解決方法と利点

血小板の汚染の問題点 pluriSpin Human PLT Depletion Kit使用による解決方法と利点
  • 新鮮血液中の標的細胞の濃縮細胞の純度が低下し、8時間以上経過した血液試料ではさらに純度が低下する。
  • 血小板の活性化の防止のため、血小板を含む試料は穏やかに取り扱う必要がある。
  • 血小板は、スペースを取り、遊離の成長因子や他の媒体を設定することにより細胞培養を妨害する。
  • 血小板は細胞塊を作ることがある。
  • 血小板は粘着性があり、他の細胞(単球、好酸球など)と容易に結合する。
  • 血小板はフローサイトメトリーによる分析に影響を及ぼすため、DNA含有量に大きな変動を引き起こす可能性がある。
  • ビーズを使用せずに除去操作ができる。
  • 密度勾配遠心分離により、1ステップで濃縮細胞の純度を高めることができる。
  • pluriSpinなどのネガティブセレクションテクニックと併用が可能。
  • 希少細胞の濃縮性を改善できる(例:pluriSpin CD45 Depletion Kitを使用した場合)
  • 遠心分離ステップが少ないため、血液試料の操作を最小限に抑えられる(血小板密度勾配を使用した標準プロトコルと比較した場合)。
  • 8時間以上経過した血液試料からの細胞の濃縮を改善できる。

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特長

  • ネガティブセレクションを採用しているため、回収した細胞は無傷で高い生存率、細胞活性を維持できます。
  • わずか30分間で、高純度の細胞が得られます。
  • マグネットやカラムは使用しません。
  • 細胞分離はワンステップで行えます。
  • 遠心分離機、ローテーター以外の特別な機器や設備は不要です。
  • 適用試料:全血、軟膜、臍帯血

pluriSpin Enriched / Depleted Kit使用後の回収物中の標的細胞の純度(含有率)

標的細胞の種類 標的細胞の純度(含有率)
Enriched(濃縮)法 Depleted(除去)法
Monocytes 84~92% 0.2~1%
T cells 88~95% 0.2~2%
CD4 T cells 88~94% 0.2~1%
CD8 T cells 84~95% 0.2~0.7%
NK cells 75~90% 0.5~3%
B cells 75~85% 0.1~0.4%


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製品の種類

商品コードをクリックすると、価格表がご覧いただけます。

製品の種類 製品の種類
Enrichment(濃縮) Kit Depletion(除去) Kit
全血処理可能量 40 ml 200 ml 40 ml 100 ml 200 ml
包装 2 ml 5×2 ml 2 ml 10×0.2 ml 5×2 ml
標的細胞 Human Monocyte 19-01001-31 19-01001-32 19-01002-31 19-01002-32
Human T Cells 19-02001-31 19-02001-32 19-02002-31 19-02002-32
CD4 Cells 19-03001-31 19-03001-32 19-03002-31 19-03002-32
CD8 Cells 19-03002-32 19-04001-32 19-04002-31 19-04002-32
NK Cells 19-05001-31 19-05001-32 19-05002-31 19-05002-32
B Cells 19-06001-31 19-06001-32
CD19 Cells 19-06002-31 19-06002-32
PBMC 19-08002-31 19-08002-32
CD45 Cells 19-09002-31 19-09002-32
PLT 19-00002-31


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操作方法概略

pluriSpinのワークフロー

pluriSpinのワークフロー

試料の重層 遠心分離 4層分離
  • ①:pluriSpinを加える(50 μl/ml試料)。
  • ②:密度勾配媒体上に試料を重層し、室温下で800×g、15分間の遠心分離を行う。
  • ③:4層に分離する。標的細胞が含まれる第2層を回収する。
  • ④:濃縮された標的細胞。
  • ⑤:濃縮された標的細胞を洗浄する。

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使用例

pluriSpinを用いて回収したヒト単球のフローサイトメトリーによる分析

pluriSpin Human Monocyte Enrichment Kit(#19-01001)を用いて、ヒト全血試料中のCD14+細胞を濃縮した。


pluriSpinを用いて回収したヒト単球のフローサイトメトリーによる分析(新鮮末梢血(濃縮前))

図をクリックすると拡大します(拡大図

新鮮末梢血(濃縮前)

pluriSpinを用いて回収したヒト単球のフローサイトメトリーによる分析(CD14+細胞(濃縮後))(CD14+細胞の含有率:84~92%)

図をクリックすると拡大します(拡大図

CD14+細胞
(濃縮後、CD14+細胞の含有率:84~92%)

pluriSpin Human PLT DepletionとPBMC Spin Mediumを併用したCD45+細胞の濃縮

PBMC Spin Medium

図をクリックすると拡大します拡大図

PBMC Spin Mediumと10 μl PLT-Depletionを併用

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PBMC Spin Mediumと20 μl PLT-Depletionを併用

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PBMC Spin Mediumと40 μl PLT-Depletionを併用

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PBMC Spin Mediumと60 μl PLT-Depletionを併用

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カタログ

左下の画像をクリックすると細胞分離用製品カタログ(セルストレーナーカタログ)、右下の画像をクリックするとpluriSpinフライヤー(メーカーフライヤー)(pluriSpinフライヤー)をご覧いただけます。

細胞分離用製品カタログカタログ

細胞分離用製品カタログ

製品ラインナップ、価格は2019年7月時点です。

pluriSpinフライヤー

pluriSpinフライヤー

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pluriSpinのFAQ

Q-2. 分離した目的細胞からビーズを除去することはできますか?
A-2. pluriSpinはネガティブセレクションの細胞分離法のため、ビーズが細胞に付着することは無く、除去操作は不要です。




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関連製品

密度勾配媒体Spin Media

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品名 商品コード
Leuko Spin Medium 60-00091
Lympho Spin Medium 60-00092
Lympho 24+ Spin Medium 60-00093
PLT Spin Medium 60-00094
Leuko Spin Medium(#60-00091)製品外観

Leuko Spin Medium(#60-00091)製品外観



Wash Buffer

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品名 Wash Buffer 10×
包装 100 ml 500 ml
商品コード 60-00080-10 60-00080-11
Wash Buffer(#60-00080)製品外観

Wash Buffer(#60-00080)製品外観

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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