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ウエスタンブロットやELISA用の改良ブロッキング溶液 Blocking Solution

掲載日情報:2016/03/28 現在Webページ番号:64641

ウエスタンブロットまたはELISA用のReady-to-Useのブロッキング溶液です。成分の違いによりそれぞれ4種類あり、使用条件などに合わせて最適な製品を選択できます。また、通常のスキムミルクなどを使用するブロッキング試薬に比べて感度が向上します。

Blocking Solution

使用例

ブロッキング剤の性能比較

ブロッキング剤の性能比較

M:タンパク質分子量マーカー、SM:5% Skim Milk、kB:k-Block、cB:b-Block

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製品ラインナップ

商品コードをクリックすると直接価格表がご覧いただけます。

種別 用途 包装 製品概要
Western Blot ELISA
c-Block 品名
商品コード
c-Block-w
BCL-BKCW-01
c-Block-e
BCL-BKCE-01
500 ml 100%化学成分のブロッキング液。ウエスタンブロットや抗体検出ELISAでは非常に高い性能を示します。
h-Block 品名
商品コード
h-Block-w
BCL-BKHW-01
h-Block-e
BCL-BKHE-01
500 ml カゼインベースのブロッキング液です。汎用性が高く一般的に利用されるタイプです。
k-block 品名
商品コード
k-Block-w
BCL-BKKW-01
k-Block-e
BCL-BKKE-01
500 ml 変性カゼインベースのブロッキング液です。安定した性能を示し、応用範囲が広い製品です。
b-block 品名
商品コード
b-Block-w
BCL-BKBW-01
b-Block-e
BCL-BKBE-01
500 ml BSAベースのブロッキング液です。万能性が高い製品です。
Trial set 品名
商品コード
Blocking solution Trial set (Western)
BCL-BKSW-01
Blocking solution Trial set
(ELISA)
BCL-BKSE-01
20 ml×4 上記ブロッキング溶液をセットしたトライアルキットです。スクリーニングにご利用下さい。
増強試薬 品名
商品コード
Signal Booster Neo
BCL-SBN-01
250 ml タンパク質フリーの抗原・抗体反応増強試薬
品名
商品コード
Signal Booster
BCL-125
250 ml set 抗原・抗体反応増強試薬の定番

Signal Booster およびSignal Booster Neoには別容量もあります。上表の品名をクリックすることで製品の詳細をご覧いただけます。

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特長

  • Ready-to-Useのブロッキング溶液です。
  • ウエスタンブロット用とELISA用それぞれの専用ブロッキング剤があります。
  • ウエスタンブロット用製品ではSkim milkを利用するより感度が上昇します。*
  • ELISA用製品では、プレコートプレートとして乾燥することで長期保存が可能です。**

* Beacle社の抗原・抗体セットによる比較結果
** 抗体や抗原そのものが長期保存に耐えられないものは除きます。

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選択ガイド

アッセイ法 使用目的 c-Block h-Block k-Block b-Block Skim milk
Western Blotting 感度が足りない(多少のバック上昇は容認)
バックグラウンドを下げたい(感度は十分高い)
日常的なブロッキング剤として使いたい
リン酸化タンパク質検出に利用したい
抗原検出ELISA 直接法(プレートに試料吸着した抗原を抗体で検出)
抗体サンドイッチ法(固相化抗体に結合した抗原を抗体で検出)
抗体検出ELISA 直接法(抗原を固相化し結合した抗体を標識抗体で検出)
抗原サンドイッチ法(固相化抗原に結合した抗体を抗原で検出)

ウエスタンブロットではSkim milkは万能性が高いですが、シグナルが非常に弱くなる場合が多くあります。
検出する系にタンパク質を混入させたくない場合にはc-Blockを利用下さい。
検出系を問わず感度を上げたい場合には、シグナル増強試薬のSignal Booster又はSignal Booster Neoの利用が極めて有効です。
ELISAの場合、測定系ごとに相性の良いブロッキング剤を示します。何れのブロッキング剤も長期保存が可能な成分を含んでいるので、固相化した抗原や抗体が不安定でない限り、固相化・ブロッキング後に、乾燥、遮光、冷蔵保存の状態で数ヶ月間は保存できます。

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使用方法

(1)ウエスタンブロット

  1. SDS-PAGE の後、PVDF へタンパク質を転写します。
  2. タンパク質を転写したメンブレンを10 ml の製品のブロッキング溶液が入ったトレイへ浸し、1 時間、シェーカーなどで攪拌しながらブロッキングして下さい。以降の工程は通常と同じです。

(2)ELISA

抗原検出(抗体サンドイッチ)法と抗体検出(抗体検出法)についての内容です。

  1. 抗体(抗原)固相化は通常の方法で行い、固相化ウェルを 300μL のPBS-T で3 回洗浄します。
  2. 各ウェルに 200μL の製品のブロッキング溶液を分注し、1 時間37℃でブロッキングをします。
  3. ブロッキング溶液を廃棄後、ペーパー上でタッピングし完全にブロッキング溶液を除去します。
  4. 以降の工程は通常と同じです。
  5. 抗原や抗体を固相化したプレートを保存する場合は、固相化プレートを製品でブロッキング後、ブロッキング溶液を完全に除去し、乾燥させます。完全に乾いたことを確認した後、乾燥剤入りのアルミパックなどに入れて密閉し、4℃で保存下さい。6ヶ月は安定に利用できます。

固相化する抗原・抗体そのものが不安定な場合には、長期保存が出来ない場合があります。

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使用例

抗原検出サンドイッチELISAにおけるブロッキング剤の比較

抗原検出サンドイッチ

抗体検出直接法におけるブロッキング剤比較

抗体検出直接法

抗原検出サンドイッチにおける保存安定性

抗原検出サンドイッチ

リン酸化タンパク質検出におけるc-BockとSBNとの併用

ン酸化タンパク質検出

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価格

Western Blot用

[在庫・価格 :2024年12月10日 20時35分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
詳細 商品名
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c-Block-w
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説明文
100%化学成分のブロッキング液。ウエスタンブロッティングで非常に高い性能を示す。
法規制等
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掲載カタログ ニュース2023年10月1日号 p.18

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カゼインベースのウエスタンブロッティング用ブロッキング液。汎用性が高く一般的に利用されるタイプ。
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掲載カタログ ニュース2023年10月1日号 p.18

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変性カゼインベースのウエスタンブロッティング用ブロッキング液です。安定した性能を示し,応用範囲が広い製品です。
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BSAベースのウエスタンブロッティング用ブロッキング液。万能性が高い製品。
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ウエスタンブロッティング用ブロッキング溶液をセットしたトライアルキット。キット内容:c-Block-w, h-Block-w k-Block-w, b-Block-w(各20 ml)。
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[在庫・価格 :2024年12月10日 20時35分現在]

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説明文 100%化学成分のブロッキング液。ウエスタンブロッティングで非常に高い性能を示す。
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c-Block-e
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100%化学成分のブロッキング液。抗体検出ELISAで非常に高い性能を示す。
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Signal Booster Solution A&B 各250ml

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。