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Nanobody(VHH)を利用したワンステップ免疫沈降法 Nano-Trapシリーズ(Chromotek社)

掲載日情報:2020/09/16 現在Webページ番号:64515

Nano-Trapは,Nanobodyと呼ばれるイムノグロブリンの軽鎖を欠いたアルパカ(ラクダ科)抗体の可変領域(VHH)を用いており,標的タンパク質に対して通常の抗体と比べて高い親和性が得られます。そのため,Nano-Trapを利用することにより高収率かつ特異性の高い免疫沈降法(IP)/ Co-IPを行うことができます。そのほか,Nano-Trapは質量分析(Mass spectrometry)や酵素活性測定,ChIP/RIP分析など様々な生化学分析にもご使用いただけます。

免疫沈降法との比較

Nano-Trapシリーズ(左)と従来の抗体を用いた免疫沈降法(右)との比較

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アルパカ(ラクダ科)抗体とは

ラクダ科(アルパカ,ラマ,ラクダとヒトコブラクダ)は,従来のIgG抗体以外に重鎖抗体(hcAbs)と呼ばれる抗体の第2のタイプを持っています。HcAbsは,重鎖のみで構成され,ナノボディとして知られる単一の可変領域(VHHドメイン)を介して,その標的タンパク質に結合します。一般の複合体分子を形成しているIgG抗体の分子量は約150 kdaで,その複合体構造上ばらつきが生じるのに対し,このVHHドメインの分子量はわずか約13 kdaで,標的タンパク質に対する高い結合特性や特異性に加えて,ロット間差がなく高い品質で製造できるといった長所があります。

アルパカ抗体


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製品の種類と価格

タグ付タンパク質用Nano-Trap

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商品コード末尾が”k”のものは,免疫沈降用の各種バッファーを含むキット製品です。キット内容の詳細はこちらをご覧下さい。

製品群 品名 商品コード
価格
VHH結合
タンパク質
固定化担体 主な用途*
IP MS 酵素活性 ChIP
RIP
標識
GFP-Trap iST GFP-Trap Kit gtak-iST-8 GFP アガロースビーズ
GFP-Trap-A(Kit) gta / gtak
GFP-Trap-MA(Kit) gtma / gtmak 磁性アガロースビーズ
GFP-Trap Dynabeads(Kit) gtd / gtdk マイクロ磁性ビーズ
GFP-multiTrap gtp 96ウェルプレート
GFP-Binding Protein gt-250
RFP-Trap RFP-Trap_A(Kit) rta / rtak RFP アガロースビーズ
RFP-Trap-MA(Kit) rtma / rtmak 磁性アガロースビーズ
RFP-Trap Dynabeads(Kit) rtd / rtdk マイクロ磁性ビーズ
RFP-Binding Protein rt-250
mNeonGreen-Trap mNeonGreen-Trap_A(Kit) nta / ntak mNeonGreen アガロースビーズ
mNeonGreen-Trap_MA(Kit) ntma / ntmak 磁性アガロースビーズ
TurboGFP-Trap_A TurboGFP-Trap_A(Kit) tbta / tbtak TurboGFP(Kit) アガロースビーズ
TurboGFP-Trap_MA(Kit) tbtma / tbtmak 磁性アガロースビーズ
GST-Trap GST-Trap_A(Kit) sta / stak GST アガロースビーズ
Halo-Trap Halo(Kit) ota/otak Halo アガロースビーズ
MBP-Trap MBP-Trap_A(Kit) mbta/mbtak MBP アガロースビーズ
Myc-Trap Myc-Trap_A(Kit) yta / ytak Myc アガロースビーズ
Myc-Trap_MA(Kit) ytma / ytmak 磁性アガロースビーズ
Myc-Binding Protein yt-250
SNAP/CLIP-tag-Trap SNAP/CLIP-tag(Kit) wta/wtak SNAP/CLIP-tagアガロースビーズ

*用途の説明

IP:免疫沈降/Co-IP
MS:質量分析
標識:NHSエステル反応を介した色素およびビオチン標識など


特定タンパク質用Nano-Trap・価格

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商品コード末尾が”k”のものは,免疫沈降用の各種バッファーを含むキット製品です。キット内容の詳細はこちらをご覧下さい。

製品群 品名 商品コード
価格
VHH結合
タンパク質
交差性固定化担体 主な用途*
IP MS 酵素
活性
ChIP
RIP
標識
Mdm4/HdmX-Trap Mdm4/ HdmX-Trap-A hta / htak Mdm4/ HdmX
(aa 1~129)
Humanアガロース
ビーズ
MK2-Trap MK2-Trap-A mta / mtak MK2 Human
Mouse
Hamster
アガロース
ビーズ
p53 N-term-Trap p53 N-term-Trap-A pta / ptak p53
(aa 1~81)
Human アガロース
ビーズ
p53 C-term-Trap p53 C-term-Trap-A pta2 / pta2k p53
(aa 302~393)
Human
Mouse
アガロース
ビーズ
PARP1-Trap PARP1-Trap-A xta / xtak PARP1 Human アガロース
ビーズ

*用途の説明

IP:免疫沈降/Co-IP
MS:質量分析
標識:NHSエステル反応を介した色素およびビオチン標識など

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Nano-Trapシリーズの特長

  • 免疫沈降により,抗体の重鎖および軽鎖を含まない目的タンパク質のみが得られます。
  • 細胞ライセートをNano-Trapにアプライし,結合した標的タンパク質をペプチド溶液で溶出するだけの簡便な操作で,迅速に目的タンパク質が得られます。
  • 別売のスピンカラムを用いることで,より効率的に目的タンパク質が得られます。
  • 1,700報以上の引用文献があります(→ Literature database)。
  • 主な用途:免疫沈降(IP),質量分析(MS),酵素活性測定,ChIP/RIP分析

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各種担体の仕様

  アガロースビーズ 磁性アガロースビーズ 磁性ビーズ
(Chemicell
材質アガロースシリカ(非極性)
白色黒色褐色
粒子径約90μm
(4%架橋)
約40μm約0.5~1μm
結合能3~4μg/10μl担体0.25~0.5μg/10μl担体
磁性
遠心最大速度3,000 g

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関連製品の構成

製品内容Nano-Trap
Nano-Trap_A/MA/M
Nano-Trap KitNano-Trap
MA/M Kit
Binding
Control
Spin
Column
VHH(固定化担体)*1
Lysis buffer*2
RIPA buffer
Wash/Dilution buffer
Elution buffer
Binding control
Spin column
内容と主な用途 Nano-Trap単品。各種バッファーは別途必要。 Nano-Trap(20テスト分)と各種バッファーのセット。 Nano-Trap MA/M(20テスト分)と各種バッファーのセット。 非結合担体。タンパク質やDNAの非特異的結合の検査。 洗浄,溶出操作を簡便にし,迅速に単離・精製行える。

*1 製品によりて内容が異なります。
*2 哺乳動物細胞用ライセート調製用バッファーです。他の細胞種の場合には,適合する細胞溶解用バッファーをご使用下さい。

Nano-Trap / Nano-Trap MAキット

各種VHHを固定化した担体(20回分)に加えて,免疫沈降に必要な各種溶媒をセットにした便利なセットです。

Nano-Trapキット

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Nano-Trapシリーズの関連製品

Binding Controls

細胞ライセートの前洗浄や,タンパク質やDNAなどの担体への非特異的な結合のコントロールとして用いることができる,各種担体用のコントロールです。

品名商品コード製品の説明
Blocked agarose beadsbab-20アガロースビーズ用コントロール
Blocked magnetic agarose beadsbmab-20磁性アガロースビーズ用コントロール

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Binding Controlsの使用例

Binding control agarose beads(#bab-20)

Binding control agarose beads(#bab-20)を用いたCoomassie染色およびウエスタンブロット使用例

スピンカラム(#sct)

スピンカラムを用いることにより,目的タンパク質の結合したMyc-Trapの洗浄,溶出を簡便,迅速に行うことができます。

タイトルまたは商品コードをクリックすると,商品の包装と価格表がご覧いただけます。

スピンカラム(Spin Column)

スピンカラム

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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