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フローサイトメトリー用マウスサイトカイン解析キット Diaclone DIAplex Murine Cytokine Immunoassay Kit

掲載日情報:2015/10/01 現在Webページ番号:64358

標的因子に特異的な抗体を結合した蛍光標識ビーズを用いて、マウス試料中のサイトカイン(mIFNγ、mIL-2、mIL-6、mIL-10、mIL-17A)の1種類(simplex)または5種類(5-plex)をフローサイトメーターにより測定するキットです。

Diaclone DIAplex Murine Cytokine Immunoassay Kitの特長

  • ELISAに比べて迅速でかつ少量の試料でデータが得られます。
  • 定量性を有し、高感度で再現性に優れています。
  • スタンダードは、NIBSCスタンダードで較正されています。
  • 広範なフローサイトメーターに適合します。
  • 5-plex kitは5種類全てのマウスのサイトカインを同時に測定することが可能です(下表参照)。
  • 測定試料:血清、細胞培養上清
  • インキュベーション時間:3~4時間
  • 測定範囲:78~5,000 pg/ml
  • 測定回数:96 tests
品名 商品コード 測定因子 感度
(pg/ml)
mIFNγ mIL-2 mIL-6 mIL-10 mIL-17A
IFN-γ, Murine, DIAplex 890.010.001 5.4
IL-2, Murine, DIAplex 890.020.001 12.8
IL-6, Murine, DIAplex 890.060.001 7.7
IL-10, Murine, DIAplex 890.030.001 6.6
IL-17A, Murine, DIAplex 890.040.001 0.62
5-plex Kit, Murine, DIAplex 890.000.005

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Diaclone DIAplex Murine Cytokine Immunoassay Kitの測定原理

Diaclone DIAplex Murine Cytokine Immunoassay Kitの測定原理

1~2. 試料に標的測定因子に高い特異性を持つ抗体/蛍光標識ビーズ複合体を加えます。試料中に含まれる1種(Simplex)または複数(multiplex)の測定因子および標準物質は、懸濁液中でそれぞれに特異的な抗体/蛍光標識ビーズ複合体と結合します。ビオチン標識二次抗体を加え、一次抗体に捕捉された測定因子と結合させます。

3. Streptavidin-Phycoerythrin (PE)を加え、ビオチン複合体と結合することにより黄色の蛍光を発します。

4. 個々のビーズに固有の粒子径と蛍光波長をフローサイトメーターにより区別します。

5. DIAplex Pro Software(DIAplex Pro Software使用方法)を用いてフローサイトメーターで得たデータを解析することにより、試料中の各標的因子の濃度を簡単に計算することができます。

DIAplex Pro Software例

DIAplex Pro Software

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Diaclone DIAplex Murine Cytokine Immunoassay Kitのキット内容

  • Fluorescent beads coated with specific antibody
  • Lyophilized standard
  • Biotin-conjugate
  • Accessory Kit(Assay buffer、Wash buffer、PBS、Streptavidin-PE、Serum sample buffer)

キットにより内容が異なります。
測定にはArgonまたはHe-Ne laser(488 nmまたは532 nm)を付属し、蛍光波長575 nm と695~690 nm(遠赤外)の測定が可能なフローサイトメーター(下記参照)が必要です。

■フローサイトメーターの適合機種一覧

FC500(Navous)、Navios / Gallios(Beckman Coulter)、FacsCalibur / FacsCanto II / LSR II(BD)、Guava Easy Cyte Plus(Millipore)、MACSQuant Analyser(Miltenyi Biotec)

Antibody specificity Bead Population Bead Size / Region
mIFNγ L4 (4μm) R2 (small)
mIL-2 L8 (4μm) R2 (small)
mIL-6 L3 (5μm) R1 (large)
mIL-10 L10 (4μm) R2 (small)
mIL-17A L9 (5μm) R1 (large)

ビーズ内部は、異なる蛍光強度で染色されています。L10(高)→ L3(低)でそれぞれ赤色蛍光の異なるレベルに対応しています。

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Diaclone DIAplex Murine Cytokine Immunoassay Kitの価格

[在庫・価格 :2024年03月28日 20時15分現在]

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Accessory Kit, DIAplex

Diaclone DIAplex Immunoassay Panel Kit用のバッファーセットおよびStreptavidin PEを含むキットです。

[在庫・価格 :2024年03月28日 20時15分現在]

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[在庫・価格 :2024年03月28日 20時15分現在]

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Accessory Kit, DIAplex

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  • 商品コード:880.999.000
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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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