in vivo LEXSY Eukaryotic Protein Expression System
掲載日情報：2015/09/01 現在Webページ番号：64273
LEXSY(Leishmania expression system)は、Leishmania tarentolae細胞を用いたタンパク質発現システムです。バクテリア発現系のように実験操作が簡便で、哺乳動物型のフォールディング、翻訳後修飾を受けたタンパク質が得られます。
※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
※商業目的でご利用される場合はライセンス契約が必要です。
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- 既存の発現システムとLEXSY
- LEXSYの特長
- LEXSYの種類
- LEXSYcon2 Expression Kit
- LEXSYcon2 Expression Kitの価格
- LEXSinduce3 Expression Kit
- LEXSinduce3 Expression Kitの価格
- LEXSinduce4 Expression Kit
- LEXSinduce4 Expression Kitの価格
既存の発現システムとLEXSY
| フォールディング | 哺乳類型 翻訳後修飾 |
その他 | |
|---|---|---|---|
| バクテリア | 高分子量タンパク質では不十分 | 不可能 |
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| 酵母 | 可能 | 一部可能だが哺乳動物での 修飾とは大きく異なる |
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| 昆虫／哺乳動物細胞 | 可能 | 可能 |
|
| トランスジェニック 植物／動物 |
可能 | 可能 |
|
| LEXSY 細胞 | 可能 | 可能 |
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LEXSY用いたプラスミド構築からタンパク質製造までの流れ
LEXSYでは、約6週間でクローニングからタンパク質精製まで行えます。
LEXSY細胞・昆虫細胞 (Sf 9)・哺乳動物細胞(HEK293)との増殖速度の違い
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左：LEXSY細胞はSf 9細胞の4倍、HEK293細胞の6倍の増殖速度を有する。
右：LEXSY細胞は倍加時間が約4時間で、高密度培養が可能。
タンパク質発現系による糖鎖修飾の違い
LEXSYで発現させたタンパク質は、哺乳動物細胞で発現したタンパク質と同様の糖鎖修飾を受けている。
本キットを用いて発現させたヒト・エリスロポイエチン（EPO）は均一にグリコシル化されている。
－：N-glucosidase 処理前、＋：N-glucosidase 処理後
Leishmania signal peptide 4.0×105 U/mg
LEXSY細胞で産生したヒト・エリスロポイエチンを用いたCFU-GEMM＊増殖アッセイ
＊GEMM：Granulocyte, Erythrocyte, Monocyte, Macrophage
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LEXSYの特長
- LEXSYはヤモリ科のTarentola mauritanicaより単離されたトリパノソーマ原虫の一種で、哺乳動物には感染しません。
- LEXSY細胞の倍加時間は約4時間で、高密度培養（5×108 cells/ml）が可能です。
- LEXSY細胞は、超音波破砕、浸透圧ショックまたは界面活性剤で容易に溶解できます。
- 細胞質タンパク質、膜タンパク質、細胞外タンパク質などの様々なタンパク質が、最大で300 mg/L 得られます。また1～30 Lでの大量培養も可能です。
- 糖鎖付加、リン酸化、プレニル化など哺乳動物型の翻訳後修飾を受けたタンパク質が得られます。
- E. coli - LEXSY 細胞シャトルベクターを使用します。
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LEXSYの種類
| タンパク質発現様式 | 恒常的 | Tet誘導 | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| パラメーター | Intracellular / Secretory | Intracellular / Secretory | |||||||
| 典型的な培養時間 | 2～4 days | 1～3 days | |||||||
| 品名 | LEXSYcon2 Expression Kit | LEXSinduce3 Expression Kit | LEXSinduce4 Expression Kit | ||||||
| 発現ベクターの組み込み | 18SrRNA遺伝子座 | ODC遺伝子座 | 染色体外で自己複製エピソームとして保持 | ||||||
| 選択マーカーの種類 | NTC | hyg | bleo | neo | blecherry | bleo | neo | blecherry | |
| 商品コード | EGE- 1300sat |
EGE- 1300hyg |
EGE- 1300ble |
EGE- 1300neo |
EGE- 1410blecherry |
EGE- 1410ble |
EGE- 1410neo |
EGE- 1420blecherry |
EGE- 1420neo |
| キット内容 |
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pLEXSY_I-4 expression vector |
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＊製品によって含まれるベクターや抗生物質が異なります。
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LEXSYcon2 Expression Kit
LEXSY 細胞内で目的タンパク質の恒常的発現を行えます。
- 適切な翻訳後修飾やジスルフィド結合を有するタンパク質の発現に有用です。
- 発現カセットが相同組換えにより18S rRNA 遺伝子座に組み込まれるため、RNA ポリメラーゼⅠにより目的タンパク質が高効率で発現されます（下図参照）。
- ベクターの薬剤耐性マーカーが異なる 4 種類（sat/hyg/ble/neo）のキットがあり、それぞれに対応する抗生物質（Nourseothricin/Hygromycin/Bleomycin/Neomycin）およびプライマーが含まれています。
Constitutive LEXSY Expression systemの概念図
pLEXSY-2 expression vector map
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LEXSYcon2 Expression Kitの価格
[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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LEXSYcon2 Expression Kit, with pLEXSY-sat2 |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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LEXSYcon2 Expression Kit, with pLEXSY-hyg2 |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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LEXSYcon2 Expression Kit, with pLEXSY-ble2 |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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LEXSYcon2 Expression Kit, with pLEXSY-neo2 |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
LEXSYcon2 Expression Kit, with pLEXSY-sat2
文献数： 0
- 商品コード：EGE-1300sat
- メーカー：JBS
- 包装：1kit
- 本製品は取扱中止になりました
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | 使用目的確約書が必要 | ||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
LEXSY Eukaryotic Protein Expression System |
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| 関連記事 | |||
LEXSYcon2 Expression Kit, with pLEXSY-hyg2
文献数： 0
- 商品コード：EGE-1300hyg
- メーカー：JBS
- 包装：1kit
- 本製品は取扱中止になりました
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | 使用目的確約書が必要 | ||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
LEXSY Eukaryotic Protein Expression System |
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| 関連記事 | |||
LEXSYcon2 Expression Kit, with pLEXSY-ble2
文献数： 0
- 商品コード：EGE-1300ble
- メーカー：JBS
- 包装：1kit
- 本製品は取扱中止になりました
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | 使用目的確約書が必要 | ||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
LEXSY Eukaryotic Protein Expression System |
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LEXSYcon2 Expression Kit, with pLEXSY-neo2
文献数： 0
- 商品コード：EGE-1300neo
- メーカー：JBS
- 包装：1kit
- 本製品は取扱中止になりました
| 説明文 | |||
|---|---|---|---|
| 法規制等 | 使用目的確約書が必要 | ||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
LEXSY Eukaryotic Protein Expression System |
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LEXSinduce3 Expression Kit
テトラサイクリンにより目的タンパク質の発現を誘導できるキットです。LEXSY 細胞で細胞毒性を示すタンパク質の発現に有用です。
- ベクターの薬剤耐性マーカーが異なる2種類（ble/neo）のキットと、レポーター遺伝子としてCherry Fluorescenceを組み込んだキット（blecherry）の計3種類があります。それぞれに対応する抗生物質（Bleomycin / Neomycin）およびプライマーが含まれています。
- pLEXSY_I-blecherry3 ベクターは、Bleomysinによる薬剤耐性セレクションに加え、赤色蛍光によるポジティブクローンの選別が行えます。蛍光強度を測定して、発現量のモニタリングも可能です（励起 590 nm / 蛍光 620 nm）。
- キットにはレポーター遺伝子としてEGFP を組み込んだコントロールベクターが含まれています。
- 分泌シグナルペプチドを付加した目的タンパク質をLEXSY 細胞で恒常的に発現させ、分泌タンパク質として得ることもできます。
Tet inducible LEXSinduce3 Expression systemの概念図
発現カセットは LEXSY細胞のオルニチンデカルボキシラーゼ遺伝子座に組み込まれる。発現カセットが組み込まれた LEXSY細胞では、通常Tetリプレッサーにより目的タンパク質の発現が抑制されるが、テトラサイクリン存在下ではTetリプレッサーが不活性化され、目的タンパク質が発現誘導される。
pLEXSY_I-blecherry3 vector map
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LEXSinduce3 Expression Kitの価格
[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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LEXSinduce3 Expression Kit, with pLEXSY_I-blecherry3 |
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LEXSinduce3 Expression Kit, with pLEXSY_I-neo3 |
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[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
LEXSinduce3 Expression Kit, with pLEXSY_I-blecherry3
文献数： 0
- 商品コード：EGE-1410blecherry
- メーカー：JBS
- 包装：1kit
- 価格：¥948,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：カルタヘナ該当品
| 説明文 |
※購入時に使用目的確約書が必要です。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | -20℃,-80℃,暗所保存 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
LEXSY Eukaryotic Protein Expression System |
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| 関連記事 | |||
LEXSinduce3 Expression Kit, with pLEXSY_I-neo3
文献数： 0
- 商品コード：EGE-1410neo
- メーカー：JBS
- 包装：1kit
- 価格：¥948,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：カルタヘナ該当品
| 説明文 |
※購入時に使用目的確約書が必要です。 |
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|---|---|---|---|
| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | -20℃,-80℃,暗所保存 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
LEXSY Eukaryotic Protein Expression System |
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| 関連記事 | |||
追加しました。
LEXSinduce4 Expression Kit
LEXSY細胞において、発現プラスミドが自己複製エピソームとして染色体外で保持され、その増幅およびオリゴマー化を利用することにより、T7 RNAポリメラーゼによる転写の標的遺伝子コピー数を増加させます。
- 染色体内に組み込む誘導性発現に比べ、5～10倍高いタンパク質収量が得られます。
- 共発現するBleCherryまたはEGFP-red遺伝子の蛍光強度に基づいたクローン選別およびスクリーニングを行うことにより高発現株が得られます。
Tet inducible LEXSinduce4 Expression systemの概念図
標的遺伝子（X）を、 LEXSY発現ベクター上のTETオペレーター（op）とT7プロモーターの制御下の発現カセットに挿入する。ベクターをT7 RNA ポリメラーゼとテトラサイクリン（Tet）リプレッサーを恒常的に発現する細胞（Lexsy host T7-TR）に導入する。
pLEXSY_IE-blecherry4 & pLEXSY_IE-egfp-red-neo4 vector map
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LEXSinduce4 Expression Kitの価格
[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
| 詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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LEXSinduce4 Expression Kit |
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LEXSinduce4 Expression Kit |
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本製品は取扱中止になりました | 0 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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[在庫・価格 ：2024年04月26日 00時00分現在]
LEXSinduce4 Expression Kit
文献数： 0
- 商品コード：EGE-1420blecherry
- メーカー：JBS
- 包装：1kit
- 価格：¥948,000
- 在庫：無(未発注)
- 納期：2～3週間 ※※ 表示されている納期は弊社に在庫がなく、取り寄せた場合の目安納期となります。
- 法規制等：カルタヘナ該当品
| 説明文 |
※購入時に使用目的確約書が必要です。 |
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| 法規制等 | カルタヘナ該当品 | ||
| 保存条件 | -20℃,-80℃,暗所保存 | 法規備考 | |
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
LEXSY Eukaryotic Protein Expression System |
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| 関連記事 | |||
LEXSinduce4 Expression Kit
文献数： 0
- 商品コード：EGE-1420neo
- メーカー：JBS
- 包装：1kit
- 本製品は取扱中止になりました
| 説明文 | |||
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| 法規制等 | |||
| 保存条件 | 法規備考 | ||
| 掲載カタログ |
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| 製品記事 |
LEXSY Eukaryotic Protein Expression System |
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