塩基除去修復（BER）分析キット Glyco-SPOT DNA Repair Assay Kit
掲載日情報：2020/06/12 現在Webページ番号：64222
損傷を有するオリゴヌクレオチド (ODN) がスポットされたガラスアレイを用いて、試料中のグリコシラーゼ／APエンドヌクレアーゼによる切断、除去を蛍光により測定するキットです。DNA修復酵素のスクリーニング、試料のDNA修復様式の判定、DNAグリコシラーゼの特異性の確認、重金属を含む化学物質のDNA修復阻害特性分析などに使用できます。
※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。
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Base Excision Repair (BER) とは
塩基除去修復(BER)は、酸化、アルキル化、脱アミノ塩基および脱塩基部位などの小さな損傷をDNAから除去する主要な修復経路です。BERは酸化ストレスや様々な遺伝毒性の攻撃によって誘導されます。ヒトにおけるBERのメカニズムは、DNAグリコシラーゼがまず作用し、次いで二官能性グリコシラーゼのAPリアーゼまたはDNA鎖を切断する脱プリン／ピリミジン塩基エンドヌクレアーゼAPE1により、脱塩基部位の処理が行なわれます。本DNA修復機構を発見した功績により、Tomas Lindahl氏は2015年のノーベル化学賞を受賞しました。
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特長
- ハイスループットスクリーニングに対応しています。
- 測定動物種：ヒト、マウス、ラット、魚類、細菌
- 測定試料：精製酵素、細胞核抽出物、全細胞抽出物、組織抽出物
- 測定波長：励起 532 nm (Cy3)
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測定原理
左図：典型的なコントロールウエルのイメージ（バッファーのみでインキュベート）
右図：リアクションウェルのイメージ（細胞抽出物とインキュベート）
各スポットの損傷DNA（損傷／塩基対）
- 8-C：8oxoGuanine – Cytosine (8oxoG-C)
- A-8：Adenine – 8oxoGuanine (A-8oxoG)
- Tg：Thymine glycol – Adenine (Tg-A)
- U-G：Uracil – Guanine
- U-A：Uracil – Adenine
- Hx：Hypoxanthine – Thymine (Hx-T)
- εA：EthenoAdenine – Thymine (EtheA-T)
- THF：THF (AP site) – Adenine：THF-A
- LF：損傷のない二本鎖オリゴヌクレオチド（コントロール）
アレイ上のDNA損傷の修復に関与する酵素（BER経路）
| Substrate-paired base | Human | E. coli |
|---|---|---|
| 8oxoG-C | hOGG1 | Fpg |
| A-8oxoG | hMYH | MutY |
| Tg-A | NTH1, hNEIL1 | EndoIII, Nei |
| U-G | UDG | UNG |
| U-A | UDG, SMUG1 | UNG |
| Hx-T | MPG(AAG) | AlkA |
| EthenoA-T | MPG(AAG) | AlkA |
| APsite(THF)-A | APE1 | EndoIV, EndoVIII |
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使用例
(1)二官能性グリコシラーゼ
Fpg (U/well)による損傷の除去
hOGG1 (U/well)による損傷の除去
Nth (U/well)による損傷の除去
(2)ヒト線維芽細胞核抽出物の測定結果
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キット内容
- Coated 24 well glass slide (pre-functionalized with support oligonucleotide)
- Mix of duplex-oligonucleotide
- Hybridization buffer
- Excision buffer
- Wash buffer
- 10％ Polysorbate 20 (Tween 20)
※測定には蛍光測定用バイオチップ／スライドアレイスキャナーとCy3用フィルターが必要です。
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価格
[在庫・価格 ：2024年04月26日 20時55分現在]
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Glyco-SPOT DNA Repair Assay Kit |
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[在庫・価格 ：2024年04月26日 20時55分現在]
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