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ゲノム編集に使用できるCas9ヌクレアーゼ GenCrispr Cas9/Cas9-C-NLS Nuclease

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:64149

GenCrispr Cas9 NucleaseおよびCas9-C-NLS Nucleaseは、大腸菌から精製された組換え化膿連鎖球菌(Streptococcus pyogenes)野生型Cas9タンパク質です。部位特異的な二本鎖DNAの切断を誘導し、高精度ゲノム編集の強力なツールになります。
シングルガイドRNA合成受託サービス(EasyEdit / SafeEdit sgRNA)についてはこちらをご覧下さい。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。


Cas9タンパク質とは

Cas9タンパク質は、CRISPR-Cas9システムの構成要素であるguide RNA(gRNA)と非常に安定なリボ核タンパク質(Ribonucleoprotein:RNP)複合体を形成します。RNP複合体は、ゲノムDNA配列とguide RNAを照合することによって標的部位を認識し、NGG PAM(Protospacer Adjacent Motif)配列から3塩基以内でDNAの切断を引き起こします。



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特長

GenCrispr Cas9 Nuclease

  • 産生:E.coli
  • 核移行シグナル(Nuclear localization signal:NLS)は付加されていません。
  • in vitro DNA切断アッセイにより、高効率かつ特異的な標的guide RNAをスクリーニングすることができます。
  • 高度精製されており、Cas9抗原を用いた特異的抗体の産生にも利用できます。

GenCrispr Cas9-C-NLS Nucleaseの特長

  • 産生:E. coli
  • C末端に核移行シグナル(Nuclear localization signal:NLS)を付加されています。
  • RNP複合体を形成後、細胞に入るとすぐに核移行シグナルに従って核に局在化します。
  • in vitro DNA切断アッセイにより、高効率かつ特異的な標的guide RNAをスクリーニングすることができます。
  • 特異的guide RNAと共にエレクトロポレーションまたはインジェクションすることで、 in vitro 遺伝子編集が行えます。
  • DNAフリーシステムで、ゲノムに外来DNAを挿入するリスクを回避します。
  • 切断効率が高く、またCas9タンパク質のC末端に核局在化配列(NLS)があることで核内への侵入を確実にします。
  • 他のシステムと比べて、オフターゲット切断の可能性を最小限に抑え、Cas9 RNP複合体が細胞から迅速に除去されることが報告されています。
  • mRNAまたはプラスミド系と比較して転写および翻訳の過程が必要ないため、時間の節約になります。
  • ユーザーの目的(in vitro切断アッセイ、RNP複合体トランスフェクション、マイクロインジェクションなど)に合わせて使用できます。
    
GenCrispr Cas9 Nuclease
(#Z03386)
GenCrispr Cas9-C-NLS Nuclease
(#Z03385)
タンパク質の純度>95%>95%
低エンドトキシン(<0.1 eu/ug)×
非特異的DNase活性
(Gold)
非特異的RNase活性
高い生物活性


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キット内容

  • GenCrispr Cas9 nuclease(#Z03386のみ)
  • GenCrispr Cas9-C-NLS nuclease(#Z03385のみ)
  • Reaction buffer

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使用例

GenCrispr Cas9/Cas9-C-NLS Nucleaseの使用例1

GenCrispr Cas9 Nuclease(#Z03386)を用いたin vitro DNA切断アッセイ
反応は推奨条件に従って設定し、切断後の産物は1%アガロースゲルで分離した。
Input DNA:EcoRV線形化pUC57プラスミドDNA

GenCrispr Cas9/Cas9-C-NLS Nucleaseの使用例2

GenCrispr Cas9-C-NLS Nuclease(#Z03385)を用いたin vitro DNA切断アッセイ
反応は推奨条件に従って設定し、切断後の産物は1%アガロースゲルで分離した。
Input DNA:EcoRV線形化pUC57プラスミドDNA

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[在庫・価格 :2024年04月27日 00時00分現在]

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(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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