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定量PCR用逆転写酵素活性/DNAポリメラーゼ活性を併せ持つ改変型Taqポリメラーゼ Volcano 2G DNA polymerase

掲載日情報:2016/03/01 現在Webページ番号:63755

逆転写酵素活性を併せ持つ改変型Taq DNA ポリメラーゼ

Volcano 2G DNA polymeraseは逆転写酵素活性とDNAポリメラーゼ活性を併せ持つ改変型Taqポリメラーゼです。Volcano 2G DNA polymeraseを用いると、別途逆転写反応を行わずに、mRNAをテンプレートとして、定量PCRを行うことが可能です。

参考文献:Structure and Function of an RNA-Reading Thermostable DNA Polymerase. Blatter, N., et al., Angew. Chem. Int. Ed., 52:11935~11939.(2013)

定量PCR用逆転写酵素/DNAポリメラーゼ活性を併せ持つ改変型ポリメラーゼのアプリケーション例

酵素単品のほか、リアルタイムPCRに必要な試薬があらかじめミックスされた Volcano2G RT-PCR 2x Master Mixと、細胞懸濁液から直接RT-PCRが行える VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mixがあります。

特長

  • 逆転写反応とPCR反応を同時に行うことが可能です。
  • 別途逆転写反応を必要とせず、ひとつの酵素で、RT-PCRを実施できます。
  • 熱安定性が高く、高温で逆転写反応が行えるため複雑な二次構造のRNAに対しても有用です。
  • 60~300 bpのDNA増幅に最適化されています。
  • プライマーの設計は、ゲノム由来の増幅を防ぐため、exon-exon junctionsをはさむように設計することを推奨します。

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アプリケーション例

定量PCR用逆転写酵素/DNAポリメラーゼ活性を併せ持つ改変型ポリメラーゼのアプリケーション例

Volcano 2G DNA polymeraseでは、従来のone-step PCRポリメラーゼのように個別に逆転写反応のステップを設ける必要はありません。

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関連製品:定量PCR用マスターミックス

Volcano2G RT-PCR 2x Master Mix

Volcano 2G DNAポリメラーゼと定量PCRに必要な試薬があらかじめミックスされた マスターミックスです。
Taq manプローブまたはGreen dyeで検出する2タイプの製品があります。

Volcano2G RT-PCR Probe 2x Master Mix
:蛍光色素 GreenDyeでの検出に

Volcano2G RT-PCR GreenDye 2x Master Mix
:TaqManプローブでの検出に

■Volcano2G RT-PCR 2x Master Mixの使用例

Volcano2G RT-PCR 2x Master Mixの使用例

Volcano2G RT-PCR Master Mix (Green dyeタイプ )を用いて行ったリアルタイムPCRの結果

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VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix

RNA抽出不要!

  • RNAの抽出を必要とせず、細胞に本製品と任意のプライマーを添加するだけで定量PCRが行えます。
  • Volcano2G DNA polymeraseが含まれるMaster Mixと、Lysis bufferのセットです。
  • 別途、プローブを添加することで定量PCRを行えます。
  • 推奨増幅サイズ:60~300 bp
  • 使用する細胞数:100~1,000 cells

VolcanoCell2G RT-PCR 2× Master Mix (#7101S, #7101M)はVolcano2G Cell 2x RT-PCR Master Mix(#7100S, #7100M)の後継品で、細胞試料の調製が簡便にできるLysis Bufferが添付されました。

■VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mixの使用例

Volcano2G Cell 2x RT-PCR Master Mixの使用例1 Volcano2G Cell 2x RT-PCR Master Mixの使用例1

細胞からのダイレクトRT-qPCR
(上図)”0-step” RT-qPCRのワークフロー。通常の2-step RT-qPCRよりも簡単かつ迅速である。
(下図) Lund Human Mesencephalic ( LUHMES) 細胞 をVolcanoCell2Gのプロトコルに従って懸濁し、GAPDH mRNAを検出した。

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VolcanoCell2G RT-PCR 2× Master Mix (including separate lysis buffer)
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VolcanoCell2G RT-PCR 2× Master Mix (including separate lysis buffer)

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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