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毒性が低く、高効率な遺伝子導入の条件検討に siRNAトランスフェクション最適化キット

掲載日情報:2017/07/27 現在Webページ番号:63751

siRNAやmRNAのトランスフェクションの最適な条件を絞り込むためのプレートです。トランスフェクション試薬の種類・濃度とsiRNA・mRNAの濃度を変えた140種類の条件を、一度のアッセイで比較検討できます。細胞を播種するだけで細胞表現型への影響が少なく、しかも高効率な条件を簡単に絞り込むことができます。(専用ソフト付き
このトランスフェクション最適化キットで絞りこんだ条件を元にしたカスタムプレートの作製受託も承っています。

固相トランスフェクションプレート(CPトランスフェクションプレート)の技術

毒性が低く、効率が高いトランスフェクション条件を検討するためのソフトです。各ウェルの細胞生存量をカラーマップで表示し、全140種類の条件のトランスフェクション効率と細胞毒性が一目で分かる散布図にプロットします。また細胞のみの非トランスフェクション条件の複数のウェルから細胞播種のばらつきを評価できます。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

固相トランスフェクションプレート(CPトランスフェクションプレート)の技術

固相トランスフェクションでは導入したい核酸、導入試薬、アクセラレーターからなる複合体をあらかじめプレートウェル上に安定に固定化するため、細胞を播種するだけで簡単にトランスフェクションを行えます。アクセラレーターは細胞への核酸導入効率を高めるため、希少細胞や難しい細胞へのトランスフェクションも適用できる可能性があります。siRNAトランスフェクション最適化キットの中のプレートには、siRNA量と遺伝子導入試薬の種類、濃度を変化させた140の異なる条件が2ウェルずつ(細胞死を誘導する陽性対象siRNAと陰性対象RNA)が固相化されています。

播種後に脱泡などの目的で、遠心機によるスピンダウンを推奨します。

アクセラレーターの効果

  • トランスフェクション複合体の安定化
  • トランスフェクション能力の向上
固相トランスフェクションプレート(CPトランスフェクションプレート)の技術

従来法との比較、優位性

  • トランスフェクション複合体と細胞との接触確率の向上
固相トランスフェクションプレート(CPトランスフェクションプレート)の技術
方 法 フォワード法 リバース法 固相法+アクセラレーター
サンプル調製 × 複雑 △ 機械化可能 ○ 不要(播種するだけ)
プレートの保存 × 不可能 × 不可能 ○ 可能(-20℃で12ヶ月)
導入効率 △ 中程度 ○ 中程度~高い ◎ リバース法と同等~高い
データの再現性 △ 低い~中程度 ○ 高い(機械設定必須) ◎ 高い
ライブラリ規模 × 小 △ 小~大(機械化が必要) ○ 小~大

使用例

固相トランスフェクションプレート(CPトランスフェクションプレート)の使用例

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実績細胞

Cell lines
細胞株
HeLa Cervix carcinoma ヒト子宮頸がん
T-47D Breast cancer ヒト乳腺がん
SK-BR-3 Breast cancer ヒト乳腺がん
MCF7 Breast cancer ヒト乳腺がん
MDA-MB231 Breast cancer ヒト乳腺がん
MDA-MB-435S Breast cancer ヒト乳がん
SHSY5Y Neuroblastoma ヒト神経芽細胞腫
U231 Neuroblastoma 神経芽細胞腫
HEK293, 293T Embryonic kidney ヒト胚性腎細胞
Caco2 Adenocarcinoma, colon ヒト結腸腺がん
HCT116 Colon Carcinoma ヒト大腸がん
SW480 Colon adenocarcinoma ヒト結腸腺がん
HepG2 Hepatocellular carcinoma ヒト肝細胞がん
NT2(NTERA-2) Teratocarcinoma ヒト奇形癌腫
NIH/3T3, 3T3-L1 Embryonic fibroblast マウス胎仔由来線維芽細胞
PC-12 Pheochromocytoma ラット褐色細胞腫
MDCK Madin-Darby canine kidney cell
メイディン・ダービー・イヌ腎細胞
Normal Cell
正常細胞
Rat brain cortex neuronal cells
Rat primary neuronal cells
Rat primary astrocyte
primary mouse embryonic fibroblast(MEF)
Human Endotherial cells(HUVEC)
Human Epitherial cells(PrEC, NHBE, HMEC)
Human smooth muscle cells(UASMC)
Human breast cancer Cell
ヒト乳がん細胞
Mice Bearing human tumor xenografts
Stem Cells
幹細胞
Human mesenchymal stem cell(hMSCs)
Mouse neuronal stem cell

その他の細胞腫(初代培養細胞や正常細胞など)の実績についてはお問い合わせください。

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通常品の価格

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固相トランスフェクションプレート (CPトランスフェクションプレート)作製受託サービス

固相トランスフェクションプレート 作製受託サービスのご依頼を検討される場合は、siRNAトランスフェクション最適化キットで使用する細胞ごとに最適化条件をご検討下さい。絞りこんだ条件を元にカスタムプレート作製を行います。詳細はこちら→固相トランスフェクションプレート (CPトランスフェクションプレート)作製受託サービス

条件の評価は、専用ソフト TF Condition Viewerを使用します(Microsoft Excel 2003以上が必要)。メーカーホームページよりダウンロードして使用してください。メーカーホームページはこちら
細胞の播種度や培養時間の検討には最適化キットが複数必要となります。
特殊プレートの使用をご希望の場合には、ご相談下さい。

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