導入困難な細胞へのトランスフェクションからハイスループットスクリーニングまで 固相トランスフェクションプレート (CPトランスフェクションプレート)のダブルノックダウンへの適用事例
掲載日情報：2015/08/21 現在Webページ番号：63690
※固相トランスフェクションプレートの紹介ページはこちら。
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体系的ダブルノックダウン
- ウエスタンブロットにより、Gene1, 2それぞれ個々のノックダウンを同時に検出できた。
- NTCは非ターゲットコントロール。
- ダブルノックダウンの有効性が示された。
固相siRNAトランスフェクション法を用いて、MRC5細胞で80遺伝子ライブラリーのコンビトナリーノックダウンを行い、5日後の生存率を測定した。
まとめ
- ダブルノックダウンスクリーニングがうまく行われたことを確認した。
- 解析間での再現性を確認した。
- 遺伝子間相互作用を示す候補を見出した。
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