導入困難な細胞へのトランスフェクションからハイスループットスクリーニングまで 固相トランスフェクションプレート (CPトランスフェクションプレート)の初代培養細胞と浮遊細胞への適用事例
掲載日情報:2015/08/21 現在Webページ番号:63688
※固相トランスフェクションプレートの紹介ページはこちら。
追加しました。
- 平滑筋細胞:Normal Human Umbilical Artery Smooth Muscle Cells (UASMC)
- 内皮細胞:Normal Human Umbilical Vein Endothelial Cells(HUVEC)
- 上皮細胞:Normal Human Bronchial / Tracheal Epithelial Cells (NHBE)
- 初代肝細胞:Primary Human Hepatocytes
- ラット由来初代神経細胞:Rat Primary Neuronal Cells
- マウス由来初代神経細胞:Primary Mouse Neuronal Cells
- 浮遊系細胞への適用 - K562
- 浮遊系細胞への適用 - Jurkat
平滑筋細胞:Normal Human Umbilical Artery Smooth Muscle Cells (UASMC)


Y axis:CellDeath/non-silencing siRNA POC
X axis:solid-phase transfection conditions
生残率アッセイの減少している条件と、顕微画像とは良好な相関が認められた。また、ネガティブコントロールsiRNA導入細胞では、顕著な細胞障害、形態変化は認められなかった。
追加しました。
内皮細胞:Normal Human Umbilical Vein Endothelial Cells(HUVEC)

トランスフェクション試薬A (左)>トランスフェクション試薬B (右)
細胞に適したトランスフェクション試薬を選択することで、十分なノックダウン効率及び、低い細胞毒性を有する導入条件を見出すことが可能。
追加しました。
上皮細胞:Normal Human Bronchial / Tracheal Epithelial Cells (NHBE)

Y axis:CellDeath/non-silencing viability counts
X axis:solid-phase transfection conditions
*Orange arrows indicates excellent transfection condition for NHBE cells
上皮系細胞においても、十分なノックダウン条件、効果が見出された。

Y axis:CellDeath/non-silencing siRNA viability counts
Y chart:CellDeath/non-silencing siRNA POC
X axis:solid-phase transfection conditions
*Gray bar ; un-treated cells viability counts
取得組織が異なる上皮細胞においても、望ましいトランスフェクション条件が見出された。
追加しました。
初代肝細胞:Primary Human Hepatocytes

Y axis:CellDeath/non-silencing siRNA viability counts
初代ヒト肝細胞においても高い導入効率を達成し、細胞障害性も軽度であった。
追加しました。
ラット由来初代神経細胞:Rat Primary Neuronal Cells

Cell resource
Primary neuronal cells derived from rat
Evaluation Methods
Total RNA extraction:48hrs after seeding
siRNAs:Negative control siRNA
Target gene siRNA (potency≒80%)
Quantification type:RT-PCR
(Reference gene : GAPDH)
Calculation method : ⊿⊿Ct
初代神経細胞においても、広範な固相系遺伝子導入条件を検討することで、十分なノックダウン効果を見出すことができた。 さらに、細胞障害性および、神経特異的な応答性などについても、無処置群と遜色ないことが確認された。
追加しました。
マウス由来初代神経細胞:Primary Mouse Neuronal Cells

ラット初代神経細胞同様、マウス由来初代神経細胞においても、十分なノックダウン効果を達成した。
従来法で最適化された導入条件と比較しても、mRNAノックダウンレベルは、固相法が上回っており、従来法では達成しえない効率でsiRNA導入が可能であることが示された。
追加しました。
浮遊系細胞への適用 - K562

X axis:non-silencing/un-treated POC (transfection cytotoxicity index)
Y axis:CellDeath/non-silencing siRNA POC
Z axis ; Z’ factor (n=4)
*Each transfection condition within the red circle were highly efficient with low cytotoxic/variation.

Relative viability > 60%
POC (%) <15%
Z’ factor >0.5
Y axis:CellDeath/non-silencing siRNA viability counts
*Gray bar ; un-treated cells viability counts
接着系細胞と同様に、浮遊系細胞においても十分な導入効率を見出せた。
追加しました。
浮遊系細胞への適用 - Jurkat

X axis:non-silencing/un-treated POC (transfection cytotoxicity index)
Y axis:CellDeath/non-silencing siRNA POC
Z axis ; Z’ factor (n=4)
*Each transfection condition plots within red circle were high efficient and low cytotoxic/variation.

Relative viability > 60%
POC (%) <15%
Z’ factor >0.5
Y axis:CellDeath/non-silencing siRNA viability counts
*Gray bar ; un-treated cells viability counts
接着系細胞と同様に、浮遊系細胞においても十分な導入効率を見出せた。
追加しました。
製品情報は掲載時点のものですが、価格表内の価格については随時最新のものに更新されます。お問い合わせいただくタイミングにより製品情報・価格などは変更されている場合があります。
表示価格に、消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので、あらかじめご了承下さい。