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免疫応答研究に有用(CD4細胞,T4細胞,ヘルパーT細胞) Act-T4 Cell Kit

掲載日情報:2020/06/12 現在Webページ番号:63655

CD4T細胞表面の活性化マーカーであるCD134(OX40)とCD25の発現をフローサイトメトリーを用いて測定することにより,活性化CD4T細胞の検出および定量するキットです。

OX40 assayとは

Recently, a whole blood technique involving flow cytometry and detection CD25 and CD134 (OX40) expression on the surface of activated CD4+ T cells (OX40 assay) was demonstrated to be highly accurate. The results obtained were concordant with those obtained from more traditional methods of antigen-specific T cell detection. Several studies have validated the preclinical use of this method against virus (e.g., CMV, EBV, HCV, HIV) or bacteria (e.g., Mycobacterium tuberculosis), which can also be used to evaluate general immunocompentence against mitogens. CD134 is a secondary costimulatory molecule. Genetic studies in mice have shown that CD134-CD134L (OX40-OX40L) interactions are crucial for the generation of memory T cells, promoting the survival of antigen-specific effector T cells. Expression of CD134 in CD4+ T cells reachs its maximum level 24-48 hours following the activation by antigen or mitogen; unstimulated CD4+ T cells do not express CD134. After stimulation, T cells express the high-affinity receptor IL2R (CD25). Coexpression of CD134 and CD25 surface molecules allows specific detection of activated antigen-specific CD4+ T cells following antigen exposure by flow cytometry.Combining whole-blood culture with detection of this induced coexpression of CD25 and CD134 affords an extremely simple assay that allows detecting responses to a diverse range of antigens. Results are consistent with serology test, cell proliferation studies and other techniques based on IFN-gamma production levels, but this whole-blood assay (OX40 assay) detects much higher levels of antigenspecific cells than intracellular cytokine assays, and also the cells retain viability and can be sorted for in vitro expansion for molecular studies and potentially for therapeutic studies.

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特長

  • キットには4種類の蛍光標識抗CD抗体の混合物が含まれています。
  • 抗原特異的および抗原非特異的な免疫応答の両方を測定できます。
  • PBMCの分離操作は不要です。
  • 測定試料:全血(ヘパリン処理)

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使用例

Act-T4 Cell Kitの使用例1

Select apoptotic / dead cells using a forward scatter vs side scatter dot plot to exclude them from the analysis.

Act-T4 Cell Kitの使用例2

Select T cells (CD3+) performing a CD3-PerCP-Cyanine5.5 vs side scatter gate followed by a second gate on lymphoid area on a forward scatter vs side scatter dot plot. Note that PHA file shows increased granularity and size in CD3+ lymphocytes and requires a wider gate to capture the whole lymphocyte population.

Act-T4 Cell Kitの使用例3

Select CD4+ T cells based on their CD3 and CD4 positive expression.

Act-T4 Cell Kitの使用例4

Finally activated CD4+ T cells can be identified by the coexpression of CD25 and CD134 surface receptors. Gate for CD4+ T CD25+CD134+ cells is fixed on basis of negative control (no Ag) and positive control (PHA and/or SEB tube) cultures. Afterwards, this gate is applied to subsequent antigen tubes.Results of activated CD4+ T cells are usually expressed as percentage of CD4+T CD25+CD134+ cells respect to CD4+ T cells.

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操作方法概略

Act-T4 Cell Kitの操作方法概略

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キット内容

  • Antibody (4-antibody combination,anti-CD4,FITC / CD134,PE / CD3,PerCP-Cyanine5.5 / CD25,APC)
  • Erythocyte lyse-non-wash solution (QuickLysis)

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価格

[在庫・価格 :2021年09月18日 00時14分現在]

※ 表示されている納期は弊社に在庫が無く、取り寄せた場合の納期目安となります。
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Act-T4 Cell Kit
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説明文
法規制等
保存条件 4℃,暗所保存,凍結禁止 法規備考
掲載カタログ

製品記事 フローサイトメトリー用マルチカラー抗ヒトCD抗体
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Act-T4 Cell Kit

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お問い合わせ先

(テクニカルサポート 試薬担当)

reagent@funakoshi.co.jp

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