従来のPNGase Fよりも幅広いN型糖鎖の切断が可能な酵素 PNGase F PRIME^TM Glycosidase

PNGase F PRIMETMは、PNGase Fを改変した酵素（グリコシダーゼ）で、非常に幅広いN型糖鎖の切断が可能です。同条件下で、野生型PNGase Fでは切断できず、これまで質量分析などで検出できなかった糖鎖構造も解析できます。

※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

※活性定義：Achieves complete deglycosylation of 10 μg of RNase B incubated in 1X PBS with 1 μl of　PNGase F PRIME™ for 5‐10 minutes at 37°C or room temperature. Separation of reaction products are visualized by SDS‐PAGE.

PNGase F PRIMETMで30分（Lane 1, 2）または60分（Lane 3, 4）処理したRNase Bを変性させて泳動し、クマシー染色を行った。

抗VEGF抗体（IgG1）をPNGase F PRIMETMまたは他社PNGase Fを用いて酵素処理し、Mass Spectrometryで解析した。他社PNGaseFで検出できなかった糖鎖を含む11種類の糖鎖構造が検出できた。

天然型の血液感染性糖タンパク質FetuinをPNGase F PRIMETMまたは他社PNGase Fを用いて酵素処理し、HPLCで解析した。PRIMETMで処理した試料では、シャープかつ高いS/N比のシグナルが得られ、また、他社PNGase Fでは得られないピークを検出することができた。

PNGase F PRIMETMを用いてマウス脳組織を処理し、MALDI-IMSによりN型糖鎖を解析した。画像中の星マーク（緑、青、赤）のピークの分布を重ねた画像を右記に示す。

PNGase F PRIMETMを用いて、ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）ヒト前立腺組織切片（5 micron）を処理し、7T MALDI-FTICR Solarix Mass SpectrometryおよびFlexImagin 4.1 Softwareを用いてN型糖鎖のイメージング解析を行った。

左上：H&E stained image (the area of the highest density of tumor shown in the circle)
左下：Typical tumor N-glycan pattern for a single glycan, an Man6 at m/z=1419
右図：two-glycan overlay is shown for the tumor glycan at m/z = 1419 (in green) and a mono-sialylated biantennary glycan at m/z = 1976 (top right panel, orange) and a mono-sialylated and core fucosylated glycan at m/z = 2122 (bottom right panel, blue)