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ACT1 CytoToxicity Assay Kit
フローサイトメトリーによる細胞傷害測定キット ACT1 CytoToxicity Assay Kit
掲載日情報:2015/11/30 現在Webページ番号:63531
細胞媒介性細胞傷害(CMC)や抗体依存性細胞傷害(ADCC)を、フローサイトメトリーによりnon-RIで測定するキットです。
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特長
- 一般的なCMC/ADCC測定に用いられる、放射性物質の51Crは使用しません。
- 細胞溶解活性の定量がシングルセルベースで行えます。
- 様々な哺乳動物由来細胞に使用できます。
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操作方法概略
- Membrane stain (CFSE analog) で標的細胞集団をラベルする。
- エフェクター細胞と標的細胞を混合しインキュベートする。
- Live/Dead stain (7AAD)で死細胞を特異的に染色する。
- フローサイトメーターで解析する。
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使用例
To test natural killer ability of swine γδ lymphocytes, K562 cells were stained with CFSE analog. γδ lymphocytes were added at: effector (E)/ target (T) ratios of 25:1, 50:1, 100:1 and incubated for 4 hours at 37℃. Following incubation 7AAD (live/dead) stain was added directly to each tube, incubated for 15 min on ice and analyzed via flow cytometry(Figure 1).
Following analysis, data can be imported into dot plots to calculate percentages of cells separated into various quadrants. % Cytotoxicty can be determined by an increase of target cells (lower right quadrant) moving into upper right quadrant and calculated by (R1/(R1+R2))×100 (Figure 1). By graphing results it can be determined if the assay parameters are setup properly (Figure 2). As demonstrated in the graph, a linear increase indicates the assay is optimized and an E/T ratio will be optimal for the experiments.
Figure 1

Figure 2

Cytolytic activity by γδ lymphocytes were analyzed by gating target cells (upper and lower right quadrants) R2 (see below) and overlaid in a histogram (Figure 3).
Figure 3

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キット内容
- Membrane stain (CFSE analog)
- Live/Dead stain (7AAD)
- PBS with Ca2+ and Mg2+
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使用文献
- Eiz-Vesper B., et al., Transfusion, 46(7):1210-1220(2006).
- Abrahamian F., et al., Clin. Exp. Immunol., 159(3):344-350(2010).
- Wai LE, et al., J. Immunol., 186(1):222-229(2011).
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価格
[在庫・価格 :2025年04月25日 20時15分現在]
詳細 | 商品名 |
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文献数 | ||
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ACT1 CytoToxicity Assay Kit |
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本製品は取扱中止になりました | 3 | ||
[在庫・価格 :2025年04月25日 20時15分現在]
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