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ヒト由来細胞で発現させた高活性の組換え体Noggin HumaXpress Recombinant Human Noggin

掲載日情報：2020/06/12 現在Webページ番号：63143

ヒューマンザイム /
HumanZyme, Inc.
[メーカー略称：HMZ]

改良型ヒト由来細胞を用いたタンパク質発現システム「HumaXpress」によって産生した、ヒトNoggin組換え体タンパク質です。E. coliやCHO細胞などを用いた他の発現系と異なり、「HumaXpress」では糖鎖付加が適切に行われるため、天然型タンパク質に匹敵する高い活性と安定性を有します。

※本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。

HumanZyme社　組換え体Nogginの取り扱いについて

本ページに掲載のHumanZyme社の組換え体について、当社取り扱いは終了となりました。代替品となるRecombinant Human Noggin GMP Protein（R&D Systems社）についてはこちらをご覧下さい。

Nogginとは
特長
生理活性および純度の検証
価格

Nogginとは

Nogginは骨形成タンパク質（BMP：Bone morphogenetic protein）のアンタゴニストで、分泌型ホモ二量体の糖タンパク質です。ヒト胚性幹細胞（ES細胞：embryonic stem cell）の培養において、フィーダー細胞または馴化培地不使用でかつFGF basic添加の培養条件下では、BMP活性に拮抗作用を示し、幹細胞は未分化多能性状態の維持が可能です。

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特長

正確にグリコシル化された、ジスルフィド結合を有する安定性が高いホモ二量体です。
エンドトキシン濃度が非常に低く（＜1 EU/ug）、動物由来成分も含みません。
EC50：通常 ≦25 ng/ml
純度：＞95％
分子量：65 kDa (グリコシル化ホモ二量体)
産生：HEK293細胞

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生理活性および純度の検証

Activity Assay（左）
ATDC5細胞において、HumaXpress Recombinant Human Nogginの活性を、rh-BMP-4誘導アルカリホスファターゼ産生の用量依存的阻害により測定した。ED 50が0.005 µg/mlという結果から、E. coli発現非ジスルフィド結合二量体のヒトNoggin組換え体（通常ED50は0.05 µg/ml）と比べて活性が10倍高いことが分かる。

Purity Confirmation（右）
HumaXpress Recombinant Human Nogginタンパク質のSDS-PAGE結果

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HumaXpress Recombinant Human Noggin（10～20 pg/ml）存在下で培養した、hESコロニーの多能性幹細胞マーカー発現
HumaXpress Recombinant Human Noggin存在下、hES細胞は未分化幹細胞の典型的な表面マーカーTRA1-60、TRA1-81、SSEA-4および転写因子OCT3/4の高い発現を示した。
A：TRA1-60
B：SSEA-4
C：TRA1-81
D：OCT3/4

抗OCT3/4抗体を用いたウエスタンブロット像
レーン1：ネガティブコントロール
レーン2：ポジティブコントロール（OCT3/4）
レーン3：10 pg/mlのHumaXpress Recombinant Human Nogginで処理したヒト胚性幹細胞
レーン4：20 pg/mlのHumaXpress Recombinant Human Nogginで処理したヒト胚性幹細胞

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