マルチプレックスリアルタイムPCRによるEML4-ALK融合遺伝子の検出キット EML4-ALK Fusion Gene Detection Kit

ALK(Anaplastic Lymphoma Kinase）のキナーゼドメインとEML4(Echinoderm Microtubule Associated Protein Like 4)の融合の原因である2p21と2p23の逆位は、非小細胞肺がん（NSCLC)の5～7％で観察されます。この逆位した遺伝子は、がんの増殖を促進し、EGFレセプター（EGFR1）活性阻害による治療効果を抑制する可能性が示唆されています。EML4-ALK融合遺伝子を持つ患者において、未分化リンパ腫キナーゼ、またはCrizotinibのようなALK阻害物質が観察されたという結果も示されました。
ALK融合遺伝子に対する診断検査では、NSCLCに対するパネル診断が行われていますが、煩雑かつ時間がかかるなどの欠点が挙げられます。

検出可能なEML4-ALK融合バリアント

※各バリアントは区別して検出できません。

検出結果

In the process of qPCR, the positive strands of Yin-Yang Probe bind to the PCR products during the annealing step, and release fluorescence signals. Signals are collected in the annealing step.
cDNA is synthesized by adding purified RNA to the ready to use cDNA reaction mix. The resulting cDNA is mixed with the specific PCR primers and probes mix for detection of fusion variants. qPCR is performed in a real-time PCR instrument with optical filters forthe detection of FAM and HEX.

Schematic of the primers and probes designed in the EML4-ALK detection kit. Graph on the top shows an example of the GUSB (internal control). Graph on the bottom shows the primer/probe design to detect EML4-ALK variants. Primers are depicted in horizontal blue arrows.

Example of the amplification curve of EML4-ALK positive sample. The internal control is shown in green and the positive control is shown is blue.

※FAM(励起495 nm／蛍光520 nm）やHEX（励起535 nm／蛍光556 nm）を検出できるqPCR装置が別途必要です。