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目的のヒト組換え体タンパク質をヒト細胞で大量かつ迅速に産生 r-PEx組換え体ヒトタンパク質産生受託サービス

掲載日情報:2022/03/28 現在Webページ番号:6115

ImmunoPrecise Antibodies (Europe) 社のタンパク質発現プラットフォームr-PEx技術により,翻訳後修飾された高品質な組換え体タンパク質を作製する受託サービスです。目的タンパク質の遺伝子配列またはタンパク質配列情報のみでご依頼いただけます。
本製品は研究用です。研究用以外には使用できません。


特長

  • タンパク質の産生に要する時間が8週間程度と,非常に迅速です。
  • TEVプロテアーゼ切断サイト,複数のタグ(6×His,Strep,Fc,FLAG)を含むpUPEベクターをご用意しています。また,細胞内発現用,分泌発現用のベクターも選択できます。
  • HEK293E細胞を用いて目的遺伝子を発現させ,糖鎖修飾が適切に行われたタンパク質を1~100 mg産生します。
  • また,HEK293ES細胞を用いて,N結合型糖鎖を欠損した結晶化グレードタンパク質を産生することも可能です。
  • 非常に低いエンドトキシンレベルの精製タンパク質をご提供します。

P. pastorisE. coliを用いる発現系でのご依頼も承ります。


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サービス概要図

組換え体ヒトタンパク質産生受託サービス概要図

1. PCRによる増幅または人工遺伝子合成により,コーディングDNAを作製する。

2. スタンダードな制限酵素認識部位である5'-BamHⅠと3'-NotⅠを用いて,4種類のpUPE発現ベクターと目的遺伝子とでライゲーションを行う。

3. HEK293E細胞で一過性発現させ(4 ml),トランスフェクション後3~6日の時点で,目的のタンパク質の産生に適した発現ベクターを選択する。

4. HEK293E細胞を大量培養する(1~30 L)。

5. 目的タンパク質を精製し,品質検査を行う。


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タンパク質の産生実績例

タンパク質 HEK293E細胞中での発現レベル(mg/L)
SEAP 100
IgG1 25~60
Complement B*1(文献 1. 12
Complement C2a(文献 2. 15~20
Complement C3 2~3
GlycoproteinⅠbα 4
TAFI*1(文献3) 3~4
β2-GlycoproteinⅠ*2 10~15

*1HEK293ES細胞を用いて産生。
*2HEK293E細胞およびHEK293ES細胞を用いて産生。


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参考文献

1. Milder, F. J., et al., Nat. Struct. Mol. Biol., 14 (3), 224~228 (2007).
2. Milder, F. J., et al., Structure, 14 (10), 1587~1597 (2006).
3. Marx, P. F., et al., Blood, 112 (7), 2803~2809 (2008).


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ご用意いただくもの

目的タンパク質の遺伝子配列またはタンパク質配列をお知らせ下さい。また,下記のオプションにも対応します。


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オプション

  • お客様に,トランスフェクショングレードのプラスミドDNA(任意の発現ベクターに組み込まれたもの)を提供していただく。
  • お客様に目的遺伝子をpUPE発現ベクターにライゲーションしていただき,トランスフェクショングレードのプラスミドDNAを必要量提供していただく。
  • お客様に,目的遺伝子の挿入されたプラスミドDNAを送付していただき,U-Protein Express社がトランスフェクション用のプラスミドを作製する。
  • U-Protein Express社が目的のcDNAと1種類のpUPEベクターとをライゲーションさせ,トランスフェクショングレードのプラスミドを作製し,トランスフェクションを行う。
  • U-Protein Express社が目的のcDNAと6種類のpUPEベクターとをライゲーションさせ,目的タンパク質の産生に適したベクターを選択し,トランスフェクショングレードのプラスミドを作製し,トランスフェクションを行う。

pUPE発現ベクターの使用に際し,ライセンス契約を締結していただく必要があります。


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発現させたタンパク質の発送方法

以下のいずれかの方法からご選択下さい。

  • 1ステップ精製したタンパク質の状態で送付する。
  • 複数ステップ精製したタンパク質の状態で送付する。

精製度は,精製するタンパク質の種類により異なります。詳細は,当社受託・特注品担当までお問い合わせ下さい。


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ご注文方法/価格

ご注文方法,お見積り等の詳細は,当社受託・特注品担当までお問い合わせ下さい。


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