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5-hmCを含むDNAを濃縮するキット Quest 5-hmC DNA Enrichment Kit

掲載日情報:2012/03/31 現在Webページ番号:5915

Zymo Research社エピジェネティクスロゴ

断片化したゲノムDNA試料中より5-ヒドロキシメチル化シトシン(5-hmC:5-Hydroxymethylcytosine)を含む配列を濃縮するキットです。試料中の5-hmCを特異的にグルコシル化する酵素(5-hmC glucosyltransferase)を用いて処理し、グルコシル化された5-hmC(5-ghmC)を特異的に認識するJBP (J-base Binding Protein) capture MagBeadsを用いて捕捉します。

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特  長

  • 3ステップによる操作で簡単に抽出できます。
  • キットにはコントロール用として、5-メチル化シトシン(5-mC)と5-hmCを含むDNAを9:1で混合した5-hmC control DNAが含まれています。
  • DNA試料量:5~4,000 ng
  • 得られた5-hmCを含むDNAは、定量的PCRや次世代シークエンシング、全ゲノム増幅、アレイ解析などに使用できます。

酵素阻害物質を含む試料は処理できません。

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操作方法概略

キットに含まれる5-hmC control DNAを添加したヒト脳由来DNAを本キットで濃縮後、キットに含まれるControl primersでPCRを行い、各種制限酵素で切断した。なお、5-mCを含むDNAはBamHⅠ部位を、5-hmCを含むDNAはKpnⅠ部位を有する。5-hmCを含むDNAのみを特異的に濃縮していることが分かる。本キットでの濃縮を行っていない5-hmC control DNAではKpnⅠによる切断は確認されなかった。

1. 5-hmCを含む試料DNAを、5-hmC glucosyltransferaseを用いてグルコシル化する。

2. JBP capture MagBeadsをグルコシル化した試料中に加え、室温でインキュベートする。

3. Elution bufferを使用してJBP capture MagBeadsを洗浄し、5-hmC試料を回収する。

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キット内容

  • JBP binding buffer
  • 5-hmC DNA elution buffer
  • JBP capture MagBeads
  • 5-hmC control DNA
  • Control primers
  • 5-hmC glucosyltransferase
  • 5-hmC GT reaction buffer
  • Magnetic rods

[在庫・価格 :2025年04月26日 00時00分現在]

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